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申请/专利权人：珠江医院
摘要：本发明公开了人SP-A1在Pichiapastoris中的表达，该方法将人SP-A1基因克隆至表达载体中，通过电击转化技术转入Pichia.pastoris，并从转化菌株中筛选出多拷贝转化子，用高表达的甲醇氧化酶1基因AOX1启动子、利用甲醇作为唯一碳源诱导对重组P.pastoris进行表达；在所述的诱导表达中，甲醇浓度为0.1～1.0％gml。本发明能生产大量、高活性的人SP-A1，其最大表达量可达150mgL，而且所表达的目的蛋白质能对巨噬细胞杀伤病原体发挥调理作用。
主权项：1.人SP-A1在pichiapastoris中的表达方法，其特征是：将人SP-A1基因克隆至表达载体中，通过电击转化技术转入P.pastoris，并从转化菌株中筛选出多拷贝转化子，用高表达的甲醇氧化酶1基因AOX1启动子、利用甲醇作为唯一碳源诱导对重组P.pastoris进行表达；其中，在所述的人SP-A1基因表达载体的构建中，所设计的扩增引物为：+5’-GATACGTAATGTGGCTGTGCCCTCTG-3’-5’-GCGGAATTCGAACTCACAGATGGTCAG-3’；所述的电击转化参数为1500V、25μF、400Ω；所述的甲醇浓度为0.1～1.0％gml。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 珠江医院 人SP－A1在pichia pastoris中的表达
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