买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：伊玛提克斯生物技术有限公司

摘要：本发明涉及用于免疫治疗方法的肽、蛋白、核酸和细胞。特别是，本发明涉及癌症的免疫疗法。本发明还涉及单独使用或与其他肿瘤相关肽能够例如作为刺激抗肿瘤免疫反应或体外刺激T细胞并转入患者的疫苗组合物的活性药物成分联合使用的肿瘤相关T细胞CTL肽表位。与主要组织兼容性复合体MHC分子结合的肽或与此同类的肽也可以是抗体、可溶性T细胞受体和其他结合分子的靶标。

主权项：1.一种肽，所述肽由SEQIDNO:1的氨基酸序列组成。

全文数据：用于头颈鳞状细胞癌和其他癌症免疫治疗的新型肽和支架技术领域本发明涉及用于免疫治疗方法的肽、蛋白质、核酸和细胞。特别是，本发明涉及癌症的免疫疗法。本发明还涉及单独使用或与其他肿瘤相关肽刺激抗肿瘤免疫反应或体外刺激T细胞并转入患者的疫苗复合物的活性药物成分联合使用的肿瘤相关T细胞CTL肽表位。与主要组织兼容性复合体MHC分子结合的肽或与此同类的肽也可以是抗体、可溶性T细胞受体和其他结合分子的靶标。本发明涉及数种新型肽序列及其变体，它们源自人肿瘤细胞的HLA-I类分子，可用于引发抗肿瘤免疫反应的疫苗组合物中或作为开发药物免疫活性化合物和细胞的目标。背景技术头颈鳞状细胞癌HNSCC是异质肿瘤，其流行病学、病因和治疗均具有差异Economopoulouetal.,2016。这些肿瘤根据它们开始发生的部位来分类。它们包括口腔嘴唇，前三分之二舌头、牙龈、面颊和嘴唇内膜、口腔底、硬腭癌、咽鼻咽，口咽包括软腭、舌底、扁桃体、下咽癌、喉癌、鼻旁窦和鼻腔癌以及唾液腺癌NationalCancerInstitute,2015。HNSCC是世界上第六大常见恶性肿瘤，约占全球所有确诊癌症病例的6％Economopoulouetal.,2016。HNSCC的特征是发病率和解剖学分布的地理差异很大VigneswaranandWilliams,2014。高风险国家位于南亚和东南亚如，印度、斯里兰卡、孟加拉国、巴基斯坦。在这些地区，口腔鳞状细胞癌OSCC是男性中最常见的癌症，也是女性中第三大常见癌症VigneswaranandWilliams,2014。在欧洲，法国、匈牙利、斯洛伐克和斯洛文尼亚地区发现OSCC的发病率高。在美国，HNSCC是男性中第八大常见的癌症。HNSCC的主要风险因素是饮酒和吸烟。HNSCC其他风险因素包括饮用马黛茶，还有腌制或盐制食品，使用槟榔，职业暴露于木屑、石棉和合成纤维，辐射暴露，致癌型人乳头瘤病毒HPV或Epstein-Barr病毒EBV和遗传特别是鼻咽SCC华裔NationalCancerInstitute,2015。虽然OSCC和喉SCC在发达国家有所下降，但是口咽SCC发病率有所增加。这归因于SCC生物驱动因素的变化HPV相关SCC而不是吸烟相关的SCC。从1988年到2004年，HPV相关口咽癌增加了225％NationalCancerInstitute,2015。HPV阳性HNSCC可能代表一个独特的疾病实体。这些肿瘤与生存显著改善相关。发病率取决于性别：男女比例范围为2:1至4:12014年世卫组织基本药物列表癌症药物审查。HNSCC患者的五年总体生存率为40-50％WorldHealthOrganization,2014。虽然早期癌症T1、T2的治愈率为70％-95％NatCancerInst，但大多数HNSCC患者存在局部晚期疾病Baumletal.,2016。早期HNSCC的治疗包括手术或放射的单一模式治疗WorldHealthOrganization,2014。晚期癌症通过化疗联合手术和或放疗进行治疗。化疗主要包括顺铂或含有顺铂的药物组合，其中包括多西他赛，顺铂、氟尿嘧啶5-FU或顺铂、表柔比星、博来霉素或顺铂、5-FU。异维甲酸13-顺式视黄酸用于口腔SCC和喉SCC，每日1次，共使用1年，以降低二次肿瘤的发生率NationalCancerInstitute,2015。HNSCC被视为是一种免疫抑制疾病，其特征在于免疫活性细胞和受损细胞因子分泌的失调Economopoulouetal.,2016。HPV阴性和HPV阳性肿瘤的免疫治疗策略不同。对于HPV阳性肿瘤，病毒癌蛋白E6和E7代表着良好的靶标，这是因为它们连续地通过肿瘤细胞中表达，对于保持HPV阳性癌细胞的转化状态必不可少。几种疫苗疗法目前正在HPV阳性HNSCC中进行研究，包括DNA疫苗、肽疫苗和涉及树突状细胞DC的疫苗。此外，正在进行的II期临床试验在HPV阳性肿瘤患者中研究了淋巴细胞耗竭继而自体输注TIL的疗效Economopoulouetal.,2016。在HPV阴性肿瘤中，目前正在使用和研究几种免疫治疗策略。嵌合IgG1抗EGFR单克隆抗体西妥昔单抗已被FDA批准用于组合化疗，作为复发转移性HNSCC的标准一线治疗。其他的抗EGFR单克隆抗体包括帕尼单抗、尼妥珠单抗和扎妥木单抗在HNSCC中进行了评估。一些免疫检查点抑制剂在HNSCC的用途在临床试验中进行了研究。它们包括以下抗体：易普利姆玛抗CTLA-4、曲美木单抗tremelimumab，抗CTLA-4、彭博罗珠单抗pembrolizumab，抗PD-1、纳武单抗nivolumab，抗PD-1、durvalumab抗PD-1、抗KIR、urelumab抗CD137和抗LAG-3。HNSCC患者的两项临床研究评估了载有p53肽或凋亡肿瘤细胞的DC的用途。免疫应答令人满意的，副作用可以接受。数项研究使用了过继性T细胞疗法ACT进行。T细胞被诱导对抗任何辐照的自体肿瘤细胞或EB病毒。疾病控制和总生存率结果是看好的Economopoulouetal.,2016。考虑到治疗癌症相关的严重副作用和费用，通常有必要确定可用于治疗癌症的因子，尤其是头颈鳞状细胞癌。通常也有必要确定代表癌症生物标志物的因子，尤其是头颈鳞状细胞癌，从而更好地诊断癌症、评估预后和预测治疗成功性。癌症免疫治疗代表了癌症细胞特异性靶向作用的一个选项，同时最大限度地减少副作用。癌症免疫疗法利用存在的肿瘤相关抗原。肿瘤相关抗原TAA的目前分类主要包括以下几组：a癌-睾丸抗原：T细胞能够识别的最先确认的TAA属于这一类抗原，由于其成员表达于组织学相异的人肿瘤中、正常组织中、仅在睾丸的精母细胞精原细胞中、偶尔在胎盘中，因此，它最初被称为癌-睾丸CT抗原。由于睾丸细胞不表达HLAI类和II类分子，所以，在正常组织中，这些抗原不能被T细胞识别，因此在免疫学上可考虑为具有肿瘤特异性。CT抗原大家熟知的例子是MAGE家族成员和NY-ESO-1。b分化抗原：肿瘤和正常组织肿瘤源自该组织都含有TAA。大多数已知的分化抗原发现于黑色素瘤和正常黑色素细胞中。许多此类黑色素细胞谱系相关蛋白参与黑色素的生物合成，因此这些蛋白不具有肿瘤特异性，但是仍然被广泛用于癌症的免疫治疗。例子包括，但不仅限于，黑色素瘤的酪氨酸酶和Melan-AMART-1或前例腺癌的PSA。c过量表达的TAA：在组织学相异的肿瘤中以及许多正常组织中都检测到了基因编码被广泛表达的TAA，一般表达水平较低。有可能许多由正常组织加工和潜在提呈的表位低于T细胞识别的阈值水平，而它们在肿瘤细胞中的过量表达能够通过打破先前确立的耐受性而引发抗癌反应。这类TAA的典型例子为Her-2neu、生存素、端粒酶或WT1。d肿瘤特异性抗原：这些独特的TAA产生于正常基因如β-catenin、CDK4等的突变。这些分子变化中有一些与致瘤性转化和或进展相关。肿瘤特异性抗原一般可在不对正常组织带来自体免疫反应风险的情况下诱导很强的免疫反应。另一方面，这些TAA在多数情况下只与其上确认了有TAA的确切肿瘤相关，并且通常在许多个体肿瘤之间并不都共享TAA。在含有肿瘤特定相关同种型蛋白的情况下，如果肽源自肿瘤相关外显子也可能出现肽肿瘤特异性或相关性。e由异常翻译后修饰产生的TAA：此类TAA可能由肿瘤中既不具有特异性也不过量表达的蛋白产生，但其仍然具有肿瘤相关性该相关性由主要对肿瘤具有活性的翻译后加工所致。此类TAA产生于变糖基化模式的改变，导致肿瘤产生针对MUC1的新型表位或在降解过程中导致诸如蛋白拼接的事件，这可能具有也可能不具有肿瘤特异性。