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一种基于CRISPR反式切割系统构建石墨烯生物传感器检测非洲猪瘟病毒的方法 

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申请/专利权人:武汉尚睿生物科技有限公司;武汉尚码生物科技有限公司

摘要:本发明提供种基于CRISPR反式切割系统构建石墨烯生物传感器检测非洲猪瘟病毒的方法,包括以下步骤:石墨烯电化学生物传感器制备步骤;报告分子修饰步骤;核酸检测步骤;所述核酸检测步骤包括:将Cas12a与sgRNA形成Cas12a‑sgRNA复合物,将待测样本与Cas12a‑sgRNA复合物混合后滴加到石墨烯电化学生物传感器电极表面上进行反应,通过检测反应前后石墨烯电极电流峰值的变化率,判断待测样本是否含有非洲猪瘟病毒。本发明的整个检测时间在30分钟内完成,解决了检测成本高、检测时间长的问题,更适合病毒核酸的即时检测POCT,具有显著的社会经济价值,可以更好地应用于非洲猪瘟病毒的现场即时检测。

主权项:1.一种基于CRISPR反式切割系统构建石墨烯生物传感器检测非洲猪瘟病毒的方法,其特征在于,包括以下步骤:石墨烯电化学生物传感器制备步骤;报告分子修饰步骤;核酸检测步骤;所述核酸检测步骤包括:将Cas12a与sgRNA形成Cas12a-sgRNA复合物,将待测样本与Cas12a-sgRNA复合物混合后滴加到石墨烯电化学生物传感器电极表面上进行反应,通过检测反应前后石墨烯电极电流峰值的变化率,判断待测样本是否含有非洲猪瘟病毒;所述sgRNA的靶点为非猪瘟病毒p72基因,靶点序列如下:5’-TAATACGACTCACTATAGG-3’;所述sgRNA序列如下:5’-AUUUCUACUGUUGUAGAUAGAGCAGACAUUAGUUUUUCA-3’。

全文数据:

权利要求:

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