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龙图腾网恭喜南京大学申请的专利基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115598111B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110771111.2，技术领域涉及：G01N21/76；该发明授权基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法是由鞠熀先;吴洁;敖航设计研发完成，并于2021-07-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法。该化学发光筛选方法的检测溶液包括一对抗原‑DNA偶联物、双链DNA探针、模板DNA、脱氧核糖核苷三磷酸、核酸连接酶及聚合酶。分配在96孔板中的杂交瘤单细胞培育1天后，取其上清液与检测溶液反应，如为特异性杂交瘤细胞，上清液中会有其分泌的特异性抗体，通过免疫识别，可同时结合检测液中的抗原‑DNA偶联物对，继而基于邻位效应，引发核酸组装及滚环扩增反应，产生大量焦磷酸根离子PPi。PPi能络合辣根过氧化物酶‑Cu2+复合物HRP‑Cu2+中的Cu2+恢复HRP的活性。通过HRP催化产生的化学发光信号对分泌的特异性抗体进行定量分析并完成对特异性杂交瘤细胞的筛选。

本发明授权基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法在权利要求书中公布了：1.一种基于邻位诱导免疫分析的特异性杂交瘤细胞化学发光筛选方法，其特征在于该筛选方法以含有抗原-DNA1偶联物、抗原-DNA2偶联物、双链DNA探针、模板DNA、脱氧核糖核苷三磷酸dNTPs、核酸连接酶SplintR和聚合酶phi29的溶液为检测溶液，以杂交瘤细胞培育1天后的上清液为样品溶液，当杂交瘤细胞为特异性杂交瘤细胞时，样品溶液中会有特异性抗体存在，其能被抗原-DNA1偶联物和抗原-DNA2偶联物同时免疫结合，基于邻位效应，DNA1与DNA2进行杂交组装并与双链DNA探针中的封闭链DNA杂交，进而释放出引物链DNA并引发滚环扩增反应，产生的大量焦磷酸根离子PPi能络合辣根过氧化物酶-Cu2+复合物HRP-Cu2+中的Cu2+，从而恢复HRP的活性，催化鲁米诺和过氧化氢反应产生化学发光信号，实现对特异性抗体的定量分析和对特异性杂交瘤细胞的筛选，并包含如下检测步骤：步骤1：把杂交瘤细胞通过有限稀释法单细胞分配在96孔板中，培育1天后，取上清液与检测溶液混合，37℃反应1个小时，步骤2：加入HRP-Cu2+溶液，反应5分钟后，再加入鲁米诺和过氧化氢的混合液，立即用化学发光成像仪测化学发光强度，步骤3：利用标准曲线法，求出上清液中特异性抗体的浓度，进而筛选出特异性杂交瘤细胞。

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