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摘要:本发明的目的在于提供一种针对骨吸收代谢状态的β‑CTx化学发光检测方法和试剂盒,其采用辣根过氧化物作为化学发光标记物,具有灵敏度高,线性范围宽,准确度高,重复性好的优点,其特征在于:所述检测方法包括以下步骤:步骤1:进行第一次孵育:加入30μL被测样本和60μL的β‑CTx试剂R1到包被有链霉亲和素偶联物的微孔中,一起孵育15min,使抗原从血清中释放出来;步骤2:进行第二次孵育:加入60μL的β‑CTx试剂R2,孵育15min;步骤3:进行清洗:即吸取350μL清洗液加入到微孔中,清洗4次,将未结合在固相上的抗体和被测样本被清除;步骤4:进行读数:加入化学发光底物A、化学发光底物B,酶催化底物发光,通过光电倍增器测量发光强度。
主权项:1.一种针对骨吸收代谢状态的β-CTx化学发光检测方法,其特征在于:所述检测方法包括以下步骤:步骤1:进行第一次孵育:加入被测样本和β-CTx试剂R1到包被有链霉亲和素偶联物的微孔中,一起孵育,使抗原从血清中释放出来;所述β-CTx试剂R1具体为:生物素化的β-CTx捕获抗体;步骤2:进行第二次孵育:加入β-CTx试剂R2,孵育;所述β-CTx试剂R2具体为:辣根过氧化物酶标记的β-CTx检测抗体;步骤3:进行清洗:即吸取清洗液加入到微孔中,将未结合在固相上的抗体和被测样本被清除;步骤4:进行读数:加入化学发光底物A、化学发光底物B,酶催化底物发光,通过光电倍增器测量发光强度;步骤5:进行利用已知浓度的定标品绘制发光强度标准曲线,根据步骤4得到的发光强度对照所述发光强度标准曲线,计算得出待测样本中的骨吸收代谢状态的β-CTx含量。
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