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申请/专利权人:济南大学
摘要:本发明涉及一种基于AgZnO对环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球的增强作用的电化学发光传感器的制备方法,属于新型传感器构建技术领域。基于抗原与抗体之间的特异性识别,该传感器利用ZIF‑8衍生的Ag掺杂ZnO复合材料(AgZnO)作为基底增强材料,环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球为发光材料,通过层层修饰构建了电化学发光传感器。本发明构建的电化学发光传感器具有良好的重现性,较高的灵敏度和较低的检出限,对癌胚抗原的检测具有重要的意义。
主权项:1.一种基于AgZnO对FeCdS@FeIn2S4的增强作用的电化学发光传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4mm的玻碳电极,超纯水清洗干净,将6µL、0.5~2.5mgmL-1的ZIF-8衍生的Ag掺杂ZnO复合材料(AgZnO)并结合癌胚抗原识别抗体的一抗标记物AgZnO-Ab1溶液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;(2)滴加3µL、质量分数为0.1%的BSA溶液到电极表面,用超纯水洗净,室温下晾干;(3)滴加6µL、0.00005~50ngmL-1的一系列不同浓度的癌胚抗原到电极表面,孵化2h,超纯水冲洗,室温下晾干;(4)滴加6µL的环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球并结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物GPTESFeCdS@FeIn2S4-Ab2溶液,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种电化学发光传感器;所述的环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球并结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物GPTESFeCdS@FeIn2S4-Ab2溶液的制备步骤如下:(1)FeCdS@FeIn2S4的制备将0.167g的FeSO4·7H2O、0.221g的InCl3、0.133g的CdCH3COO2和0.301g的硫代乙酰胺(TAA)溶于90mL水中,磁力搅拌15min,之后将混合溶液加入250mL圆底烧瓶中,然后将圆底烧瓶放入90℃的油浴中,连续搅拌反应2h。产生的黄色沉淀物通过离心收集,分别用水和乙醇洗涤3次。将离心得到的黄色沉淀物在60℃真空干燥过夜,即FeCdS@FeIn2S4纳米球;(2)环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球的制备将0.5g的FeCdS@FeIn2S4加入到浓氨水、去离子水和无水乙醇0.71030ml的溶液中,超声处理1h,然后将悬浮液转移到圆底烧瓶中,加入20μL3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷GPTMS和10ml无水乙醇,在60℃下搅拌回流2h。沉淀物用乙醇洗涤,60℃下真空干燥过夜,即GPTESFeCdS@FeIn2S4;(3)环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球并结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物GPTESFeCdS@FeIn2S4-Ab2溶液的制备将100μL10μgmL-1癌胚抗原识别抗体Ab2加入1mL2mgmL-1GPTESFeCdS@FeIn2S4水溶液中,并在4℃下孵化12h,随后加入100μL0.1%BSA以阻断非特异性位点并离心以除去未结合的抗体,将得到的固体分散在1mLpH7.4的PBS中,即得环氧功能化FeCdS@FeIn2S4纳米球并结合癌胚抗原识别抗体的二抗标记物GPTESFeCdS@FeIn2S4-Ab2溶液。
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