f肿瘤病毒蛋白：这些TTA是病毒蛋白，可在致癌过程中发挥关键作用，并且由于它们是外源蛋白非人源蛋白，所以能够激发T细胞反应。这类蛋白的例子有人乳头状瘤16型病毒蛋白、E6和E7，它们在宫颈癌中表达。基于T细胞的免疫治疗靶向作用于主要组织兼容性复合体MHC分子提呈的来源于肿瘤相关蛋白或肿瘤特异性蛋白的肽表位。肿瘤特异性T淋巴细胞所识别的抗原，即其表位，可以是源自所有蛋白类型的分子，如酶、受体、转录因子等，它们在相应肿瘤的细胞中被表达，并且与同源未变的细胞相比，其表达通常上调。MHC分子有两类：MHCI类和MHCII类。MHCI类分子由一条α重链和β-2-微球蛋白，MHCII类分子由一条α和一条β链组成。其三位构造形成一个结合槽，用于与肽进行非共价相互作用。大部分有核细胞上都可发现MHC-I类分子。他们提呈主要为内源性的蛋白、缺陷核糖体产物DRIP和较大肽裂解生成的肽。然而，源自内体结构或外源性来源的肽也经常在MHC-I类分子上发现。这种I-类分子非经典提呈方式在文献中被称为交叉提呈BrossartandBevan,1997；Rocketal.,1990。MHCII类分子主要发现于专业抗原提呈细胞APC上，并且主要提呈，例如，在内吞作用过程中由APC占据并且随后被加工的外源性或跨膜蛋白的肽。肽和MHCI类的复合体由负载相应T细胞受体TCR的CD8阳性T细胞进行识别，而肽和MHCII类分子的复合体由负载相应TCR的CD4阳性辅助T细胞进行识别。因此，TCR、肽和MHC按照1:1:1的化学计量呈现，这一点已是共识。CD4阳性辅助T细胞在诱导和维持CD8阳性细胞毒性T细胞的有效反应中发挥重要作用。肿瘤相关抗原TAA衍生的CD4阳性T细胞表位的识别对开发能引发抗肿瘤免疫反应的药物产品可能非常重要Gnjaticetal.,2003。在肿瘤部位，T辅助细胞维持着对细胞毒性T细胞CTL友好的细胞因子环境Mortaraetal.,2006并吸引效应细胞，如CTL、天然杀伤NK细胞、巨噬细胞和粒细胞Hwangetal.,2007。在没有炎症的情况下，MHCII类分子的表达主要局限于免疫系统细胞，尤其是专业抗原提呈细胞APC，例如，单核细胞、单核细胞源性细胞、巨噬细胞、树突状细胞。在癌症患者的肿瘤细胞中发现有MHCII类分子的表达Dengjeletal.,2006。本发明的延长较长肽可作为MHC-II类活性表位。MHC-II类表位活化的辅助T细胞在编排抗肿瘤免疫的CTL效应子功能中发挥着重要作用。触发TH1细胞反应的辅助T细胞表位支援CD8阳性杀伤T细胞的效应子功能，其中包括直接作用于肿瘤细胞的细胞毒性功能该类肿瘤细胞表面显示有肿瘤相关肽MHC复合体。这样，肿瘤相关T辅助细胞表位单独使用或与其他肿瘤相关肽结合使用可作为刺激抗肿瘤免疫反应的疫苗化合物的活性药物成分。哺乳动物如小鼠模型显示，即使没有CD8阳性T淋巴细胞，CD4阳性T细胞也能通过分泌干扰素-γIFNγ抑制血管生成而足以抑制肿瘤的表现BeattyandPaterson,2001；Mumbergetal.,1999。没有CD4T细胞作为直接抗肿瘤效应因子的证据Braumulleretal.,2013；Tranetal.,2014。由于HLAII类分子的组成性表达通常仅限于免疫细胞，因此，直接从原发肿瘤中分离II类肽之前被认为是不可能的事。然而，Dengjel等人成功地在肿瘤中直接识别了多个MHCII类表位WO2007028574,EP1760088B1。由于CD8依赖型和CD4依赖型这两种反应共同并协同地促进抗肿瘤作用，因此，确定和表征由CD8+T细胞配体：MHCI类分子+肽表位或CD4阳性T辅助细胞配体：MHCII类分子识别的肿瘤相关抗原对开发肿瘤疫苗非常重要。对于MHCI类肽触发引发细胞免疫反应的肽，它也必须与MHC分子结合。这一过程依赖于MHC分子的等位基因以及肽氨基酸序列的特异性多态性。MHC-I类-结合肽的长度通常为8-12个氨基酸残基，并且在其与MHC分子相应结合沟槽相互作用的序列中通常包含两个保守残基“锚”。这样，每个MHC的等位基因都有“结合基序”，从而确定哪些肽能与结合沟槽特异性结合。在MHC-I类依赖性免疫反应中，肽不仅能与肿瘤细胞表达的某些MHC-I类分子结合，而且它们之后还必须能被T细胞负载的特异性T细胞受体TCR识别。对于被T淋巴细胞识别为肿瘤特异性抗原或相关性抗原以及用于治疗的蛋白质，必须具备特殊的条件。该抗原应主要由肿瘤细胞表达，而不由正常健康组织表达，或表达数量相对较少。在一个优选的实施方案中，与正常健康组织相比，所述肽应在肿瘤细胞中过度提呈。更为适宜的情况是，该相应抗原不仅出现于一种肿瘤中，而且浓度即每个细胞的相应肽拷贝数目高。肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原往往是源自直接参与因细胞周期控制或凋亡抑制中的其功能而发生的正常细胞向肿瘤细胞转化的蛋白。另外，这些直接导致转化事件的蛋白的下游靶标可能会被上调，因此可能与肿瘤间接相关。这些间接肿瘤相关抗原也可能是预防接种方法的靶标Singh-Jasujaetal.,2004。至关重要的是，表位存在于抗原氨基酸序列中，以确保这种来自肿瘤相关抗原的肽“免疫原性肽”可导致体外或体内T细胞反应。基本上，任何能与MHC分子结合的肽都可能充当一个T细胞表位。诱导体外或体内T细胞反应的前提是存在具有相应TCR的T细胞并且不存在对该特定表位的免疫耐受性。因此，TAA是基于T细胞疗法包括但不限于肿瘤疫苗研发的起点。识别和表征TAA的方法通常基于对患者或健康受试者T细胞的使用情况，或基于肿瘤与正常组织肽之间差别转录特性或差别表达模式的产生。然而，对肿瘤组织或人肿瘤细胞株中过量表达或选择性表达的基因的识别并不提供在免疫疗法中使用这些基因所转录抗原的准确信息。这是因为，有着相应TCR的T细胞必须要存在而且对这个特定表位的免疫耐受性必须不存在或为最低水平，因此，这些抗原的表位只有一部分适合这种应用。因此，在本发明的一非常优选的实施例中，只选择那些针对可发现功能性和或增殖性T细胞情况的过量提呈或选择性提呈肽，这一点非常重要。这种功能性T细胞被定义为在以特异性抗原刺激后能够克隆地扩展并能够执行效应子功能“效应子T细胞”的T细胞。在通过根据本发明的特定TCR例如可溶性TCR和抗体或其他结合分子支架靶向作用于肽-MHC的情况下，潜在肽的免疫原性是次要的。在这些情况下，提呈是决定因素。发明内容在本发明的第一方面，本发明涉及一种肽或其药用盐，包含选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的氨基酸序列，或该序列的与SEQIDNO:1至SEQIDNO:91具有至少77％、优选至少88％同源优选至少77％或至少88％相同的变体序列，其中变体与MHC结合和或诱导T细胞与所述肽发生交叉反应，其中所述肽不是基本的全长多肽。本发明进一步涉及本发明的肽，包含选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的序列、或与SEQIDNO:1至SEQIDNO:91具有至少77％、优选至少88％同源性优选为至少77％或至少88％相同的变体，其中所述肽或其变体的总长度为8至100个、优选为8至30个、最优选为8至14个氨基酸。下表显示了根据本发明的肽、它们各自的SEQIDNO、以及这些肽的可能源潜在基因。表1和表2中的所有肽均与HLA-A*02结合。表2中的肽之前在大型列表中披露，作为高通量筛查结果，错误率高，或使用算法计算出，但之前未显示与癌症有任何关联。表3中的肽是可与本发明其他肽组合使用的其他肽。表4A和B中的肽还可用于诊断和或治疗各种其他恶性疾病，这些疾病涉及过量表达或过度提呈各基本多肽。表1：本发明中的肽J＝磷酸丝氨酸表2：本发明中的其他肽，之前与癌症无已知的关联。序列ID号序列基因ID正式基因符号81VLAENPDIFAV6541SLC7A182VLDINDNPPV120114,1828,2195FAT3,DSG1,FAT183QLLQYVYNL4173MCM484ALMAGCIQEA1026CDKN1A85QLIEKITQV114827FHAD186SLQERQVFL9333TGM587ALPEPSPAA5339PLEC88LMAPAPSTV7071KLF1089VLDEGLTSV25909,285116AHCTF1,AHCTF1P190TLNDGVVVQV10146G3BP191MLFENMGAYTV4953ODC1表3：用于个性化癌症疗法的本发明肽。