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测序方法 

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摘要:本发明公开了一种测序方法,该方法包括提供表面连接有多个单链核酸的固相基底,单链核酸的5'末端与该表面连接,单链核酸为包含插入片段‑第一序列的多核苷酸,插入片段为来自待测样本的核酸序列,第一序列为包含标签‑第一位点的预设序列,标签为特异性对应待测样本的预设序列;提供第一测序引物,该第一测序引物能够与第一位点的5'末端杂交;以及使第一测序引物与单链核酸杂交并置于适于进行聚合测序的条件下,以通过延伸第一测序引物对单链核酸的一部分序列进行测定,获得测序结果。该多重测序方法能够有效地降低标签跳跃的水平,特别适于需准确检测混合样本中的微量物种或稀有变异的情形。

主权项:1.一种测序方法,其特征在于,包括:提供表面连接有多个单链核酸的固相基底,所述单链核酸的5'末端与所述表面连接,所述单链核酸为包含插入片段-第一序列的多核苷酸,所述插入片段为来自待测样本的核酸序列,所述第一序列为包含标签-第一位点的预设序列,所述标签为特异性对应所述待测样本的预设序列,所述插入片段位于所述第一序列的5'末端;提供第一测序引物,所述第一测序引物为游离状态,所述第一测序引物能够与所述第一位点的5'末端杂交;以及使所述第一测序引物与所述单链核酸杂交并置于适于进行聚合测序的条件下,以通过延伸所述第一测序引物对所述单链核酸的一部分序列进行测定,获得测序结果,所述测序结果包括读段,所述读段包含所述标签和至少一部分所述插入片段的序列信息。

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