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摘要:本发明涉及基于利用链置换扩增SDA进行核酸的等温扩增的分子生物学试验的设计及其各种实施方案和方法改进。本发明描述了一种用于SDA的新方法,称为核酸内切酶介导的移动平衡扩增EM‑SEq,该方法改进了反应的指数动力学和特异性,并且使得能够在固体表面上进行扩增。
主权项:1.一种用于双链核酸序列群体的链置换扩增的方法,该方法包括:a.修饰所述群体中的链的末端,使得至少一个所述末端包含序列的低熔点区域,所述低熔点区域在37℃至80℃的温度下至少瞬时呈单链;b.使用一种或以上与低熔点末端杂交的扩增引物复制具有低熔点末端的核酸分子群体,其中所述引物具有核酸分子模板群体的3′末端之外的5′单链段,使得所述模板的所述3′末端延伸形成核酸内切酶的完整识别位点,并且通过链置换使所述引物的所述3′末端延伸以复制所述模板;c.使用所述核酸内切酶的完整识别位点来使延伸的链产生切口,从而释放所述引物内的游离3′-OH基团;以及d.通过链置换使所述游离3′-OH基团延伸以再复制所述模板,其中在等温下进行步骤b、c和d,从而产生所述双链核酸序列群体的链置换扩增。
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百度查询: DNAE诊断有限公司 利用核酸内切酶介导的移动平衡(EM-SEq)进行核酸扩增的方法
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