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申请/专利权人:厦门大学
摘要:本发明提供了一种基于MALDI‑TOF‑MS体外筛选hMAT2A蛋白抑制剂的方法及其应用,涉及稳定同位素标记新药物发现技术领域。本发明提供了一种基于MALDI‑TOF‑MS体外筛选hMAT2A蛋白抑制剂的方法,通过MALDI‑TOF‑MS直接测定同位素标记的酶催化产物SAM与SAM‑D3的信号比值来相对定量与定性抑制剂的效果,克服了目前通过检测反应物ATP的含量而因ATP易水解带来的假阳性结果,同位素标记的引入解决了系统误差,操作简单,检测时间短1分钟样品;MALDI‑TOF‑MS的样品靶可重复利用,从而实现了MAT2A抑制剂的高通量筛选。
主权项:1.一种基于MALDI-TOF-MS体外筛选hMAT2A蛋白抑制剂的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:将待测药物、hMAT2A和反应液混合孵育,然后加入ATP和L-Met进行反应,离心后得到实验组上清;将二次纯化水、hMAT2A和反应液混合孵育,然后加入ATP和L-Met-D3进行反应,离心后得到对照组上清;将实验组上清与对照组上清混合得到待测样本,所述待测样本与基质混合后进行MALDI-TOF-MS测试,通过比较实验组与对照组的峰强度即可判断待测药物对hMAT2A蛋白的抑制效果。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 厦门大学 一种基于MALDI-TOF-MS体外筛选hMAT2A蛋白抑制剂的方法及其应用
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