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申请/专利权人：西北农林科技大学

摘要：本发明公开了一种杜仲多糖制备方法及其制备的杜仲多糖在抗抑郁中的应用。杜仲多糖提取和纯化方式为水浸提‑醇沉法和三相分离法，对影响提取率、回收率和蛋白质清除率的料液比、NH42SO4质量浓度、pH值和提取液与叔丁醇体积比四个主要因素进行了单因素实验，以此获得高得率、高回收率和高纯度的多糖制备工艺。动物试验表明，杜仲多糖改善了慢性不可预知应激诱发的小鼠抑郁和焦虑样行为。与此同时，补充杜仲多糖增加模型小鼠脑内神经递质和脑源性神经营养因子的含量，说明杜仲多糖具有明显的抗抑郁活性。本发明对杜仲资源开发利用具有重要的实践意义和应用价值。

主权项：1.杜仲多糖在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述杜仲多糖的提取和分离纯化方法包括如下步骤：（1）水提：取干燥的杜仲树皮，粉碎机粉碎，蒸馏水清洗用以去除杂质，以1:5~1:30gmL料液比向杜仲粉中加入蒸馏水浸泡24h，浸泡后进行煎煮，待液体煎至沸腾后改文火继续煎煮2h，冷却后过滤上清液，残渣继续重复煎煮提取2次，合并三次煎煮后的滤液，旋转蒸发浓缩，得到浓缩液；（2）醇沉：向步骤（1）得到的浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，静置沉淀24h，离心收集沉淀，待风干后冷冻干燥，将粗多糖重新溶于蒸馏水中得到杜仲粗多糖提取液；（3）三相体系分离：向步骤（2）中得到的杜仲粗多糖提取液中加入质量浓度为15%~40%的（NH4）2SO4溶液，涡旋振荡仪震荡溶解1min，溶解后调节pH至3.0~8.0，以1:0.5~1:3.0体积比加入有机溶剂叔丁醇，快速混匀，将混合液放置到30℃条件下静置30min，为确保形成澄清的三个相，将混合物2000rmin离心20min，得到分离好的三相体系，上层相为叔丁醇、脂质和色素物质，中间相为蛋白质，下层相为（NH4）2SO4和杜仲多糖，分别取出上层相和下层相溶液；（4）（NH4）2SO4沉淀分离杜仲多糖：将步骤（3）中得到下层相溶液用40%的（NH4）2SO4沉淀，离心分离，沉淀溶于水，透析，浓缩并冷冻干燥，得到纯化后的杜仲多糖；（5）将步骤（3）中得到的上层叔丁醇相，减压蒸发，回收叔丁醇；（6）将步骤（4）中离心分离后的（NH4）2SO4溶液蒸发结晶，回收（NH4）2SO4。

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