恭喜浙江理工大学邓烨丰获国家专利权
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龙图腾网恭喜浙江理工大学申请的专利一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114720702B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210537942.8,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法是由邓烨丰;王秉;刘锋;阮晟超;邵帅;万军民;彭志勤设计研发完成,并于2022-05-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及文物检测领域,本发明公开了一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法,包括:纳米CuO的制备、纳米磁珠的制备;功能化纳米磁珠微粒的制备、特异性磁珠的制备、特异性纳米CuO的制备以及将所得特异性磁珠和特异性纳米CuO加入到待检测的丝素蛋白溶液中,震荡孵育,离心后移去上清液,置于双氧水中,将所得氧气通入压力传感器,使其压力变化的得到电阻变化,得出其丝素蛋白浓度。本发明结合抗原抗体与压力传感器,提供了具免疫特异性优点的丝素蛋白检测方法,特异性更强、检出限更低。
本发明授权一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法在权利要求书中公布了:1.一种免疫磁性增强检测丝素蛋白的方法,其特征在于包括如下步骤:步骤1:将CuCl2·2H2O溶解于含有PEG的水中,得到混合溶液,超声分散均匀;另行将NaOH溶解于PEG和水的混合溶液中,超声分散均匀;将两种混合溶液混合使其反应得到CuO溶液,进一步超声处理,加过量乙醇静置;用无水乙醇和水轮番清洗生成物,并用AgNO3溶液滴定,直至Cl-1完全清除;后对生成物离心分离,将产物保温,再研磨成粉体,高温煅烧后得到纳米CuO;步骤2:称取FeCl3·6H2O和FeSO4·7H2O溶解于水中,在充氮气保护下搅拌至溶解;加入NaOH,水浴加热持续搅拌,制得Fe3O4磁性纳米颗粒;称取Fe3O4磁性纳米颗粒于容器中,加入浓硝酸,超声处理,随后水洗,加入无水乙醇,水及氨水后超声处理,取出,搅拌下缓慢滴加TEOS,持续搅拌,随后先后用乙醇和水洗涤,真空干燥,得到纳米磁珠,将其于磷酸盐缓冲溶液中保存;步骤3:取纳米磁珠于容器中,加入水,超声分散均匀,再加入氯仿,无水乙醇,然后加入丙烯酰胺,乙腈和甲基丙烯酸,室温下快速搅拌,充分混匀后,加入引发剂偶氮二异丁腈,快速搅拌反应,利用外磁场进行固液分离,用无水乙醇和水反复洗涤,直至洗去多余的有机物,得到功能化纳米磁珠微粒,置于350-450uLPBS中,得到功能化纳米磁珠分散液;步骤4:取功能化纳米磁珠分散液于离心管中,利用磷酸盐缓冲溶液洗涤,重新分散于磷酸盐缓冲溶液中;向所得分散液中加入EDCNHS混合溶液,室温震荡活化反应,用磷酸盐缓冲溶液洗涤,分散于磷酸盐缓冲液中,加入丝素蛋白抗体震荡处理后加入Tris-BSA,震荡后洗涤,得到特异性磁珠,分散于磷酸盐缓冲液中;步骤5:取步骤1所得纳米CuO于PBS中超声处理,加入丝素蛋白抗体,震荡处理,将所得产物冷冻离心后移去上层清液,分散于PBS中,再冷冻离心后移去下层底物,加入BSA溶液,混匀反应,得到特异性纳米CuO;步骤6:将所得特异性磁珠和特异性纳米CuO加入到待检测的丝素蛋白溶液中,震荡孵育,离心后移去上清液,置于双氧水中,将所得氧气通入压力传感器。
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