买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：河南迈达斯实业有限公司

摘要：本申请提供一种胶乳增强免疫比浊法测定D‑二聚体含量的试剂盒及D‑二聚体含量的检测方法，属于生物检测技术领域。试剂盒包括R1试剂和R2试剂。R1试剂包括D‑二聚体抗体敏化乳胶微球、牛血清白蛋白、氯化钾、甘氨酸、分散剂、稳定剂、防腐剂和缓冲剂。R2试剂包括超支化聚缩水甘油醚、氯化钾和防腐剂。本申请的试剂盒以超支化聚缩水甘油醚作为加速剂和促凝剂，超支化聚缩水甘油醚具有非线性、多支化和富含羟基的特点，能够与抗体经氢键等经弱相互作用方式结合，一方面抑制其他非特异性蛋白或小分子与抗体敏化胶乳结合而产生的胶乳团聚现象，另外一方面不影响抗体与抗原的特异性结合。从而提高试剂的稳定性和检测精度，并改善检测范围。

主权项：1.一种胶乳增强免疫比浊法测定D-二聚体含量的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂；所述R1试剂包括D-二聚体抗体敏化乳胶微球、牛血清白蛋白、氯化钾、甘氨酸、分散剂、稳定剂、防腐剂和缓冲剂；所述D-二聚体抗体敏化乳胶微球通过以下方法制得：将聚苯乙烯乳胶分散在2-N-吗啉乙磺酸中，制得PS乳胶的MES溶液，然后向PS乳胶的MES溶液中添加1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺，制得第二混合液，使第二混合液在15~30℃下搅拌反应20~40min，制得第三混合液；采用离心法将第三混合液中的活化PS微球分离，然后将得到的活化PS微球分散在磷酸缓冲盐溶液中，继续加入纤维蛋白降解产物抗体，制得第四混合液，使第二混合液在15~30℃下搅拌反应1.5~3h，制得第五混合液，然后向第五混合液中加入牛血清白蛋白，制得第六混合液，使第六混合液继续搅拌反应1.5~3h，制得第七混合液，采用离心法将第七混合液中的D-二聚体抗体敏化乳胶微球分离；所述R2试剂包括超支化聚缩水甘油醚、氯化钾和防腐剂；所述超支化聚缩水甘油醚通过以下方法制得：将三羟甲基乙烷的1,4-二氧六环溶液和甲醇钠的混合液在50~90℃的温度下加热15~30min，制得第一混合液，然后在80~100℃的温度下，将缩水甘油的1,4-二氧六环溶液添加至所述第一混合液中，继续搅拌12~48h，底部形成淡黄色凝胶；形成所述淡黄色凝胶后，冷却至15~30℃，倾倒上层有机溶剂，干燥后制得干凝胶，将所述干凝胶溶解于乙醇中，持续搅拌并添加乙醚，待凝胶沉淀，将沉淀溶解于水中，冷冻干燥，制得纯化后的超支化聚缩水甘油醚；所述分散剂包括吐温20、吐温40或吐温60，所述稳定剂包括甘油，所述防腐剂包括Proclin300，所述缓冲剂包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸；所述三羟甲基乙烷的1,4-二氧六环溶液的浓度为0.067~0.33mmolmL，所述甲醇钠和所述三羟甲基乙烷的摩尔比为0.2~0.4:1，所述缩水甘油和所述三羟甲基乙烷的摩尔比为50~200:1；所述超支化聚缩水甘油醚的重均分子量为85~95kDa，数均分子量为80~90kDa；缩水甘油的1,4-二氧六环溶液的浓度为5~20mmolmL，乙醇的用量为5~20mL，乙醚的用量为250~2000mL，所述超支化聚缩水甘油醚的质量体积百分数为0.1~0.8%。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南迈达斯实业有限公司 一种胶乳增强免疫比浊法测定D-二聚体含量的试剂盒及D-二聚体含量的检测方法