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申请/专利权人:南京工业大学
摘要:本发明公开了一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母,包括:1在毕赤酵母GS115中异源表达3×IM7‑SED1融合蛋白,构建IM7酵母。2在大肠杆菌BL21DE3中异源表达CL7‑PETase融合蛋白,构建CL7‑PETase蛋白。3将IM7酵母和CL7‑PETase蛋白进行结合,实现PETase蛋白在毕赤酵母上的表面展示。本发明采用的间接表面展示的构建方法,克服了直接表面展示系统的表达量不足的缺点,同时与游离酶相比具有稳定性高,分离回收容易,连续操作可控,工艺简便的特点,并且表面展示酶区别于传统的物理或化学的固定化方法,对于PET这种刚性底物,表面展示酶更能充分有效地与底物接触,最大限度催化底物,可作为全细胞催化剂应用于PET塑料降解中的应用。
主权项:1.一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母,其特征在于,将IM7酵母和CL7-PETase蛋白结合构建得到的,其中,所述的IM7酵母是以毕赤酵母为宿主,异源表达3×IM7-SED1融合蛋白后培养得到的;其中,所述的CL7-PETase蛋白是以大肠杆菌BL21DE3为宿主,异源表达CL7-PETase融合蛋白后培养得到的。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南京工业大学 一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母
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