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一种基于DNA条形码的野外啮齿类动物血吸虫感染检测方法 

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申请/专利权人:江西省科学院生物资源研究所

摘要:本发明公开了一种基于DNA条形码的野外啮齿类动物血吸虫感染检测方法,属于生物检测技术领域,包括以下步骤:样本采集与保存,血吸虫DNA提取与PCR扩增:提取样本中的血吸虫DNA,利用特异性引物进行PCR扩增,获取目标DNA片段;DNA条形码测序与比对鉴定:将扩增得到的DNA片段进行测序,获得血吸虫的DNA条形码,结合现有数据库与文献报道,构建全面的血吸虫DNA条形码数据库,并通过生物信息学手段对测序结果进行比对和鉴定;多重PCR验证与质量控制:采用多重PCR、实时荧光定量PCR辅助手段进行验证;对于疑似污染的样本,进行重复检测和质量控制;感染情况统计与分析。该发明解决了由于DNA条形码数据库的不完整,以及野外采样过程中样本污染、保存条件不佳等问题。

主权项:1.一种基于DNA条形码的野外啮齿类动物血吸虫感染检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1,样本采集与保存:通过笼捕法采集野外啮齿类动物样本,从野外啮齿类动物样本体内分离出血吸虫样本,并对采集血吸虫样本的器具的无菌处理、血吸虫样本的即时封装和低温保存,以减少样本污染和DNA降解的可能性;步骤S2,血吸虫DNA提取与PCR扩增:提取样本中的血吸虫DNA,利用特异性引物进行PCR扩增,获取目标DNA片段;步骤S3,DNA条形码测序与比对鉴定:将扩增得到的DNA片段进行测序,获得血吸虫的DNA条形码,结合现有数据库与文献报道,构建全面的血吸虫DNA条形码数据库,并通过生物信息学手段对测序结果进行比对和鉴定;步骤S4,多重PCR验证与质量控制:采用多重PCR、实时荧光定量PCR辅助手段进行验证;对于疑似污染的样本,进行重复检测和质量控制,以确保结果的可靠性;步骤S5,感染情况统计与分析:根据检测结果,对野外啮齿类动物的血吸虫感染情况进行统计和分析,得到检测结果。

全文数据:

权利要求:

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