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申请/专利权人：上海公安学院
摘要：本发明公开抗体与磁珠偶联物及其偶联方法。本发明的方法包括：在第一缓冲液中使羧基磁珠先后与1‑3‑二甲氨基丙基‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺反应，分离磁珠后在第二缓冲液中进一步与含巯基的酰肼反应得到羧基活化的修饰磁珠；在第二缓冲液中使糖类抗体经温和氧化处理得到修饰抗体；然后使修饰磁珠和修饰抗体反应形成共价键。本发明解决现有通过还原剂还原抗体内的二硫键引入巯基而导致抗体活性受到影响的问题，提高了偶联效率。同时，本发明的方法具有更低的背景发光值，且检测抗体，特别是低浓度抗体时发光值更高，灵敏度显著提高，具有明显优势。
主权项：1.一种用于抗体和磁珠偶联的方法，其特征在于，包括以下步骤：1在第一缓冲液中使羧基磁珠先后与0.1-1mg1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和0.1-1mgN-羟基琥珀酰亚胺反应，分离磁珠后在第二缓冲液中进一步与含巯基的酰肼反应得到羧基活化的修饰磁珠，所述含巯基的酰肼包括使用0.36-0.96mg的3-巯基丙酰肼和或巯基-PEG-酰肼，所述羧基磁珠与所述含巯基的酰肼的重量比为10:0.3-1，所述第一缓冲液为2-N-吗啉代乙磺酸缓冲液，所述第二缓冲液为磷酸盐缓冲液；2在第二缓冲液中使糖类抗体经温和氧化处理得到修饰抗体，所述温和氧化处理包括使用NaIO4在磷酸盐缓冲液中进行氧化反应，所述NaIO4的浓度为25-50mM；和3在适于反应的条件下使修饰磁珠和修饰抗体反应形成不可逆的共价键，由此实现抗体的定向偶联。
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百度查询： 上海公安学院 抗体与磁珠偶联物及其偶联方法
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