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申请/专利权人:邢台学院
摘要:本发明涉及甘薯种苗脱毒技术领域,公开了一种甘薯种苗脱毒快速繁育方法,其中甘薯种苗脱毒快速繁育方法,包括S1,选取红瑶品种病毒苗,用毛笔蘸取洗洁精轻轻刷洗3min,再用清水冲洗40min,提前打开超净工作台的紫外光灯灭菌后,接着采用0.1%HgCl2溶液在专用烧杯中浸泡茎尖顶端4~5min,期间用玻璃棒不断搅拌,后用无菌水冲洗3次,装入提前灭菌好的无菌瓶中。该甘薯种苗脱毒快速繁育方法,通过该实验方法可实现甘薯种苗脱毒并快速繁育,避免脱毒种薯易受侵染,从而提高甘薯的总产量与品质,使得甘薯产业形成良性循环,有助于推动甘薯产业健康发展。
主权项:1.一种甘薯种苗脱毒快速繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:S1,选取红瑶品种病毒苗,用毛笔蘸取洗洁精轻轻刷洗3min,再用清水冲洗40min,提前打开超净工作台的紫外光灯灭菌后,接着采用0.1%HgCl2溶液在专用烧杯中浸泡茎尖顶端4~5min,期间用玻璃棒不断搅拌,后用无菌水冲洗3次,装入提前灭菌好的无菌瓶中;S2,将消毒后的茎尖放在提前灭菌好的超净工作台中的解剖镜上,并用酒精浸泡的解剖刀先层层剥离除去幼叶,剩余5~6层时,用解剖刀切下头部茎尖,用镊子固定住茎尖,解剖刀层层切除较大的叶原基后,用解剖针剥离出大小为0.2~0.3mm、带1~2个叶原基的茎尖组织;S3,在提前灭好菌的超净工作台上用40倍解剖镜剥取的0.2~0.3mm茎尖,放在MS培养基上进行培养,确认剥离的茎尖组织完整能存活后,设计不同激素在不同浓度配比下的诱导培养基进行培养基优化实验;S4,按三因素四水平正交表设计正交实验,在MS培养基的基础上添加IBA、6-BA、GA3三种激素构建培养基配方,根据正交实验表组合处理各激素浓度;S5,将剥离出的甘薯茎尖接种到已灭菌过的各个培养基中进行培养,塑料呼吸盖进行封口,用记号笔在瓶身标记上接种品种、时间和处理编号,每个处理3个重复,每个重复接种4瓶,每瓶4个茎尖,30天后观察统计各处理组的愈伤组织形成率、大小、出芽率,60天后观察统计茎尖成苗率;S6,茎尖诱导成苗后,建立快速繁殖体系,当培养瓶中的甘薯苗生长到5cm左右时,切成1.5cm左右不带叶片的茎段进行扦插,进行完全实验;S7,在MS培养基的基础上添加IBA、GA3激素构建培养基配方,每个处理3次重复,每个重复接种20瓶,每瓶接种2株甘薯苗,观察不同激素浓度下的甘薯苗生长状况,20d后对甘薯脱毒苗株高、茎粗进行测量并记录。
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