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申请/专利权人：吉林农业大学
摘要：miR‑140修饰的鹿茸干细胞外泌体的制备方法及其应用，本发明涉及miR‑140修饰的鹿茸干细胞外泌体的制备方法及其应用。本发明采用miR‑140对miR‑140的表达进行上调，将携带有miR‑140的慢病毒转染鹿茸干细胞后，得到稳定高表达miR‑140的鹿茸干细胞系，超速梯度离心纯化收集鹿茸干细胞外泌体，使用鹿茸干细胞外泌体治疗OA软骨细胞，结果显示miR‑140修饰的鹿茸干细胞外泌体促进了OA软骨细胞的增殖、迁移，抑制了凋亡和炎症作用；进一步利用OA大鼠模型评价miR‑140修饰的鹿茸干细胞外泌体对软骨损伤修复的水平，结果显示可以促进软骨组织的损伤修复。本发明应用于生物医药技术领域。
主权项：1.miR-140修饰的鹿茸干细胞外泌体的制备方法，其特征在于该制备方法按以下步骤进行：一、miR-140慢病毒载体感染鹿茸干细胞：向培养瓶中加入完全培养基，然后按照2×105cellmL的密度加入鹿茸干细胞，37℃，5％CO2恒温培养箱中孵育，待培养至细胞融合度为30-40％后进行转染；弃培养基，然后加入DMEM洗涤细胞，在MOI值为30的条件下加入转染液2.5mL，培养24h，再加入2.5mL转染液，继续培养24h，更换成完全培养基继续培养24h，然后Q-PCR检测转染成功后即完成转染；二、鹿茸干细胞外泌体的分离：将转染成功的鹿茸干细胞在完全培养基中培养至细胞融合度为60％-70％时，弃掉培养基，更换无外泌体血清培养基继续培养至细胞融合度为90％，然后收集上清进行第一次离心，离心后收取上清液进行第二次离心，再收集上清液进行第三次离心，收集上清液进行过滤，再进行第四次离心，收取沉淀，即为miR-140修饰的鹿茸干细胞外泌体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林农业大学 miR-140修饰的鹿茸干细胞外泌体的制备方法及其应用
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