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摘要：本发明公开了一种用于β‑CTX检测的抗体、试剂盒及其应用，属于体外诊断试剂、生物工程技术和医疗器械交叉领域，试剂盒包括发光试剂、固相试剂、校准品及质控品，其中发光试剂为吖啶酯标记的β‑CTX抗体溶液，固相试剂为包被有β‑CTX抗体的磁微粒的混悬液，本发明所述试剂盒通过双抗体夹心法原理进行检测，可搭载全自动化学发光检测仪进行自动化检测，具有灵敏度高、特异性强、检测范围宽、检测效率高的特点，本发明提供的试剂盒主要用于人体β‑CTX的检测。
主权项：1.一种β-CTX单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：抗原合成：在如SEQIDNo.1所示的多肽序列的多肽基础上偶联大分子载体蛋白，所述大分子载体蛋白为BSA、OVA中的一种或多种，制备出具有抗原性和免疫原性的重组免疫原；SEQIDNo.1：CysGluLysAlaHisAspGlyGlyArg；动物免疫：使用前述大分子载体蛋白制备的重组免疫原和佐剂，通过皮下注射对小鼠进行首次免疫，首次免疫后进行加强免疫，最后一次加强免疫后进行不加佐剂的腋下注射冲击免疫；细胞融合：提取前述小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行混合，加入PEG，诱导细胞进行细胞融合；单克隆抗体制备：SEQIDNo.1所示的多肽-OVA偶联物和SEQIDNo.2所示多肽的OVA偶联物以1μgml包被，间接法ELISA检测挑选双阳性克隆，经过亚克隆，确保形成单克隆时扩大培养，纯化得单克隆抗体；SEQIDNo.2：CysGluLysAlaHisAspGlyGlyArgGluLysAlaHisAspGlyGlyArg；抗体标记：将单克隆抗体与生物素进行混匀、反应后获得生物素标记的单克隆抗体；抗体配对筛选：将未标记的单克隆抗体孵育包被、封闭，加入SEQIDNo.2所示多肽的多肽-OVA偶联物进行免疫反应，清洗后加入生物素标记的单克隆抗体，清洗后加入SA-HRP孵育显色，450nm处读取OD值，挑选特异性强和灵敏度高的阳性配对。
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百度查询： 美康生物科技股份有限公司 一种用于β-CTX检测的抗体、试剂盒及其应用
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