本发明还一般涉及本发明的肽在治疗增殖性疾病中的用途，增殖性疾病为例如，急性骨髓性白血病、乳腺癌、胆管癌、脑癌、慢性淋巴细胞白血病、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、膀胱癌和子宫癌。特别优选的是本发明的肽单独或组合，其选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91。更优选的是所述肽单独或组合选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:31见表1并且用于免疫治疗如示下面的表4A所示，其中本发明的许多肽也发现于其他肿瘤中，因此也可用于其他适应症的免疫治疗。另请参阅图1和实施例1。如示下面的表4A所示，其中本发明的许多肽也发现于其他肿瘤中，因此也可用于其他适应症的免疫治疗。另请参阅图1和实施例1。表4A：本发明的肽及其在其他增殖性疾病特别是其他癌性疾病中的特定用途。该表显示，对于其他肿瘤类型的选定肽，发现他们过量提呈于5％以上测定的肿瘤样本，或提呈于5％以上测定的肿瘤样本且几何学平均值肿瘤与正常组织的比值大于3。过度提呈定义为与最高提呈的正常样本相比在肿瘤样本上提呈更高。经测试相比过度提呈的正常组织有：脂肪组织、肾上腺、胆管、血细胞、血管、骨髓、脑、食道、眼、胆囊、心脏、肾、大肠、肝、肺、淋巴结、神经、胰腺、甲状旁腺、腹膜、垂体、胸膜、唾液腺、骨骼肌、皮肤、小肠、脾、胃、甲状腺、气管、输尿管、膀胱。NSCLC＝非小细胞肺癌，SCLC＝小细胞肺癌，RCC＝肾癌，CRC＝结肠或直肠癌，GC＝胃癌，HCC＝肝癌，PC＝胰腺癌，PrC＝前列腺癌，白血病，BRCA＝乳腺癌，OC＝卵巢癌，MCC＝梅克尔细胞癌，NHL＝非霍奇金淋巴瘤，AML＝急性骨髓性白血病，CLL＝慢性淋巴细胞白血病表4B：本发明的肽及其在其他增殖性疾病特别是其他癌性疾病中的特定用途。该表显示，对于其他肿瘤类型的选定肽，发现他们过量提呈特定提呈于5％以上测定的肿瘤样本，或提呈于5％以上测定的肿瘤样本且几何学平均值肿瘤与正常组织的比值大于3。过度提呈定义为与最高提呈的正常样本相比在肿瘤样本上提呈更高。经测试相比过度提呈的正常组织有：脂肪组织、肾上腺、动脉、骨髓、脑、中枢神经、结肠、十二指肠、食道、眼、胆囊、心脏、肾、肝、肺、淋巴结、血细胞、胰腺、甲状旁腺、外周神经、腹膜、垂体、胸膜、直肠、唾液腺、骨骼肌、皮肤、小肠、脾、胃、胸腺、甲状腺、气管、输尿管、膀胱、静脉。序列ID号序列其他实体2PVCPPGGIQEV食管癌6ALYDAELSQM食管癌8AQLNIGNVLPV膀胱癌9STASAITPSV食管癌16ALKDSVQRAHCC43AVLGGKLYVRCC、GC、HCC45GLIEWLENTVHCC47QLLEGELETLOC50ALSNVVHKVNSCLC51FLIPSIIFAOC56FLQLETEQVOC57AILGFALSEAHCC60SLGNFKDDLLNSCLC61FVAGYIAGVHCC65ALWGFFPVLLHCC66TLLSEIAELHCC73YIDPYKLLPLBRCA、膀胱癌75ALASAPTSVHCC88LMAPAPSTV黑色素瘤89VLDEGLTSVGCNSCLC＝非小细胞肺癌，HCC＝肝癌，BRCA＝乳腺癌，RCC＝肾细胞癌，GC＝胃癌，OC＝卵巢癌。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:1、10、17、37、42、48、57、61、67、69、70、72、75、76、78和87中任一项的本发明的至少一种肽在胆囊癌和或胆管癌的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:2、20、50、60、61、63和64中任一项的本发明至少一种肽在NSCLC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:2、17、45、59、61、63、67、81、83、85、89和91中任一项的本发明至少一种肽在SCLC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:2、3、4、6、7、8、9、16、19、23、27、32、39、41、42、46、48、49、50、52、53、54、58、60、61、62、72、75、88和90中任一项的本发明至少一种肽在食管癌的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:3、4、7、8、15、16、19、20、21、24、27、31、32、39、45、46、47、48、50、51、53、56、58、60、64、69、73、74、78、81、85、86、88、89和90中任一项的本发明至少一种肽在膀胱癌的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:4、16、17、39、48、50、56、57、58、62、73、75、76、79和89中任一项的本发明至少一种肽在BRCA的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:8、9、11、16、17、32、43、48、56、57、65、66、67、71、73、81、82、85、87、88和89中任一项的本发明至少一种肽在黑色素瘤的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:16、17、24、29、43、57、66、70、73、76、77和83中任一项的本发明至少一种肽在AML的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:16、17、19、31、43、46、47、48、49、51、56、57、58、66、67、72、75、76、79、83、89、90和91中任一项的本发明至少一种肽在子宫癌的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:18、58、61和88中任一项的本发明至少一种肽在脑癌的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:32、43、48、59、60、61、63、66、73、76、79、83、85、86、87、89、90和91中任一项的本发明至少一种肽在NHL的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:43、61、65、66、73、76、78、89、90和91中任一项的本发明至少一种肽在CLL的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:45、47、51、56、66和67中任一项的本发明至少一种肽在OC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:43、50、89和61中任一项的本发明至少一种肽在GC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:16、43、45、57、61、65、66和75中任一项的本发明至少一种肽在HCC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及根据SEQIDNO:43、61、62、87、89和90中任一项的本发明至少一种肽在RCC的治疗在一个优选实施方式中为联合疗法中的用途。因此，本发明的另一个方面涉及本发明中肽在选自头颈鳞状细胞癌、急性骨髓性白血病、乳腺癌、胆管癌、脑癌、慢性淋巴细胞性白血病、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、膀胱癌、子宫癌中的增殖性疾病的治疗优选联合疗法中的用途。