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一种运用流式细胞仪快速测定微囊藻伪空胞体积的方法 

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申请/专利权人:河海大学

摘要:本发明公开了一种运用流式细胞仪快速测定微囊藻伪空胞体积的方法,属于微囊藻上浮能力定量化表征的技术领域,包括藻样收集,微囊藻群体分散为单细胞,分散为单细胞的微囊藻被均分为两份,一份经高压完全破裂伪空胞,之后与另一份未被高压处理的藻细胞以不同比例混合,获得混合藻样,采用Walsby毛细压力管法测定混合藻样伪空胞体积,并进行校正,采用流式细胞仪测定混合藻样中藻细胞的侧向散射光强简称“散射角”,建立校正后的伪空胞体积与细胞散射角之间的数量关系,得到标准曲线,运用该标准曲线能够实现微囊藻细胞伪空胞体积的快速测定,本发明具有快速、精确、适用范围广、操作简单的优点。

主权项:1.一种运用流式细胞仪快速测定微囊藻伪空胞体积的方法,其特征在于:包括以下步骤,步骤一:收集微囊藻,将微囊藻群体分散为单细胞微囊藻样后用甲醛溶液固定;步骤二:将单细胞微囊藻样平均分为两份,一份进行高压完全破裂伪空胞,另一份保留伪空胞;高压破裂伪空胞的压力强度为0.5-2.5Mpa;步骤三:将两份藻样按照不同比例混合,制作不同比例的混合藻样;步骤四:采用Walsby毛细压力管法测定混合藻样的伪空胞体积,并进行校正;采用流式细胞仪测定混合藻样的侧向角散射光强;步骤五:混合藻样测定完成后,建立伪空胞体积与细胞侧向角散射光强的标准曲线;标准曲线的线性回归方程为:Y=0.0423*X-2.0274,其中X为藻细胞散射角,Y为藻细胞校正后的伪空胞体积;步骤六:通过流式细胞仪测定待测微囊藻的侧向角散射光强,根据步骤五所得标准曲线计算待测微囊藻的伪空胞体积。

全文数据:

权利要求:

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