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龙图腾网恭喜江苏省农业科学院申请的专利一种基于受体-抗体夹心的Cry毒素检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115128281B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210751409.1，技术领域涉及：G01N33/68；该发明授权一种基于受体-抗体夹心的Cry毒素检测方法是由刘贤金;沈成;刘媛;胡晓丹;高美静;林曼曼;张霄;徐重新设计研发完成，并于2022-06-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于受体-抗体夹心的Cry毒素检测方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种基于受体‑抗体夹心的Cry毒素检测方法，包括：1将棉铃虫钙黏蛋白毒素结合区片段稀释后包被过夜2次日加入封闭液反应；3加入待测样品反应；4加入Cry2Aa、Cry1Ab兔多克隆抗体反应；5加入HRP标记的羊抗兔抗体反应；6加入显色液反应；7加入终止液，测定OD450值，带入标准线性方程即可获得Cry毒素的残留量；上述方法利用HaCad‑TBR作为捕获抗体，可同时检测Cry1Ab、Cry1Ac、Cry2Aa、Cry2Ab四种毒素，且灵敏度高，可用于农产品新鲜叶片和谷物中残留的Cry毒素蛋白残留量检测和类型分析研究。

本发明授权一种基于受体-抗体夹心的Cry毒素检测方法在权利要求书中公布了：1.一种基于受体-抗体夹心的Cry毒素检测方法，其特征在于，所述Cry毒素为Cry1Ab、Cry1Ac、Cry2Aa和Cry2Ab四种Bt毒素，其具体检测方法如下：1）使用包被液将棉铃虫钙黏蛋白毒素结合区片段稀释为0.3-10µgmL，4℃包被过夜；所述棉铃虫钙黏蛋白毒素结合区片段核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；2）次日，PBST洗板，每孔加入封闭液250µL，37℃反应1h；3）PBST洗板，每孔加入待测样品100µL，37℃反应1h；4）PBST洗板，向酶标板中分别加入Cry2Aa兔多克隆抗体和Cry1Ab兔多克隆抗体，加入量均为100µL孔，37℃反应1h；5）PBST洗板，加入稀释后的HRP标记的羊抗兔抗体，每孔100µL，37℃反应1h；所述稀释后的HRP标记的羊抗兔抗体是指，利用PBS稀释浓度为5mgmL的HRP标记的羊抗兔抗体，稀释比例为1：5000；6）PBST洗板，加入显色液，每孔100µL，37℃反应15min；7）加入终止液，每孔50µL，轻微震荡混匀，使用酶标仪测定OD450值，带入标准线性方程计算出Cry毒素的残留量；其中，Cry1Ab毒素线性方程为：Y=4.219*X-0.03659；Cry1Ac毒素线性方程为：Y=2.355*X+0.02928；Cry2Aa毒素线性方程为：Y=1.037*X+0.2214；Cry2Ab毒素线性方程为：Y=10*X+0.1930。

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