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申请/专利权人:上海交通大学;交弘生物科技(上海)有限公司
摘要:本发明提供了嗜热核酸酶ArgonautePfAgo蛋白的突变体及其制备方法和应用。本发明所述Ago突变体的酶催化活性较野生型显著提高,具有更好的高温热稳定性,并且突变体在靶标DNA底物选择性上对于野生和突变碱基具有更好的区分能力,这提高了其在核酸检测技术领域中的应用潜力,同时也为开发新的基因操作工具奠定了基础。
主权项:1.一种嗜热核酸酶ArgonauteAgo突变蛋白,其特征在于,所述Ago突变蛋白的突变位点为选自下组的双重核心氨基酸突变:I656Y和Y743L;I656S和I569C;I656Y和F769R;Y743M和F747P;I659Y和L626N;Y743L和I569S;F747W和F769Y;A573K和F769R;A573H和F747I;I569Y和Y743F;I569Y和F747W;Y743F和L626V;I569Y和L626V;Y743F和F747W;或L626V和F747W;其中,所述突变位点的编号基于SEQIDNO:1所示的序列;并且所述的Ago突变蛋白的酶活力Q1,与野生型的酶活力Q0的比值Q1Q0为≥1.2,所述的酶活力为定向剪切单链DNA靶标的活性。
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权利要求:
百度查询: 上海交通大学 交弘生物科技(上海)有限公司 一种嗜热核酸内切酶突变体及其制备方法和应用
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