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一种修饰有链霉亲和素—生物素的纳米金笼及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:吉林省格瑞斯特生物技术有限公司

摘要:本发明提供了一种修饰有链霉亲和素‑生物素的纳米金笼及其制备方法和应用,属于免疫检测技术领域。一种修饰有链霉亲和素‑生物素的纳米金笼的制备方法,将硝酸银利用柠檬酸还原法制备胶体银溶液,再通过电偶置换反应,在胶体银溶液中加入氯金酸,将氯金酸还原为纳米金笼,再利用静电吸附将链霉亲和素修饰在纳米金笼上,再添加生物素,生物素结合于链霉亲和素上得到产物。本发明提供了所述修饰有链霉亲和素‑生物素的纳米金笼作为显色标记物在制备疾病诊断的试剂盒中的应用。

主权项:1.一种纳米金笼标记的抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:在沸腾状态下,将硝酸银溶液和柠檬酸钠溶液混合,煮沸混合液至浅黄色不变,得到银纳米粒子悬浊液;所述硝酸银溶液和柠檬酸钠溶液混合后,还包括添加聚乙烯吡咯烷酮;所述聚乙烯吡咯烷酮的浓度为1~5mgmL;所述硝酸银溶液的浓度为50~100mgL;所述柠檬酸钠溶液的质量浓度为0.01%~0.05%;在沸腾状态下,将所述银纳米粒子悬浊液和氯金酸混合,煮沸至颜色不变,得到纳米金笼悬浊液;所述硝酸银和氯金酸的质量比为1:1.8~2.5;将所述纳米金笼悬浊液调节pH值至中性,添加链霉亲和素,第一静置,得到链霉亲和素修饰的纳米金笼悬浊液;向所述链霉亲和素修饰的纳米金笼悬浊液添加生物素,第二静置,得到修饰有链霉亲和素-生物素的纳米金笼;所述硝酸银和链霉亲和素的质量比为5~10:1;所述第一静置的温度为20~27℃;所述第一静置的时间为1.5~2.5h;所述链霉亲和素和生物素的质量比为1:1;所述第二静置的温度为20~27℃;所述第二静置的时间为0.5~1.5h修饰有链霉亲和素-生物素的纳米金笼中生物素进行活化,与抗体混合,使活化的生物素和抗体的氨基发生化学反应形成酰胺键,得到纳米金笼标记的抗体;所述活化时硝酸银和NHS的质量比为10~20:3。

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