本发明还涉及本发明的肽，其具有与主要组织兼容性复合体MHCI或以延长形式存在的例如长度变化的MHC-II类分子结合的能力。本发明进一步涉及本发明中的肽，其中所述肽每种肽由或基本由根据SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的氨基酸序列组成。本发明进一步涉及本发明的肽，其中所述肽被修饰和或包含非肽键。本发明进一步涉及本发明的肽，其中所述肽为融合蛋白的一部分，特别是与HLA-DR抗原相关不变链Ii的N-端氨基酸融合，或与抗体例如，树突状细胞特定抗体融合，或融合到抗体的序列中。本发明进一步涉及一种能表达和或表达本发明核酸的表达载体。本发明进一步涉及本发明的肽、本发明的核酸或本发明的表达载体在药物中的用途，特别是用于治疗癌症。本发明进一步涉及本发明中肽或本发明中所述肽复合体含有MHC的特异性抗体以及制造这些抗体的方法。本发明进一步涉及本发明的T细胞受体TCR，特别是可溶性TCRsTCRs和加工为自体或异体T细胞的克隆TCR，以及制造这些TCR的方法，还涉及载有所述TCR或与所述TCR交叉反应的NK细胞的制造方法。抗体和TCR是本发明现有肽的免疫治疗用途的另外实施方案。本发明进一步涉及含本发明核酸或表达载体的宿主细胞。本发明进一步涉及本发明的宿主细胞，其为抗原提呈细胞，优选为树突细胞。本发明进一步涉及制备本发明肽的一种方法，所述方法包括培养本发明的宿主细胞，以及从所述宿主细胞或其培养基中分离肽。本发明进一步涉及本发明中的方法，其中通过使足量的抗原与抗原提呈细胞接触，抗原被载在表达于合适抗原提呈细胞或人工抗原呈递细胞表面的I或II类MHC分子上。本发明进一步涉及本发明的方法，其中抗原提呈细胞由能表达含SEQIDNO:1至SEQIDNO:91、优选为含SEQIDNO:1至SEQIDNo:31或其变体氨基酸序列的肽的表达载体。本发明进一步涉及以本发明方法制造的激活的T细胞，其中所述T细胞有选择性地识别一种细胞，该细胞表达含本发明氨基酸序列的多肽。本发明进一步涉及一种杀伤患者靶细胞的方法，其中患者的靶细胞异常地表达含本发明任意氨基酸序列的多肽，该方法包括对患者施用本发明方法制造的有效量T细胞。本发明进一步涉及任何所述肽、本发明的核酸、本发明的表达载体、本发明的细胞、本发明的激活的T淋巴细胞、T细胞受体或抗体或其他肽-和或肽-MHC结合分子作为药物或在药物制备中的用途。所述药物优选为具有抗癌活性。优选情况为，所述药物为基于可溶性TCR或抗体的细胞治疗药物、疫苗或蛋白质。本发明进一步涉及本发明中的用途，其中所述癌细胞为头颈鳞状细胞癌、急性骨髓性白血病、乳腺癌、胆管癌、脑癌、慢性淋巴细胞性白血病、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、膀胱癌、子宫癌细胞，优选头颈鳞状细胞癌细胞。本发明进一步涉及一种基于本发明肽的生物标志物，在此称为“靶标“，其可用于诊断癌症，优选为头颈鳞状细胞癌。所述标志物可以是肽本身的过度提呈，或相应基因的过度表达。标志物也可以用于预测治疗成功的可能性，优选为免疫疗法，最优选为靶向由该生物标志物识别的相同靶的免疫疗法。例如，抗体或可溶性TCR可用于对肿瘤切片进行染色以检测是否存在与MHC复合的相关肽。任选地，抗体具有进一步的效应子功能，如免疫刺激域或毒素。本发明还涉及这些新靶点在癌症治疗中的用途。具体实施方式ALOX12B参与终末皮肤分化和表皮屏障功能Furstenbergeretal.,2007；Eppetal.,2007。ALOX12B是癌症中扩增的免疫抑制因子Rooneyetal.,2015。顺铂诱导且ATM磷酸化p-δNp63α。随后，它上调miR-185-5p，其下调let7-5p，导致在鳞状细胞癌中ALOX12B表达调节Ratovitski,2013。ALOX12B与乳腺癌和肺癌风险有关Leeetal.,2009；Shenetal.,2009。ANKRD17mRNA水平在结直肠癌中广泛下调，并使该蛋白成为用于结直肠癌检测的多靶标测定组的潜在标志物Ioanaetal.,2010。通过细胞周期蛋白ECdK2磷酸化ANKRD17，该蛋白参与细胞周期调控。过量表达促进进入S期，而表达耗竭抑制DNA复制、阻断细胞周期进程并且上调肿瘤抑制基因p53和p21的表达Dengetal.,2009。ATP5G1富含于胃癌的氧化磷酸化途径Songetal.,2016。头颈鳞状细胞癌中ATP5G1表达降低Kocetal.,2015。肝脏再生增强因子ALR的敲减导致小鼠脂肪肝和肝细胞癌加速发展。此外，在ALR敲减小鼠中ATP5G1表达降低Gandhietal.,2015。与低中级别肿瘤相比，ATP5G2在高级别膀胱癌肿瘤中甲基化程度更高Kitchenetal.,2016。RIZ1是一种肿瘤抑制因子，其耗竭导致ATP5G2表达的改变Xieetal.,2016b。TP5G2在雌激素和孕酮治疗子宫内膜石川癌细胞系后高度表达Tamm-Rosensteinetal.,2013。ATP5G2启动子在原发性肾细胞癌中甲基化Morrisetal.,2011。ATP5G3富含于胃癌的氧化磷酸化途径Songetal.,2016。ATP5G3在PPARα启动时上调，该启动与肿瘤进展负相关、抑制细胞迁移HuangandChang,2016。ATP5G3可能是一种辐射敏感性基因Tsujietal.,2005。BTBD11编码BTB结构域含11蛋白，并位于染色体12q23.3上RefSeq,2002。BTBD11在乳头状甲状腺癌中差异表达Quetal.,2016。BTBD11是TGF-β靶基因Sawadaetal.,2016。BTBD11在胃癌中突变Leisersonetal.,2015；Leisersonetal.,2016。吸烟与非吸烟肺腺癌患者之间CD276的预后关系不同。CD276高表达与吸烟有关Inamuraetal.,2017。CD276在前列腺癌中高甲基化Wangetal.,2016b。CD276受miR-124调节，后者在骨肉瘤中下调。TGF-β1通过SMAD3和4信号传导上调miR-155，导致CEBPB抑制miR-143减弱，这导致CD276的积累。CD276受miR-187调节，后者在结直肠癌中下调Wangetal.,2016e；Trojandtetal.,2016；Zhouetal.,2016；Wangetal.,2016a。CD276通过影响SREBP-1FASN信号传导介导肺癌异常脂质代谢。可溶性CD276通过TLR4NF-κB信号介导胰腺癌侵袭和转移Xieetal.,2016a；Luoetal.,2016。CD276是一种免疫检查点，可能是癌症治疗中有希望的靶点。其可在肿瘤生长期间被靶向作用，抑制抗肿瘤免疫性，从而使新出现的肿瘤出现免疫逃逸LeungandSuh,2014；SwatlerandKozlowska,2016；Janakirametal.,2016。CD276由大多数高危神经母细胞瘤表达，在肿瘤血管系统中过度表达，并在肿瘤生存和侵袭中起重要作用Bottinoetal.,2014。CD276敲减增加化学敏感性并降低转移可能性。CD276敲减导致凋亡标志物表达和STAT3磷酸化增加。黄芪甲苷静脉内注射治疗通过抑制非小细胞肺癌细胞中的CD276从而降低细胞生长并增加对顺铂的化学敏感性Nygrenetal.,2011；Heetal.,2016。CD276在食管癌、乳腺癌、胆囊癌、前列腺癌和卵巢癌中过度表达Barachetal.,2011；Janakirametal.,2012；Faucietal.,2012；Chenetal.,2016；Liuetal.,2016。CD276过度表达与不良生存、预后和肿瘤分级相关。CD276可促进癌症侵袭和进展。但是，CD276也可能具有抗肿瘤作用。CD276高表达是非小细胞肺癌中淋巴结转移和晚期TNM分期的一项指标YiandChen,2009；Loosetal.,2010；Nygrenetal.,2011；Faucietal.,2012；Wangetal.,2014a；Yeetal.,2016；Benzonetal.,2016；Wuetal.,2016。