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一种应用于EICP技术的大豆脲酶改良提取方法 

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申请/专利权人:河南理工大学

摘要:本发明公开了一种应用于EICP技术的大豆脲酶改良提取方法,该发明属于生物蛋白提取技术领域,包括如下步骤:用磨粉机将干燥的大豆磨成豆粉,过60目钢筛;将豆粉与去离子水按80gL比例混合,并用磁力搅拌器搅拌30分钟使其均质化;按1:10比例将CaSO4⋅2H2O加入到豆粉混悬液中以盐除多于蛋白质,并搅拌10分钟;将豆粉混悬液放入离心机中以4000rpm离心15分钟;离心后收集上清液,过120目滤布除去上清液中不溶性物质;使用电导率仪测定脲酶在25℃时的电导率变化值;最后将脲酶液装入试剂瓶放入4℃的冰箱中保存备用。此方法具有方法简明、易于操作、成本相对较低、脲酶提取时间更短以及提取的脲酶活性高的特点。

主权项:1.一种应用于EICP技术的大豆脲酶改良提取方法,其特征在于:包括以下步骤,1大豆粉碎磨粉:称取一定量的大豆,将大豆放入磨粉机研磨成豆粉后进行筛分;2浸泡:将筛分后的豆粉与去离子水按一定比例混合,并使用磁力搅拌器搅拌均匀,均质的豆粉混悬液;3CaSO4·2H2O的加入:按一定比例向豆粉混悬液中加入CaSO4·2H2O,以盐除豆粉混悬液中多余的蛋白质,而后放在磁力搅拌器上搅拌均匀;4离心、收集上清液:将豆粉混悬液分装离心管,放入离心机中在室温下离心,离心后收集上清液,上清液过滤布除去其中不溶性物质,上清液即为大豆脲酶;5脲酶活性测定及控制:大豆脲酶与尿素溶液混合,测定大豆脲酶在25℃时的电导率变化值;以此表征脲酶与尿素反应时尿素的水解速率,电导率的增加量与脲酶活性相关,必要时可向脲酶液中加入适量去离子水稀释到试验所需的活性;6低温存储:将脲酶装入试剂瓶,并放入4℃的冰箱中保存备用。

全文数据:

权利要求:

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