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摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体及酶活性提高方法与应用。该磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体的突变位点如下：D210G、L406P、V886A。该酶活性提高方法包括以重组质粒pTrc99A‑pepc0为模板进行易错PCR扩增，连接载体后转入大肠杆菌DC1515，获得丁二酸高产菌株的突变体文库；接着将突变体文库中的菌株，依次进行液体培养发酵和单液滴包裹、拉曼激光液滴分选、微孔板发酵筛选、摇瓶复筛，得到高产丁二酸的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体。本发明为提升PEPC酶活性提供了一种创新且高效的路径，同时也为工业生产中的酶应用开辟了新的可能性。
主权项：1.辅助生产丁二酸的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒为携带pepc片段的pTrc99A载体；所述pepc片段的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。
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百度查询： 重庆大学 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶突变体及酶活性提高方法与应用
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