CD276下调自然杀伤细胞的细胞毒性，支持癌症免疫逃逸Bottinoetal.,2014。CDH23编码钙黏蛋白相关23蛋白，其是钙黏素超家族的成员，其基因编码钙依赖性细胞黏附糖蛋白。编码的蛋白质被认为参与了毛细管结构和毛束形成。该基因位于包含人耳聋基因座DFNB12和USH1D的区域中。Usher征候群1D和非征候群常染色体遗传性耳聋DFNB12由该钙黏蛋白样基因的等位基因突变引起。该基因的上调也可能与乳腺癌相关RefSeq,2002。TMPRSS3是乳腺癌不良预后因子，可与CDH23相互作用Ruietal.,2015。CDH23在ERα表达乳腺癌细胞中的瘦蛋白处理后上调Binaietal.,2013。CDH23在乳腺癌中上调，可能参与早期转移ApostolopoulouandLigon,2012。在胰腺癌细胞系中可观察到CDH23缺失Suzukietal.,2008。CDH3参与致癌信号传导并启动整合素、受体酪氨酸激酶、小分子GTP酶、EMT转录因子和其他钙黏蛋白家族成员。CDH3信号传导诱导侵袭和转移Albergariaetal.,2011；Paredesetal.,2012；Bryan,2015；VieiraandParedes,2015。CDH3的致癌活化参与胃癌发生Resendeetal.,2011。CDH3过度表达促进乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌、子宫内膜癌、皮肤癌、胃癌、胰腺癌和结肠癌Albergariaetal.,2011；Paredesetal.,2007；BryanandTselepis,2010；Reyesetal.,2013；VieiraandParedes,2015。CDH3是在基底样乳腺癌中表达的基底上皮标志物。BRCA1癌的特征在于基底标志物如CDH3的表达，并显示出高级别、高度增殖、ER阴性和HER3阴性表型Honradoetal.,2006；Palaciosetal.,2008；Rastellietal.,2010；Dewaretal.,2011。CDH3是黑色素瘤和口腔鳞状细胞癌中的肿瘤抑制因子Haassetal.,2005；VieiraandParedes,2015。CDH3可用作EMT标志物。在肿瘤形成和进展过程中，E-钙黏蛋白转化为N-钙黏蛋白和CDH3表达Piuraetal.,2005；Bonitsisetal.,2006；BryanandTselepis,2010；RibeiroandParedes,2014。CDH3和β-连环蛋白之间的竞争性相互作用导致胃癌中细胞间相互作用和转移受损MoskvinaandMal'kov,2010。CDH3可能是结肠癌中癌症形成的早期标志物Alrawietal.,2006。CDH3的失调节是预后不良和恶化程度增加的标志物KnudsenandWheelock,2005。CLCA2过度表达下调β-连环蛋白和β-连环蛋白启动基因Ramenaetal.,2016。CLCA2与EVA1强烈相互作用，EVA1也可被p53和p63诱导、通常在引起EMT的乳腺癌中下调，并且对上皮分化非常重要。两种蛋白质与E-钙黏蛋白相互作用Ramenaetal.,2016。成年急性骨髓性白血病中存在AML1-CLCA2和RUNX1-CLCA2基因融合产物GiguereandHebert,2010；Jiangetal.,2013。DNA损伤后，CLCA2可被p73、p53和p63诱导，并充当增殖的抑制剂Waliaetal.,2009；Sasakietal.,2012；Yuetal.,2013；Ramenaetal.,2016。CLCA2表达在肺腺癌患者的循环肿瘤细胞中升高，检测量增加与患者生存期缩短有关Hayesetal.,2006；Manetal.,2014。与腺癌相比，CLCA2在肺鳞状细胞癌中表达较高，与组织学肿瘤分级相关。CLCA2表达可用于检测非小细胞肺癌和小细胞肺癌Hayesetal.,2006；Shinmuraetal.,2014。CLCA2敲减导致上皮细胞间质转化、癌细胞迁移和侵袭。在正常条件下，CLCA2被认为可通过抑制FAK信号通路来抑制迁移和侵袭。CLCA2介导与β4整合素相关的肺转移Abdel-Ghanyetal.,2001；Waliaetal.,2012；Sasakietal.,2012；Ramenaetal.,2016。CLCA2由于启动子高甲基化而在乳腺癌中下调，在结直肠癌中下调。CLCA2在膀胱癌和黑色素瘤转移癌转移期间差异表达。在套细胞淋巴瘤中存在CLCA2拷贝数损失GruberandPauli,1999；Bustinetal.,2001；Lietal.,2004；Balakrishnanetal.,2006；Rikeretal.,2008；Waliaetal.,2012；Matinetal.,2014；Ramenaetal.,2016。DSG1在角化囊性牙源性肿瘤中过度表达，并且在口腔上皮内肿瘤中表达率高Aizawaetal.,2014；Heikinheimoetal.,2015。DSG1表达在棘层松解性鳞状细胞癌中丢失，在软骨肉瘤、口腔鳞状细胞癌和肺癌中表达下降Xinetal.,2014；Saaberetal.,2015；Galoianetal.,2015；Jurcicetal.,2015。DSG1表达受GRHL1调控，并且用标准化学皮肤癌方案治疗的GRHL1阴性小鼠发生较少的乳头状瘤，但发生更多的鳞状细胞癌Mlackietal.,2014。DSG1是Rhoda和GEFBcr的下游靶标，是一种角质细胞分化标志物Dubashetal.,2013。KLK5裂解可能与口腔鳞状细胞癌转移灶形成有关的DSG1。DSG1水平降低可能与胰腺癌侵袭有关Ramanietal.,2008；Jiangetal.,2011。DSG1染色阴性与肛门癌特异性存活改善有关，阳性染色与肿瘤体积大和淋巴结转移相关。DSG1的损失与头颈鳞状细胞癌的预后不良有关Wongetal.,2008；Myklebustetal.,2012。对抗DSG1的自身抗体可以在副肿瘤性天疱疮中检测到Seishimaetal.,2004。食管鳞状细胞癌中DSG3表达被证明与组织学分级高度相关，对食管鳞状细胞癌的生存期有影响，DSG3表达阴性表示生存较差。因此，DSG3可能参与食管鳞状细胞癌的进展，并可作为一种预后标志物Fangetal.,2014。在原发性肺肿瘤中，DSG3和DSG2较高表达显示与鳞状细胞肺癌的诊断相关，而DSG3的较低表达显示与肿瘤级别较高显著相关。因此，DSG3可作为鳞状细胞肺癌的潜在诊断标志物和肺癌的潜在分化标志物Saaberetal.,2015。DSG3被描述为是一种在切除胰腺导管腺癌中的阴性预后生物标志物，因为DSG3高表达与总体生存率差和肿瘤特异性生存率差相关。因此，DSG3及其下游信号通路可能是表达DSG3的胰腺导管腺癌中可能的治疗靶点Ormannsetal.,2015。DSP表达下降与几种癌症包括乳腺癌、肺癌和宫颈癌的肿瘤进展相关Schmitt-Graeffetal.,2007；Daviesetal.,1999；Yangetal.,2012b。DSP的表达通过抑制Wntβ-连环蛋白信号通路而显著抑制肺癌细胞的细胞增殖、锚定非依赖性生长、迁移和侵袭Yangetal.,2012b。DST可能与乳腺癌转移有关Sunetal.,2006。针对DST的自身抗体可在淋巴细胞性白血病和滤泡性淋巴瘤中发现到Aisaetal.,2005；Taintoretal.,2007。在鼻咽癌中，DST在5-8F细胞高致瘤和转移能力中相较于6-10B细胞具备致瘤能力但无转移能力上调Fangetal.,2005。DST在头颈鳞状细胞癌中高表达Linetal.,2004。在副肿瘤性天疱疮中存在针对DST的自身抗体，这与肿瘤相关YongandTey,2013；Wangetal.,2005；PreiszandKarpati,2007；ZhuandZhang,2007。前列腺癌中的DST表达与疾病进展呈强烈逆相关Vanajaetal.,2003。抗DST自身抗体是黑色素瘤诊断的一个有前景的标志物Shimboetal.,2010。