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申请/专利权人：中国人民解放军总医院

摘要：本发明提供了一种基于液质联用法同时检测利奈唑胺、特地唑胺和康替唑胺三种噁唑烷酮类药物浓度的方法，包括步骤：配制三种噁唑烷酮类药物的标准品储备溶液；将标准品储备溶液稀释配制成8个不同浓度的标准曲线工作溶液、4个不同浓度的质控工作溶液；将各浓度标准曲线工作溶液和质控工作溶液稀释到血浆基质中，得到标准曲线中各浓度样品和质控样品；绘制标准曲线；以及根据标准曲线计算出临床待测样品中的药物浓度。本发明方法实现了三种噁唑烷酮类抗菌药的同时测定，且该方法具有简便、快速、准确、回收率高，同时具有高选择性、高灵敏度及专属性好的优点。

主权项：1.一种基于液质联用法同时检测三种噁唑烷酮类药物浓度的方法，其特征在于，所述三种噁唑烷酮类药物为利奈唑胺、特地唑胺和康替唑胺，所述方法包括以下步骤：配制三种噁唑烷酮类药物的标准品储备溶液；将所述标准品储备溶液稀释配制成8个不同浓度的标准曲线工作溶液、4个不同浓度的质控工作溶液；将各浓度标准曲线工作溶液和质控工作溶液稀释到血浆基质中，得到标准曲线中各浓度样品和质控样品，其中，康替唑胺、利奈唑胺的浓度分别为：0.050μgmL、0.100μgmL、0.250μgmL、1.00μgmL、2.50μgmL、5.00μgmL、12.0μgmL、15.0μgmL，质控样品的浓度为0.050μgmL、0.150μgmL、5.00μgmL、10.0μgmL；特地唑胺的浓度为：0.025μgmL、0.050μgmL、0.125μgmL、0.500μgmL、1.25μgmL、2.50μgmL、6.00μgmL、7.50μgmL，质控样品浓度为0.025μgmL、0.075μgmL、2.50μgmL、5.00μgmL；将所述标准曲线中各浓度样品和质控样品与预先配制好的内标工作液混合，经振荡涡旋后，离心，上清液与一定比例的稀释液混匀后，取适量溶液用液质联用仪进行分析，以药物浓度为X轴，以药物峰面积与内标峰面积的比值为Y轴，绘制标准曲线，其中，采用伏立康唑-d3作为内标物，所述内标工作液的浓度为100～400ngmL；以及测定临床待测样品与预先配制好的内标工作液混合，经振荡涡旋后，离心，上清液与一定比例的稀释液混匀后，取适量溶液用液质联用仪进行分析，再根据所述标准曲线计算出所述临床待测样品中的药物浓度，其中，液相色谱条件为：流动相A为含10mM乙酸铵的水溶液，含体积百分比为0.1％的甲酸；流动相B为含5mM乙酸铵的乙腈水溶液，含体积百分比为0.1％的甲酸；采用梯度洗脱，梯度洗脱的程序为：0.00～0.20min，所述流动相A和所述流动相B的比例为85.0％：15.0％；0.20～1.50min，所述流动相A和所述流动相B的比例为85.0～30.0％：15.0～70.0％；1.50～2.50min，所述流动相A和所述流动相B的比例为30.0～2.0％：70.0～98.0％；2.50～4.00min，所述流动相A和所述流动相B的比例为2.0％：98.0％；4.00～4.10min，所述流动相A和所述流动相B的比例为2.0～85.0％：98.0～15.0％；4.10～6.00min，所述流动相A和所述流动相B的比例为85.0％：15.0％；洗脱流速为0.2～0.8mLmin，进样量为2～5μL，样品采集时间为6.00min；其中，所述液相色谱条件中的色谱柱为AgilentEclipsePlusC18，100×2.1mm，3.5μm；进样器温度4～20℃，柱温：室温；质谱条件为：离子源采用电喷雾离子源，检测方式为正离子模式，扫描方式为多离子反应监测MRM，干燥气温度350℃，干燥气流速5Lmin，雾化气压力30psi，辅助气体温度350℃，辅助气体流速11Lmin，毛细管电压4000V。

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