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申请/专利权人:广州达博生物制品有限公司
摘要:本发明提供了一种基于Cre重组酶的人腺病毒HAd5C改造方法,属于生物医药技术领域。本发明利用载体pBHGloxdeltaE13Cre,该载体敲除了腺病毒复制关键基因E1和E3,其余骨架基因完整,因此可以用于HAd5C骨架基因的改造,通过将阳性筛选的抗性基因构建至该载体上,避免了阴性筛选效率低耗时长的缺点,筛选得到阳性载体后,进一步将抗性基因敲除,不影响外源基因的插入与表达。
主权项:1.一种改造人腺病毒HAd5C的方法,其特征在于,包括:1对于敲除腺病毒复制关键基因的Admax系统腺病毒骨架载体,构建含抗性筛选标记1的表达框,表达框包含目的基因,同时在抗性筛选标记1两端设置重组酶切位点,得到抗性标记载体1;2对抗性标记载体1进行抗性筛选,筛选后的载体利用重组酶删除抗性筛选标记;所述的步骤1中所述的腺病毒复制关键基因为E3,目的基因的插入位点在ΔE3处。
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权利要求:
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