DST可发现于恶病质癌症患者的尿液Skipworthetal.,2010。DST在肺腺癌和鳞状细胞癌中差异表达McDoniels-Silversetal.,2002。DST明显上调，伴随浸润性细胞生长Herold-Mendeetal.,2001。EMC7编码ER膜蛋白复合物亚基7，位于染色体15q14上RefSeq,2002。EMC7可能是癌症中新型的药物靶标和诊断生物标志物Delgadoetal.,2014。在平阳霉素抑制舌鳞状细胞癌细胞系中，EMC7下调Zhengetal.,2010。ESRP2编码上皮细胞型特异性剪接调节因子RefSeq,2002。ESRP2抑制不同癌症类型包括肺癌和乳腺癌细胞的癌细胞运动。ESRP2在侵袭性前缘被TGF-β下调，导致上皮-间质转化相关转录因子的表达增加Gemmilletal.,2011；Horiguchietal.,2012；Ishiietal.,2014。F2RL1的PH结构域结合基序中的突变足以降低乳腺肿瘤生长Bar-Shavitetal.,2016。F2RL1在胃癌中过度表达，与患者的总体生存率呈负相关Seddaetal.,2014。胰蛋白酶是由肥大细胞释放的血管生成的介质，其活化F2RL1，导致癌细胞增殖、侵袭和转移Marechetal.,2014；Ammendolaetal.,2014。F2RL1受癌症中差异表达和突变的基因影响D'Astietal.,2014。F2RL1参与癌症进展、侵袭和转移Wojtukiewiczetal.,2015；Cantoetal.,2012；LimaandMonteiro,2013；Gieseleretal.,2013。F2RL1在腺癌、黑色素瘤、骨肉瘤、成胶质细胞瘤、脑膜瘤、白血病和鳞状细胞癌中表达ElsteandPetersen,2010。F2RL1调节作为TGF-β1型受体ALK5的表达。F2RL1启动MAP激酶Oikonomopoulouetal.,2010；Witteetal.,2016。组织因子和整合素的上调介导促进转移的F2RL1信号传导Kasthurietal.,2009；Rufetal.,2011；KocaturkandVersteeg,2012；Ruf,2012；KocaturkandVersteeg,2013。胰蛋白酶和PAR2形成促进增殖、侵袭和转移的自分泌环。胰蛋白酶刺激可能通过表皮生长因子受体的MMP-和PAR2-依赖性启动导致MAPK-ERK通路启动Soreideetal.,2006。FAM160A1编码具有序列相似性160成员A1的家族，并且位于染色体4q31.3上RefSeq,2002。DAM131与前列腺癌雌激素相关受体β结合后，FAM160A1表达发生改变Luetal.,2015b。前列腺癌中存在NFκB-FAM160A1基因融合产物Teles,Ietal.,2015。与良性肿瘤相比，FAM160A1在卵巢癌中上调Lietal.,2012a。FAM160A1缺失可在家族性和早期发病的乳腺癌中发现Krepischietal.,2012。FAM160A1在结直肠癌中下调Lietal.,2012b。FANCE与食管鳞状细胞癌风险相关Lietal.,2013。罕见的FANCE下调可在头颈鳞状细胞癌中观察到Wreesmannetal.,2007。Chk1介导了DNA交联后的FANCE的磷酸化Wangetal.,2007。家族性结直肠癌显示杂合基因型FANCE。范康尼氏贫血症DNA损伤修复可能与结直肠癌的遗传性体质有关。得失位突变可能参与遗传性食管鳞状细胞癌。在一个乳腺癌家族中发现了FANCE的错义变体Akbarietal.,2011；Sealetal.,2003；Esteban-Juradoetal.,2016。FANCE参与顺铂敏感性的调节Taniguchietal.,2003。FAT1被描述为在头颈鳞状细胞癌中明显突变，在宫颈腺癌、膀胱癌、早期T细胞前体急性淋巴细胞白血病、氟达拉滨难治慢性淋巴细胞性白血病、胶质母细胞瘤和结直肠癌中频繁突变，在食管鳞状细胞癌中突变Gaoetal.,2014；Neumannetal.,2013；Morrisetal.,2013；Messinaetal.,2014；Mountziosetal.,2014；Cazieretal.,2014；Chungetal.,2015。FAT1被描述为在口腔癌中被压抑，在浸润性乳腺癌中优先下调Katoh,2012。FAT1被描述为在白血病中上调，其与前B急性淋巴细胞白血病的不良预后相关Katoh,2012。FAT1被证明在胰腺癌和肝细胞癌中上调Vallettaetal.,2014；Wojtalewiczetal.,2014。FAT1被描述可通过河马信号传导的启动来抑制肿瘤生长，并通过肌动蛋白聚合诱导来促进肿瘤转移Katoh,2012。FAT1被证明是皮肤鳞状细胞癌的一种候选癌症驱动基因Pickeringetal.,2014。FAT1被描述为与Wnt信号传导和肿瘤发生相关的一种肿瘤抑制因子Morrisetal.,2013。FAT3显示，当雄激素受体沉寂后，在紫杉醇耐药卵巢癌细胞系中下调，导致在这些细胞系中对紫杉醇敏感增加。因此，FAT3可能是与紫杉醇抗性相关的候选基因Sunetal.,2015b。FAT3被证明在食管鳞状细胞癌中突变，导致河马信号传导途径的失调Gaoetal.,2014。FAT3被证明在早期T细胞前体急性淋巴细胞白血病中周期性突变Neumannetal.,2013。FAT3被描述为一种具有脑膜脑膜瘤特定特征的基因，因此，与这种亚型的良性脑膜瘤肿瘤发生有关Fevre-Montangeetal.,2009。FAT3被描述为一种肿瘤抑制因子，对发育不良细胞的肺癌发展有抑制作用RohrbeckandBorlak,2009。FHAD1在参与氧化应激反应的NFE2敲减后下调Williamsetal.,2016。FHAD1的CpG甲基化可用作转移性致死性前列腺癌的生物标志物Zhaoetal.,2017。FHAD1在食管鳞状细胞癌中下调，并可能有助于促进顺铂化学耐药Tsutsuietal.,2015。FHAD1可能是乳腺癌的肿瘤抑制基因Iornsetal.,2012。G3BP1编码G3BP应激颗粒装配因子1，其是DNA解链酶之一，其优选部分解链的3'末端底物，并且还可以以ATP依赖方式解链部分RNADNA和RNARNA双链体RefSeq,2002。G3BP1可用作HER2+乳腺癌药物反应的生物标志物Chienetal.,2016。miR-193a-3p，其在体外和体内抑制肺癌的进展和转移，下调G3BP1Dengetal.,2015。G3BP1是白藜芦醇的直接靶标。G3BP1的耗竭减少白藜芦醇诱导的p53表达和细胞凋亡。G3BP1是通过与USP10p53特异性去泛素化酶相互作用的p53负调节因子Oietal.,2015。G3BP1由MYCNOS募集到MYCN的启动子区域以调节其表达。G3BP1负调节PMP22以增加乳腺癌的增殖Winslowetal.,2013；Vadieetal.,2015。G3BP1可能是由癌症识别肽和促凋亡肽组成的双功能肽的靶点Meschenmoseretal.,2013。晚期口腔鳞状细胞癌对G3BP1敲减敏感，导致凋亡增加Xuetal.,2013。G3BP1在乳腺癌、口腔鳞状细胞癌、结肠癌、胰腺癌、肝细胞癌和胃癌中上调，并与患者预后、肿瘤大小、血管浸润、T分类、淋巴结转移、TNM分期及总体生存率降低有关Loetal.,2012；Winslowetal.,2013；Minetal.,2015；Douetal.,2016。Y-盒结合蛋白1与G3BP1mRNA的5'UTR结合以调节G3BP1应激颗粒成核剂应用于颗粒组装的可用性。YB-1或G3BP1的下调导致应激颗粒形成和肿瘤侵袭下降Wardetal.,2011；Annibaldietal.,2011；Somasekharanetal.,2015。G3BP1控制H+-ATP酶的活性和β-F1-ATP酶mRNA的翻译WillersandCuezva,2011。G3BP1与电离辐射前后的早幼粒细胞白血病核体共定位Liuetal.,2010。表没食子儿茶素没食子酸酯是绿茶的主要化合物，通过与G3BP1结合抑制肺部肿瘤发生。