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申请/专利权人：中国海洋大学
摘要：本发明公开了一种基于串联体异源表达制备XO抑制肽的方法，包括以下步骤：（1）将XO抑制肽的编码基因串联形成n倍串联体，通过肠激酶位点与PET‑30a（+）载体连接，得重组表达载体；所述XO抑制肽为AEAQMWR或AEAWMWR；（2）将重组表达载体导入大肠杆菌，得重组大肠杆菌；（3）培养重组大肠杆菌并诱导表达目的基因，得发酵液；（4）发酵液离心得菌体沉淀，菌体沉淀重悬后超声破碎，离心得粗蛋白液；粗蛋白液经镍柱亲和层析纯化，得重组蛋白；对重组蛋白进行肠激酶酶切和胰蛋白酶酶切，即得XO抑制肽。本发明实现了XO抑制肽的定向制备，提高了XO抑制肽的制备效率。
主权项：1.一种基于串联体异源表达制备XO抑制肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）重组表达载体的构建：将XO抑制肽的编码基因串联形成n倍串联体，得目的基因片段；然后将目的基因片段通过肠激酶位点与PET-30a（+）载体连接，得重组表达载体；（2）重组菌株的构建：将上述构建的重组表达载体导入大肠杆菌，得表达目的基因的重组大肠杆菌；（3）目的基因的表达：培养重组大肠杆菌并诱导表达目的基因，得发酵液；（4）XO抑制肽的提取纯化：发酵液离心得菌体沉淀，菌体沉淀重悬后超声破碎，离心得粗蛋白液；粗蛋白液经镍柱亲和层析纯化，得重组蛋白；对重组蛋白进行肠激酶酶切和胰蛋白酶酶切，即得XO抑制肽。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国海洋大学 一种基于串联体异源表达制备XO抑制肽的方法
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