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申请/专利权人：北京大学
摘要：本发明提供了一种基于机械偶联的蛋白质异质索烃的生物合成方法及其应用。本发明基于二聚结构基元介导的分子内缠结和正交分离型内含肽介导的定点环化，能够实现含有目标蛋白质与功能蛋白质基元的蛋白质异质索烃的模块化制备。本发明提供的方法基于合理的基因序列设计，不需要额外的胞外反应，通过表达纯化即可获得相应的蛋白质异质索烃。所制备的蛋白质异质索烃可以保留各组成功能基元对相应受体的亲和能力，同时由于索烃结构对蛋白质的构象具有限制作用，可以有效提升蛋白质的整体稳定性。利用本发明所述方法可将蛋白质药物的线型主链拓展为链环拓扑结构，制备得到的基于机械偶联的蛋白质异质索烃能够有效延长蛋白质药物的体内半衰期。
主权项：1.一种基于机械偶联的蛋白质异质索烃的生物合成方法，所述方法包括以下步骤：1设计蛋白质异质索烃的蛋白质前体序列，并合成所述蛋白质前体序列对应的编码基因序列；其中，所述蛋白质前体序列中至少包含：i形成二聚体的缠结基元；ii在细胞内发生正交偶联反应的两对环化基元；iii目标蛋白质；和iv功能蛋白质基元；其中，所述蛋白质前体序列中包含的形成二聚体的缠结基元为异质化的缠结基元，其包含第1缠结基元和第2缠结基元；优选的，所述异质化的缠结基元为能够形成异质二聚体结构的p53dim突变体对；2将步骤1设计的编码基因序列导入表达载体中，得到重组表达载体；3将步骤2所述重组表达载体转入宿主细胞中进行表达，获得融合蛋白；4对步骤3所述的融合蛋白进行纯化，得到基于机械偶联的蛋白质异质索烃。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京大学 基于机械偶联的蛋白质异质索烃的生物合成方法及其应用
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