恭喜南京农业大学三亚研究院刘斐获国家专利权
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龙图腾网恭喜南京农业大学三亚研究院申请的专利一种基于RAA技术的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫多重检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119876446B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510361936.5,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种基于RAA技术的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫多重检测方法是由刘斐;赵伊然;单衍可;杨麒澄;刘天密设计研发完成,并于2025-03-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于RAA技术的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫多重检测方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种基于RAA的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫三种病原的多重检测方法,所述检测方法分别根据副溶血弧菌TLH基因片段、白斑综合症病毒VP28基因片段和虾肝肠胞虫18SrRNA基因片段进行靶序列筛选,针对三种病原各自设计并筛选出一对特异性RAA引物和一条探针,如SEQIDNO:1‑9所示,提取组织样本中的DNA并构建荧光RAA反应体系,进行荧光RAA检测。本发明提供的基于重组酶聚合酶扩增技术的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫的检测方法,可用于以上三种病原联合检测,具有快速、高特异性、高敏感性的特点,可以满足疾病监测和筛查的需求。
本发明授权一种基于RAA技术的副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫多重检测方法在权利要求书中公布了:1.一种用于重组酶介导扩增检测副溶血弧菌、白斑综合症病毒和虾肝肠胞虫三种病原的引物探针组合,其特征在于,所述引物探针组合包括:(1)用于检测副溶血弧菌的特异性重组酶介导扩增引物及探针:正向引物:5’-CTTCATGTTGATGACACTGCCAGATGCGACGAA-3’;反向引物:5’-TTAGCGTCTCGAACAAGGCGTGAGTATCAAAC-3’;探针:5’-AGTACTCAACACAAGAAGAGATCGACAAAA-iROXdT-T-idSp-G-iBHQ2dT-GCGAAAGTGCTTGAG-C3-spacer-3’;其中,iROXdT是ROX荧光标记的dT核苷酸,idSp指碱基缺失,iBHQ2dT是带有BHQ2淬灭基团标记的dT核苷酸,C3-spacer指3’羟基封闭;(2)用于检测白斑综合症病毒的特异性重组酶介导扩增引物及探针:正向引物:5’-CATCGAAACCCACACAGGCAATATCGAGACA-3’;反向引物:5’-GATCCGCATCTTCTTCCTTCATCTGTGCATC-3’;探针:5’-AAACCTCCGCATTCCTGTGACTGCTGAGGT-iHEXdT-G-idSp-A-iBHQ1dT-CAGGCTACTTCAAGA-C3-spacer-3’;其中,iHEXdT是HEX荧光标记的dT核苷酸,idSp指碱基缺失,iBHQ1dT是带有BHQ1淬灭基团标记的dT核苷酸,C3-spacer指3’羟基封闭;(3)用于检测虾肝肠胞虫的特异性重组酶介导扩增引物及探针:正向引物:5’-AGACACCGCTGTAGTTCTAGCAGTAAACTATGCC-3’;反向引物:5’-CCGCGTTGAGTTAAATTAAGCAGCACAATCCAC-3’;探针:5’-ACAATGCTGGGTGTTGCGAGAGCGATGCTTGG-i6FAMdT-idSp-iBHQ1dT-GGGAGAAATCTTAGT-C3-spacer-3’;其中,i6FAMdT是FAM荧光标记的dT核苷酸,idSp指碱基缺失,iBHQ1dT是带有BHQ1淬灭基团标记的dT核苷酸,C3-spacer指3’羟基封闭。
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