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申请/专利权人:陕西科技大学
摘要:本发明公开了一种基于金属钌配合物的RPARAA目视比色、荧光定量检测方法及分析系统。本发明以金属钌配合物作为进行RPARAA反应监测的荧光染料,建立等温扩增的实时荧光检测方法,可在闭管操作下通过生成熔解曲线进行特异性验证、实现目视比色以及进行多重RPARAA检测,具有检测结果灵敏度高以及检测用时短、成本低的优点。本发明还可通过智能手机对RPARAA扩增过程中反应管内的颜色变化进行图像捕获与分析后结合扩增反应时间绘制扩增曲线,实现更低成本的荧光定量检测,具有广泛的市场应用潜力。
主权项:1.一种基于金属钌配合物的RPARAA核酸检测方法,其特征在于:该核酸检测方法包括以下步骤:以金属钌配合物为荧光染料、并以待测核酸样品作为模板进行RPA或RAA反应,在RPA或RAA反应的相应扩增过程中捕获可见光激发下的颜色变化图像,从而在扩增结束后通过对捕获的颜色变化图像中不同反应时间的图像样本进行颜色R-G-B分析,获得各图像样本的分析信号随反应时间变化的反应图像并作为扩增曲线,然后根据该扩增曲线判断扩增产物的存在情况;或者,以金属钌配合物为荧光染料、并以不同浓度标准核酸样品作为模板分别进行RPA或RAA反应,在其中每个RPA或RAA反应的相应扩增过程中捕获可见光激发下的颜色变化图像,从而在扩增结束后通过对捕获的颜色变化图像中不同反应时间的图像样本进行颜色R-G-B分析,获得各图像样本的分析信号随反应时间变化的反应图像并作为扩增曲线以计算相应扩增过程的循环阈值;然后根据以不同浓度标准核酸样品作为模板进行RPA或RAA反应所得循环阈值与相应模板浓度建立的标准曲线,实现对待测核酸样品的定量检测。
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权利要求:
百度查询: 陕西科技大学 一种基于金属钌配合物的RPA/RAA目视比色、荧光定量检测方法及分析系统
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