G3BP1表达受洛伐他汀影响Klawitteretal.,2010；Shimetal.,2010。G3BP1通过上调Slug参与癌细胞生长、凋亡、运动、迁移、侵袭和转移。G3BP1的敲减可降低Slug表达，增加上皮标志物E-钙黏蛋白。乳腺癌中G3BP1的上调通过Smad信号通路启动上皮-间质转化。G3BP1参与Ras和NF-κB信号传导、泛素蛋白酶体途径和RNA加工Frenchetal.,2002；Zhangetal.,2015；Douetal.,2016。G3BP1强迫表达促进肝细胞癌细胞迁移Douetal.,2016。GAR1能启动p53Zhangetal.,2012。GAR1参与端粒酶复合物Zhuetal.,2004；Rashidetal.,2006；Tomlinsonetal.,2008；Pigulloetal.,2009；LowandTergaonkar,2013；Heidenreichetal.,2014。GAR1对细胞活力很重要Lubbenetal.,1995。ITGB4与前列腺癌、胃癌、乳腺癌、口腔鳞状细胞癌和卵巢癌相关，并且被证明在胰腺导管腺癌中上调Chenetal.,2014；Xinetal.,2014；Zuboretal.,2015；Masugietal.,2015；Gaoetal.,2015；Kawakamietal.,2015。ITGB4也称为CD104往往与α6亚基关联，并可能在几种浸润性癌症的生物学中发挥重要作用，如食管鳞状细胞癌、膀胱癌和卵巢癌Kwonetal.,2013；Pereiraetal.,2014；Chenetal.,2014。ITGB4单核苷酸多态性似乎影响肿瘤的侵袭性和存活，并可能对乳腺癌患者具有预后价值Brendleetal.,2008。KDM5B编码蛋白JARID1B，这是一种赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶，其能够通过使组蛋白H3的赖氨酸4去甲基化来抑制某些肿瘤抑制基因RefSeq,2002。作为表观遗传因子，KDM5B通过抑制p53表达为人OSCC、头颈鳞状细胞癌HNSCC、乳腺癌和肺癌的增殖、迁移和侵袭提供支持Shenetal.,2015；Tangetal.,2015a；ZhaoandLiu,2015；Linetal.,2015。另外，称为JARID1B的KDM5B通过PTENAKT信号转导在各种肿瘤类型中促进转移上皮-间质转化Tangetal.,2015a。KLHL21在肝细胞癌中上调，可用作生物临床标志物Shietal.,2016。KLHL21是IKKβ的负调节因子。KLHL21表达在促炎症刺激后在巨噬细胞中下调。KLHL21过度表达抑制IKKβ启动和IκBα降解Meietal.,2016。KLHL21被异常基因融合转录因子ASPSCR1-TFE3过度表达，ASPSCR1-TFE3在两个不同的实体：肺泡软组织肉瘤和肾细胞癌中发现Kobosetal.,2013。KLHL21可能参与癌症发生Martinezetal.,2010。KLHL21是细胞分裂所必需的，并且调节染色体乘客复合体在细胞分裂后期从染色体转移到主轴中区。它与基于Cullin3的E3泛素连接酶相互作用，并直接与AuroraB结合，导致其泛素化Maerkietal.,2009。KLHL21通过靶向作用于IKKβ来负调节TNFα启动的NF-κB信号传导Meietal.,2016。KLK6编码激肽释放酶相关肽酶6，其是肽酶S1家族丝氨酸蛋白酶的激肽释放酶亚族的成员。越来越多的证据表明，许多激肽释放酶涉及致癌作用，一些有可能成为癌症和其他疾病的新型生物标志物。这种蛋白酶的表达受类固醇激素调节，并且可能在多种人类癌症和来自银屑病患者的血清中升高。编码的蛋白酶可能参与淀粉样蛋白前体蛋白和α-突触核蛋白的裂解，从而分别将这种蛋白酶牵涉到阿尔茨海默氏症和帕金森病中。该基因位于染色体19上的基因簇RefSeq,2002。KLK6可被p53诱导，其表达增加胃癌的自噬作用和耐药性Kimetal.,2016。KLK6下调与GNA13表达增加有关，其与良性乳腺肿瘤的侵袭性相关Teoetal.,2016。KLK6能够上调和下调几种可能影响细胞周期、MYC、MAPK和其他信号通路的miRNASidiropoulosetal.,2016。KLK6属于与转移性结直肠癌中帕尼单抗耐药相关的状况Barryetal.,2016。KLK6与脊髓损伤、肿瘤细胞转移和α突触核蛋白聚集疾病如帕金森病后发生的轴突生长调节相关Xietal.,2015。KLK6在高侵袭性PC3前列腺癌和卵巢癌中过度表达，在宫颈癌前期病变中失调节Tamiretal.,2014；HwangandLindholm,2015。KLK6可用作多种实体包括肝细胞癌、乳腺癌、结肠癌、胃肠癌和星形细胞瘤的生物标志物Vakrakouetal.,2014；Yuetal.,2015b；Grinetal.,2015；Schraderetal.,2015；Druckeretal.,2015；Mangeetal.,2016。KLK6与晚期浆液性卵巢癌的总生存率相关，其表达可能与其他临床参数相关Kolinetal.,2014；Dornetal.,2015；Yangetal.,2016a；Leungetal.,2016；Ahmedetal.,2016。CD34在头颈鳞状细胞癌中的表达与细胞周期进程相关，其敲减上调KRT1表达Ettletal.,2016。在桔梗皂苷D治疗后，KRT1在HepG2细胞中下调Luetal.,2015a。来自鲍温病浅表侵袭性癌的透明细胞灶的免疫组织化学染色检测显示KRT1阴性Misagoetal.,2016。miR-944通过上调p53和削弱ERK信号传导诱导KRT1表达Kimetal.,2015。KRT1表达在早期和晚期鳞状细胞癌中上调Tangetal.,2015b。核降解下调KRT1表达Naeemetal.,2015。KRT1表达可能是分化状态的标志物。其可与NMP-52和AFP表达一起用于检测肝细胞癌Attallahetal.,2015；Brunaetal.,2017。KRT1在二十二碳六烯酸治疗后上调，已知其可降低乳腺癌侵袭Blanckaertetal.,2015。来自甲细胞癌的增殖嗜碱性细胞未能表达KRT1Wangetal.,2015a。KRT1的上调与Notch1受体刺激间接相关Vliet-Greggetal.,2015。S100A7下调KRT1Lietal.,2015。KRT1的表达与口腔鳞状细胞癌中p21和hsp70的表达有关。KRT1缺失与Klf4缺乏相关，Klf4是抑制细胞增殖并促进分化的转录因子Paparellaetal.,2015；Frohwitteretal.,2016。KRT13编码作为角蛋白基因家族成员的角蛋白13。维他命D改变KRT13表达Narayanan,2006。CK13的免疫染色在黏液表皮样癌的表皮样组分中呈阳性，在管状腺瘤和下颌腺产生的溶瘤癌中呈阴性Muramatsuetal.,2003；Matsuzakaetal.,2004；doPradoetal.,2007。α6β4整合素的异常表达上调KRT13，这是皮肤鳞状细胞癌发展的早期事件Tennenbaumetal.,1996。KRT13可用作宫颈上皮内瘤变的生物标志物。KRT13损失是肿瘤分级和转移性尿路上皮细胞癌分期的标志物。KRT13表达是皮肤癌进展的标志物Slagaetal.,1995；Southgateetal.,1999；Duggan,2002；Baaketal.,2006。KRT13表达在口腔癌干细胞和口腔鳞状细胞癌中下调MorganandSu,1994；Sinhaetal.,2013。KRT14在各种鳞状细胞癌如食管癌、肺癌、喉癌、宫颈癌以及腺瘤牙源性肿瘤中高度表达。但是，在膀胱小细胞癌中不存在，在肺腺癌、胃腺癌、结直肠腺癌、肝细胞癌、胰腺导管腺癌、乳腺浸润性导管癌、甲状腺乳头状癌和子宫内膜样腺癌中较弱Xueetal.,2010；Terada,2012；Vascaetal.,2014；Hammametal.,2014；Shruthietal.,2014。在膀胱癌中，KRT14表达与较差生存期强烈相关Volkmeretal.,2012。