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摘要：本发明公开了一种用于分析circRNA‑microRNA相互作用的二合一集成测定法，包括如下步骤：1制备功能化MB：捕获探针通过生物素和链霉亲和素之间的特异性结合固定在SA‑MB的表面上；2circRNA‑miRNA相互作用分析。本发明的测定方法灵敏度高，可用于分析circRNA‑miRNA相互作用cmRRI的方法，有望在生物医学和临床发明中为分析RNA对话系统中的cmRRIs提供一个有用的工具。
主权项：1.一种用于分析circRNA-microRNA相互作用的二合一集成测定法，其特征在于包括如下步骤：（1）制备功能化磁珠（MB）：捕获探针通过生物素和链霉亲和素之间的特异性结合固定在SA-MB的表面上；step1将100μL的10mgmL链霉亲和素修饰的磁珠（SA-MB）用1mL的洗涤缓冲液洗涤两次，然后重悬于500μL的生物素-链霉亲和素结合缓冲液中；（2）circRNA-miRNA相互作用分析：功能化MB将circRNAmiRNA复合物分离出来后，以miRNA为引物进行的滚环扩增（RCA）产物将自淬灭探针打开产生荧光信号；step1在100μL杂交缓冲液中分别混合不同浓度的circRNA，所述的circRNA的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示，1μM的miRNA，所述的miRNA的核苷酸序列如SEQIDNO：5所示，和2μL的10mgmL制备的带有捕获探针的磁珠，所述的捕获探针的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，并在37℃下孵育30分钟。
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百度查询： 南京大学 一种用于分析circRNA-microRNA相互作用的二合一集成测定法
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