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申请/专利权人:西北大学
摘要:本发明公开一种富含α2,6‑唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖在制备免疫调节药物或功能食品中的应用,添加富含α2,6‑连接的唾液酸化羊乳游离寡糖能够提高RAW264.7细胞的细胞增殖能力、细胞吞噬能力、NO分泌量和酸性磷酸酶活力,显著上调RAW264.7细胞中TNF‑α、IL‑10、IL‑6和IL‑1α基因mRNA的表达量,同时通过上调MAPKs信号通路中的p38丝裂原活化蛋白激酶、细胞外信号调节激酶ERK和c‑Jun氨基末端激酶JNK的表达来发挥免疫调节作用。本发明中富含α2,6‑连接的唾液酸化羊乳游离寡糖对功能性配方食品的开发利用具有重要意义。
主权项:1.富含α2,6-唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖在制备免疫调节功能食品中的应用,其特征在于:富含α2,6-唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖中α2,6-唾液酸修饰的酸性游离寡糖占比等于60-70%;所述免疫调节功能食品中,所述富含α2,6-唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖的浓度为25-200μgmL;所述富含α2,6-唾液酸修饰的酸性游离寡糖通过上调MAPKs信号通路中的p38丝裂原活化蛋白激酶、细胞外信号调节激酶ERK和c-Jun氨基末端激酶JNK的表达来发挥免疫调节作用;所述富含α2,6-唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖通过下述过程分离制备:步骤1、除脂;取羊乳样品,离心除去上层脂肪,加入无水乙醇沉淀蛋白,离心除去沉淀,取上清浓缩干燥;步骤2、分离纯化;步骤2.1、将步骤1得到的样品,加入双蒸水溶解,上样于DEAE52阴离子交换树脂,用双蒸水洗脱中性游离寡糖分,用NaCl溶液洗脱酸性游离寡糖分,分别收集水洗组分和盐洗组分,后分别浓缩干燥;步骤2.2、将步骤2.1得到的水洗组分,加水溶解,然后上样于活性炭柱,0%-8%的乙醇洗脱乳糖,然后使用60%-100%乙醇洗脱中性游离寡糖,收集60%-100%乙醇组分,浓缩干燥,获得不含乳糖的中性游离寡糖;将步骤2.1得到的盐洗组分,水溶后透析,除去多余的盐,浓缩干燥,获得富含α2,6-唾液酸修饰的酸性游离寡糖分;步骤2.1中用0.25MNaCl溶液洗脱酸性游离寡糖分;步骤2.2中利用100Da透析袋对水溶后的盐洗组分进行透析;所述富含α2,6-唾液酸修饰的羊乳酸性游离寡糖中的唾液酸为Neu5AC和Neu5GC。
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