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申请/专利权人：桂林电子科技大学

摘要：本发明公开基于GOXRGO‑CS‑FcAuNPsSiO2‑Si单元检测葡萄糖的方法。在经过预处理的光寻址电位传感器芯片表面，使用MPTES进行疏基硅烷化，并将RGO‑CS‑FcAuNPs纳米杂合材料以‑S‑Au键和物理吸附作用结合在硅烷化LAPS表面，结合GOX酶的氧化催化作用，构建了GOXRGO‑CS‑FcAuNPsSiO2‑Si敏感复合单元。本专利构建的敏感复合单元，既能够催化氧化葡萄糖分解，又能够产生电位反应，能够与数据采集卡和LabVIEW上位机控制程序结合，能够便携、快速、高灵敏的进行葡萄糖检测。

主权项：1.一种基于葡萄糖氧化酶还原氧化石墨烯-壳聚糖-二茂铁金纳米粒子二氧化硅-硅GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元检测葡萄糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：RGO-CS-FcAuNPs复合纳米材料的制备AuNPs的制备：使用超纯水对氯金酸进行稀释，配置成50mL质量分数为0.01%的氯金酸溶液；将氯金酸溶液加热直至沸腾，加入2.5mL质量分数为1.0%的柠檬酸钠溶液，持续搅拌直至溶液变为酒红色，得到AuNPs；将AuNPs冷却至室温后，放置在4℃的避光环境下保存备用；RGO的制备：称取30mg氧化石墨烯GO，溶于30mL超纯水，使用细胞破碎仪超声破碎120min，得到GO悬浮液；往GO悬浮液中加入300mg抗坏血酸AA，在60℃水浴下搅拌4h，得到RGO悬浮液；将RGO悬浮液在4000rmin的转速下离心15min，取沉淀备用；CS-Fc的制备：称取100mgCS溶于100mL1.0%的乙酸溶液，在CS溶液中加入150mg二茂铁甲酸，并以EDCNHS溶液作为活化剂，50℃持续搅拌24h，得CS-Fc溶液；将CS-Fc溶液在6000rmin的转速下离心15min，去除沉淀得到CS-Fc溶液；RGO-CS-Fc的制备：取15mgRGO重新溶于15mL超纯水，制成RGO悬浮液；然后与10mLCS-Fc溶液混合，以EDCNHS溶液为催化活化剂，50℃下持续搅拌4h；以20000rmin的转速高速离心，取下层重新溶于15mL超纯水，可得RGO-CS-Fc悬浮液；RGO-CS-FcAuNPs纳米杂合材料的制备：分别取1mL的RGO-CS-Fc悬浮液和10mLAuNPs溶液进行混合，持续搅拌12h，并在20000rmin的转速下高速离心，取沉淀重新溶于10mL超纯水，可得RGO-CS-FcAuNPs纳米杂合材料悬浮液；步骤二：GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元的构建依次将LAPS芯片置于乙醇、丙酮、超纯水中超声清洗15min，并用洗耳球干燥；在裸LAPS芯片上滴加20μL1.0molL的NaOH溶液，在室温下静置30min，然后使用超纯水冲洗，并用洗耳球干燥；在经过预处理的LAPS芯片上滴加20μL质量分数为1.0%的MPTES溶液，并放置在4℃的环境中反应12h，得到巯基硅烷化的LAPS芯片；在巯基硅烷化的LAPS芯片上滴加20μLRGO-CS-FcAuNPs混合溶液，25℃静置6h，得到RGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si结构；在RGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si结构上滴加20μL0.5mgmLGOX溶液，25℃孵育1h，构成GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元；将GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元、数据采集卡、LabVIEW上位机控制程序、激光二极管等组件进行组合，构建敏感复合单元检测系统；步骤三：葡萄糖检测标准曲线的绘制在GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元界面滴加20μL葡萄糖溶液，25℃孵育30min，得到待测工作电极；在工作电极上放置装有pH为7.4的PBS溶液的电解池，通过数据采集卡和LabVIEW上位机程序对工作电极的偏置电压和光电流数据进行采集，得到标准曲线Y=18.81345X+80.08747；步骤四：实际血清样本中葡萄糖的检测选取4份血清样本进行实际检测，在GOXRGO-CS-FcAuNPsSiO2-Si敏感复合单元表面，滴加20μL血清样本，并在25℃下孵育30min，得到工作电极；通过数据采集卡和LabVIEW上位机程序对工作电极的偏置电压和光电流数据进行采集；并根据步骤三中的标准曲线计算，可得到对应的实际血清样本中的葡萄糖浓度。

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百度查询： 桂林电子科技大学 基于GOX/RGO-CS-Fc/AuNPs/SiO₂-Si单元检测葡萄糖的方法