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申请/专利权人:兰立生物科技(苏州)有限公司
摘要:本发明属于生物样本检测技术领域,具体涉及一种能够快速检测TMAO生物标志物的方法及试剂盒。该方法以液质联用为基础,涉及(1)设置液相色谱条件;(2)设置质谱条件;(3)配制标准样品;(4)建立标准曲线;(5)待测血浆预处理;(6)预处理血浆样品检测等主要步骤。为便于操作,本发明还进一步提供一种试剂盒及其使用方法。本发明提供的能够快速检测TMAO生物标志物的方法,通过对样品进行合理的预处理,并配合优化合理的液相色谱和质谱条件,获得准确性高稳定性好的检测结果;本发明还提供的试剂盒,提供浓度准确的内标和标准样品,以减少实际操作步骤,提高检测效率。
主权项:1.一种能够快速检测TMAO生物标志物的方法,其特征在于,包括以下步骤:(S1)建立标准曲线:取空白血浆样品,加入甲醇后进行涡旋振荡,然后装入离心机进行离心处理,取上清液加水稀释;然后加入TMAO和内标,配制成一系列含内标浓度相同含TMAO浓度不同的标准样品;通过液相色谱-质谱联用对一系列标准样品进行测试,计算得到各标准样品对应的TMAO峰面积与内标峰面积的比值(Y)和各标准样品对应的TMAO浓度与内标浓度的比值(X),作出Y随X的变化曲线,即为标准曲线;(S2)预处理样品检测:通过液相色谱-质谱联用对预处理血浆样品进行检测,计算得到TMAO峰面积与内标峰面积的比值,代入标准曲线,得到预处理样品中TMAO浓度与内标浓度的比值;根据预处理过程中的稀释倍数计算得到原始血浆样品中TMAO的浓度;血浆样品预处理方法为:取血浆样品,加入含有内标的甲醇溶液后进行涡旋振荡,然后装入离心机进行离心处理,取一定量上清液加水稀释得预处理血浆样品。
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