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申请/专利权人：杭州和壹基因科技有限公司
摘要：本发明适用于生物技术领域，提供一种粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，包括如下步骤：采集感染有幽门螺杆菌患者的新鲜粪便样本置于离心管中；向离心管中加入细胞裂解液，进行均质化，所述细胞裂解液包括：Tris‑HCl、乙二胺四乙酸、异硫氰酸胍、曲拉通X‑100、异丙醇、十二烷基硫酸钠、氯化钠、蛋白酶K、改性聚乙二醇、改性甜菜碱，通过在细胞裂解液中加入改性聚乙二醇，增强对游离DNA的捕捉，促使DNA进一步浓缩富集，提高后续DNA与磁珠的结合效率，通过加入改性甜菜碱，提高去除蛋白、酯类等杂质等作用，减少后续磁珠吸附的杂质，改性聚乙二醇和改性甜菜碱具有协同增效作用，能够提高提取DNA纯度。
主权项：1.一种粪便中提取幽门螺杆菌DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）采集感染有幽门螺杆菌患者的新鲜粪便样本置于离心管中；2）向离心管中加入细胞裂解液，进行均质化，所述细胞裂解液包括：10-200mM的Tris-HCl、10-50mM的乙二胺四乙酸、3-7molL的异硫氰酸胍、2-8％体积分数的曲拉通X-100、30-40％体积分数的异丙醇、15-25gL的十二烷基硫酸钠、1-5gL的氯化钠、0.5-1.5gL的蛋白酶K、40-60gL的改性聚乙二醇、30-50gL的改性甜菜碱；3）向离心管中加入磁珠，将离心管在55-65℃条件下震荡8-12min，将离心管置于磁力分离架上1-3min，待离心管内的磁珠完全被吸附，弃去离心管中溶液；4）将离心管从磁力分离架中取出，加入洗涤液，涡旋震荡5-15min，使磁珠充分混匀，然后将离心管置于磁力分离架上1-3min，待管内磁珠完全被吸附，弃去离心管中溶液；5）向离心管中加入洗脱液，提前50-60℃预热，涡旋震荡6-10min；6）将离心管转移至磁力架上吸附1-3min，把上清液转移至新的离心管中，-40～-20℃保存。
全文数据：
权利要求：
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