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一种化学-酶法制备含氟非天然氨基酸的方法 

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申请/专利权人:天津大学

摘要:本发明公开了一种化学‑酶法级联制备含氟非天然氨基酸的方法,属于生物技术领域。本发明以廉价易得的含氟醛类化合物为底物,利用醛缩酶催化其与丙酮酸缩合得到β,γ‑不饱和‑α‑酮酸化合物,随后利用过氧化氢氧化脱去一分子二氧化碳得到含氟丙烯酸衍生物,进一步利用苯丙氨酸氨解酶催化胺化反应得到含氟L‑α‑氨基酸产物。更进一步地,本发明构建的三步级联方法可立体选择性合成多种L‑型含氟非天然氨基酸,该体系可扩大到半制备规模,扩展了位点选择性氟修饰的非天然氨基酸的不对称合成方法。

主权项:1.一种合成含氟非天然氨基酸的方法,其特征在于:方法步骤包括:将醛缩酶PpNahE的纯酶或全细胞与丙酮酸钠在50mMNaH2PO4-NaOH溶液,pH7.5条件下孵育2~3min,随后加入醛类底物开始醛缩反应,得到醛缩反应液;向醛缩反应液中加入过氧化氢溶液,室温下孵育3h至无CO2生成;将得到的两步反应溶液加入高铵浓度的NH42SO4溶液pH8.5,混合均匀后加入氨解酶AvPAL的纯酶或全细胞进行还原胺化反应,半制备纯化得到含氟氨基酸产物。

全文数据:

权利要求:

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