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一种珊瑚共附生古菌多样性的研究方法及检测试剂盒 

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申请/专利权人:中国科学院南海海洋研究所

摘要:本发明公开了一种珊瑚共附生古菌多样性的研究方法及检测试剂盒。本发明提供一种NestedPCR或Semi‑nestedPCR研究古菌多样性的方法及检测试剂盒,包括2套引物组、2轮PCR反应体系和扩增流程。本发明用于古菌16SrDNA的V3、V4、V5可变区文库构建、测序及古菌多样性分析;既可同时检测到各门类古菌、又可有效屏蔽包括珊瑚、虫黄藻和各类真核生物、病毒和大部分细菌等影响,获得古菌含量及分类单元等显著增加;可用于底泥、水体等环境样本和各类生物样本,尤其适用于珊瑚、海绵、海葵、钙藻等生物共附生古菌研究。本发明能全面、准确、快速地研究古菌多样性,特异性强、灵敏度高、重复性好,且操作简单、样品保真性高、适用性广。

主权项:1.一种快速检测古菌多样性的引物组,其特征在于,所述引物组包括SeqF1、SeqF2,SeqR1、SeqR2,具体如下所示:SeqF1:5’-GCMCTAYGGKGYGCASCAGK-3’;SeqF2:5’-XXXXXXGYMGCCRCGGKAAHAS-3’;SeqR1:5’-TTCGGRSCRTRCNGACCTRCCG-3’;SeqR2:5’-XXXXXXNYRTACTYCCCARGYRG-3’;“XXXXXX”为Index序列,用于识别各样本16SrDNA序列;其中,简并引物代码分别是N是A,T,C,G;M是A,C;Y是C,T;K是G,T;S是G,C;R是A,G;W是A,T;H是A,T,C;B是G,T,C。

全文数据:

权利要求:

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