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申请/专利权人:南京普济生物有限公司
摘要:本发明涉及分枝杆菌技术领域,具体涉及一种分枝杆菌核酸的提取方法。本发明提供了一种针对痰液样本或肺泡灌洗液样本中分枝杆菌核酸的提取方法,主要包括以下步骤:1液化稀释待提取样本;2加入样本释放剂,利用研磨珠研磨;3加入蛋白酶、裂解液对研磨后样本进行裂解;4向裂解后样本中加入磁珠悬浮液和结合液;5利用第一洗涤液和第二洗涤液清洗磁珠;6利用洗脱液洗脱得到分枝杆菌核酸。该提取方法简单、高效,避免了有毒试剂的使用,提高了提取效率,缩短了提取时间,同时能够支持自动化适配,提取产物可用于PCR、qPCR、dPCR和宏基因组测序等分子检测。
主权项:1.一种分枝杆菌核酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:1液化稀释:向待提取样本中加入PBS缓冲液混匀,得到液化、稀释后的待提取样本;2研磨、孵育:将步骤1液化、稀释后的待提取样本与样本释放剂混匀后研磨,取上清,加入蛋白酶,混匀进行第一次孵育得到混合液;3裂解、结合:向步骤2得到的第一次孵育后的混合液中加入裂解液、磁珠悬浮液和结合液,混匀离心后去上清,得到表面吸附有分枝杆菌核酸的磁珠;4清洗:向步骤3的磁珠中加入第一洗涤液,混匀离心后去上清;再加入第二洗涤液,混匀离心后去上清,得到去除杂质且表面吸附有分枝杆菌核酸的磁珠;5洗脱:利用洗脱液重悬步骤4的磁珠,孵育后离心得到分枝杆菌核酸。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南京普济生物有限公司 一种分枝杆菌核酸的提取方法
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