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申请/专利权人:福州海洋研究院
摘要:本发明公开一种抗爱德华氏菌卵黄抗体,是以爱德华氏菌为抗原制备灭活疫苗对蛋鸡进行免疫,收集鸡蛋后进行分离提纯获得所述爱德华氏菌卵黄抗体,具有特异性好、效价高的优点,用于防治爱德华氏菌引起的疾病和免疫学检测具有良好的效果;且使用健康母鸡所产鸡蛋为载体,安全无毒,成本低,产量高,易于产业化。
主权项:1.一种抗爱德华氏菌卵黄抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1抗原的制备:用TSB培养基将活化后的爱德华氏菌培养至对数期后期,取菌液离心后,用无菌PBS缓冲液洗涤菌体三遍并重悬,最后用0.4%的甲醛灭活,得到灭活的爱德华氏菌抗原;2将灭活的爱德华氏菌抗原与等量的弗式完全佐剂配合注射到生长状况良好的蛋鸡,进行初次免疫,若干次加强免疫时采用灭活的爱德华氏菌抗原与等量的弗式不完全佐剂配合进行注射,加强免疫后采集血清,用间接酶联免疫法ELISA测定血清效价;3提取卵黄抗体水溶性组分:收集第一次免疫后每一天产下的鸡蛋,分离卵黄,破碎去除杂蛋白,收集卵黄液,进一步去除脂蛋白与脂肪后,用去离子水稀释10倍,盐酸调pH至5.0,于-20℃中冷冻过夜,次日4℃缓慢解冻,至少进行冻融处理1次,再利用离心收集上清,即为卵黄抗体水溶性组分;4纯化:利用硫酸铵二次沉淀法进行卵黄抗体水溶性组分进一步纯化,最终得到抗爱德华氏菌卵黄抗体。
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权利要求:
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