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一种基于超声脑刺激的癫痫动物模型的构建方法 

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申请/专利权人:四川大学华西医院

摘要:本发明涉及癫痫领域,具体涉及一种基于超声脑刺激的癫痫动物模型的构建方法。本发明提供的构建方法通过以合适的强度例如第二参数和具体刺激方式,对期望刺激的深部脑区进行经颅超声刺激,能够精确地深入实验动物的深部脑区,有效诱发深部脑区起始的局灶性癫痫的同时,几乎不会诱发实验动物的死亡,造模成功率高。

主权项:1.一种无创构建癫痫动物模型的方法,其特征在于,包括以下步骤:S101选择用于所述癫痫动物模型的构建的实验动物,所述实验动物包括大鼠或小鼠;S102利用基于磁共振图像的超声实时定位技术,确定所述实验动物的实际刺激区域;所述S102具体包括:利用磁共振技术,对所述实验动物的脑部进行扫描,获得第一图像;利用超声机的光学定位器,对所述实验动物进行标记点拾取;将所述第一图像导入所述超声机,并在所述第一图像中找出期望刺激的深部脑区并标记所述标记点,获得反映所述期望刺激的深部脑区的空间位置及其与所述标记点的相对空间位置的第二图像;利用所述超声机的光学定位器,对所述实验动物进行标记点拾取并获得反映所述实验动物的脑部空间位置的第三图像;将超声探头在所述实验动物的头皮上移动以进行声场定位,并利用所述超声探头上配置的光学发射器与所述光学定位器进行实时配准,当配准后的所述第二图像显示所述超声探头位置区域与所述期望刺激的深部脑区重合时,所述超声探头位置区域被视为所述实际刺激区域;S103使用经颅超声刺激技术,以第一参数对所述实际刺激区域进行第一刺激,并观察所述实验动物在所述第一刺激的观察周期内的身体状况和癫痫行为;当所述实验动物表现出无任何癫痫行为且精神状态良好时,所述实验动物被纳入后续的模型构建;当所述实验动物表现出Ⅰ级及以上的癫痫行为、精神状态萎靡、食欲缺乏和死亡中的一种或多种时,所述实验动物被排除;S104使用所述经颅超声刺激技术,以第二参数对所述实际刺激区域进行第二刺激,在每次刺激后观察所述实验动物的癫痫行为;当所述实验动物在所述第二刺激的周期内表现出至少一次Ⅰ-ⅠII级癫痫行为和至少一次IV级及以上的癫痫行为时,对所述实验动物进行S105;S105对所述S104得到的所述实验动物进行第三周期的观察,当所述实验动物在所述第三周期内表现出至少三次ⅠV级及以上的自发癫痫发作,所述动物模型被视为构建成功,所述癫痫为深部脑区起始的局灶性癫痫;其中,所述第一参数包括:换能器基频500kHz、超声脉冲时间400μs、脉冲达峰时间20ms、单刺激时长500ms和脉冲间隔2s;所述第二参数包括换能器基频500kHz、超声脉冲时间800μs、脉冲达峰时间40ms、单刺激时长1000ms和脉冲间隔4s;所述癫痫行为的判断标准采用Racine分级标准;所述方法不包括对所述实验动物进行电极植入和脑电活动记录。

全文数据:

权利要求:

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