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摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体地说，涉及一种用于热启动反转录酶突变体及其应用。其包括以下步骤：分析反转录酶的三维结构，定位氨基酸位点并裁切得到素材；对素材进行诱变得到变异核苷酸序列，再对应整合入原反转录酶序列中，得到变异反转录酶素材；克隆后经高低温活性筛选，得到反转录酶突变素材；将反转录酶突变素材引入细胞扩大培养，经破碎、分离、层析纯化得到高纯度反转录酶突变体。本发明中通过定位关键氨基酸位点并裁切，再通过诱导突变的方式得到变异核苷酸序列，重新整合经高低温活性测试筛选出低温失活，但在较高温度下具有较高的活性的反转录酶突变体，从而便于与DNA聚合酶配合提高PCR扩增效率。
主权项：1.一种用于热启动反转录酶突变体，其特征在于，所述热启动反转录酶突变体通过以下步骤制得：S1、通过计算模拟分析反转录酶的三维结构，定位对温度敏感的氨基酸位点并裁切得到核苷酸序列素材；S2、对核苷酸序列素材进行诱变得到变异核苷酸序列，再将变异核苷酸序列对应整合入原反转录酶序列中，得到变异反转录酶素材；S3、对变异反转录酶素材进行克隆后经高低温活性筛选，得到符合低温失活，高温激活的反转录酶突变素材；S4、将反转录酶突变素材引入细胞扩大培养，经破碎、分离、层析纯化得到高纯度反转录酶突变体。
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百度查询： 康润景星(苏州)生物科技有限公司 一种用于热启动反转录酶突变体及其应用
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