MCF-7乳腺癌细胞长时间暴露于乙醇会上调KRT15，这是一种恶性肿瘤相关基因Gelfandetal.,2017。具有侵袭性生长的基底细胞癌显示KRT15阴性表达Ziarietal.,2015。KRT15可用于区分螺旋腺瘤和圆柱瘤Sellheyer,2015。KRT15在膀胱癌发生中依次上调Chuangetal.,2014。在皮肤癌中下调的SIRT2抑制作为上皮干细胞标志物的KRT15表达Wangetal.,2014b。KRT15是一种毛囊干细胞标志物Bongiovannietal.,2014；Kobaetal.,2015；Narisawaetal.,2015。与良性眼表面鳞状肿瘤相比，KRT15是在恶性肿瘤中更强烈地表达的一种未分化基底细胞标志物Nagataetal.,2014。球形体选定的表皮鳞状细胞癌具有丰富的KRT15表达Adhikaryetal.,2013。KRT15在尿路上皮癌中上调Taietal.,2013。与头颈部肿瘤相关的光化性角化病的KRT15染色在7％的病例中和36％的腺样囊性癌中呈阳性。与硬皮病形式基底细胞癌和微囊性附件癌相比，结缔组织增生性毛发上皮瘤的染色较高Sabetietal.,2013；EvangelistaandNorth,2015；Northetal.,2015；Solusetal.,2016。KRT15上调影响非小细胞肺癌的总生存期，可用作NSCLC鉴别诊断的标志物Gomez-Moralesetal.,2013；Boyeroetal.,2013。KRT15受p53和ER调节Lionetal.,2013。KRT16过度表达发现于基底样乳腺癌细胞系以及原位癌中。其他人未发现非复发性成釉细胞瘤和复发性成釉细胞瘤之间KRT16免疫组化表达的显著差异Joosseetal.,2012；Ida-Yonemochietal.,2012；Safadietal.,2016。此外，硅片分析表明了转移性乳腺癌中KRT16表达与较短无复发生存之间相关Joosseetal.,2012。KRT5被证明年轻女性的乳腺癌中上调Johnsonetal.,2015。KRT5被证明与年轻女性乳腺癌的较差无病生存以及激素受体阳性乳腺癌绝经前患者的临床结果相关Johnsonetal.,2015；Satoetal.,2014。KRT5被证明通过乳腺癌细胞系HCC1937和T47D中的肿瘤抑制因子BRCA1调节Gorskietal.,2010。KRT5被证明在恶性胸膜间皮瘤中失调Melaiuetal.,2015。KRT5被描述为恶性间皮瘤的诊断性间皮标志物ArifandHusain,2015。KRT5被证明与子宫内膜癌进展有关Zhaoetal.,2013。KRT5被证明在疣状癌患者的浸润性肿瘤区域下调Schumannetal.,2012。KRT5被证明属于四个蛋白质系列的一部分，与正常组织样本相比，其在结直肠癌活检物中差异表达Yangetal.,2012a。KRT5和四个蛋白系列的其他三个蛋白被描述为新型标志物以及结直肠癌治疗的潜在标靶Yangetal.,2012a。KRT5被描述为与基底细胞癌有关Depiantoetal.,2010。KRT5被描述为确定尿路上皮癌干细胞的候选基因HatinaandSchulz,2012。KRT6A被描述为七基因特征的一部分，可以用作预后模型来预测手术后接受辅助化疗的三阴性乳腺癌患者的远期无复发生存Parketal.,2015b。KRT6A被证明在瘤牛角癌中和胃癌中上调El-Rifaietal.,2002；Koringaetal.,2013。KRT6A显示在两例具有外骨骼黏液样软骨肉瘤形态学和免疫组织化学特征的外阴肉瘤中下调Dotlicetal.,2014。KRT6A表达显示在口腔鳞状细胞癌中改变Chanthammachatetal.,2013。KRT6A显示与伤口修复期间原癌基因Src激酶活性的负调节和皮肤角质形成细胞的迁移潜能有关。这在癌症等相关背景下可能很重要RottyandCoulombe,2012。KRT6A显示标记可产生类似于人类正常样乳腺癌的独特乳腺肿瘤模型的乳腺双电位祖细胞Buetal.,2011。KRT6A被描述为25基因转录网络特征的重要组成部分，可用于区分肺腺癌和鳞状细胞癌Changetal.,2011。KRT6B被证明是在食管癌细胞系KYSE170中下调基因的候选物Kanetal.,2006。KRT6B被证明在肾细胞癌、散发性牙源性角化囊性瘤和瘤牛角癌中上调Koringaetal.,2013；Huetal.,2015；Heikinheimoetal.,2007。KRT6B功能丧失显示抑制notch1的表达，并诱导体外肾细胞癌细胞死亡。因此，KRT6B与notch1的相互作用被描述为促进肾细胞癌进展Huetal.,2015。KRT6B被描述为基底样乳腺癌相关细胞角蛋白，其表达在细胞系HCC1187和HCC70中基底样样肿瘤相关GABRP表达降低后减少Sizemoreetal.,2014。ERK12选择性抑制还被证明可导致基底样细胞角蛋白如KRT6B的表达降低，并且在基底样乳腺癌中迁移降低Sizemoreetal.,2014。因此，GABRP-ERK12-细胞角蛋白轴参与维持基底样乳腺癌的迁移表型Sizemoreetal.,2014。KRT6B显示与伤口修复期间原癌基因Src激酶活性的负调节和皮肤角质形成细胞的迁移潜能有关。这在癌症等相关背景下可能很重要RottyandCoulombe,2012。KRT6B被描述为25基因转录网络特征的重要组成部分，可用于区分肺腺癌和鳞状细胞癌Changetal.,2011。KRT6B被证明在苯并a芘诱导人永生化口腔上皮细胞的肿瘤发生期间差异性表达Lietal.,2008。KRT6C被描述为25基因转录网络特征的重要组成部分，可用于区分肺腺癌和鳞状细胞癌Changetal.,2011。KRT75编码角蛋白75，其是染色体12长臂上聚集的II型角蛋白家族的成员。编码的蛋白质在头发和指甲形成中起重要作用。该基因的变异与假性毛囊炎PFB和毛发松动征候群LAHS等毛发疾病有关RefSeq,2002。与亲本细胞系相比，KRT75在体内传代和再衍生的前列腺细胞系中下调Sivanathanetal.,2014。KRT75在甲母质瘤中表达，可能表明对甲床和甲峡有分化作用Perrinetal.,2011。KRT75在21T乳腺细胞中下调Xuetal.,2010。蛋白酶体抑制剂和地塞米松可改变KRT75的表达Kinyamuetal.,2008。LAP3的抑制被证明可通过fascin和MMP-29的下调导致卵巢癌细胞系ES-2中侵袭抑制。因此，LAP3可以充当潜在的抗转移治疗靶标Wangetal.,2015b。LAP3的高表达被证明与恶性肿瘤的分级和胶质瘤患者的预后不良相关Heetal.,2015。LAP3被证明可通过调节细胞生长、迁移和侵袭而促进神经胶质瘤的进展，因而可能是一个新的预测因子Heetal.,2015。在高微卫星不稳定性的胃癌和结直肠癌中检测到涉及氨基酸代谢的基因包括LAP3的移码突变Ohetal.,2014。LAP3被证明在肝细胞癌、食管鳞状细胞癌和前列腺癌中上调Zhangetal.,2014a；Tianetal.,2014；Lexanderetal.,2005。LAP3被证明通过调节细胞周期和晚期细胞迁移的G1S期检查点，以促进肝癌细胞增殖Tianetal.,2014。LAP3的表达进一步显示与肝细胞癌的预后和恶性发展相关Tianetal.,2014。食管鳞状细胞癌细胞系ECA109中LAP3的沉寂被证明可降低细胞增殖和集落形成，而LAP3敲减导致细胞周期停滞Zhangetal.,2014a。食管鳞状细胞癌细胞系TE1中LAP3过度表达被证明有利于细胞增殖和侵袭Zhangetal.,2014a。因此，LAP3被证明在食管鳞状细胞癌的恶性发展中发挥作用Zhangetal.,2014a。高水平的LGALS7与癌症浸润性、生长和转移增加的乳腺癌的侵袭性表型相关Grossetetal.,2016。LGALS7在结直肠癌患者血清中差异表达，而CRC肿瘤免疫组织化学染色中LGALS7呈阴性Limetal.,2016。LGALS7在前列腺癌、宫颈癌和外阴鳞状细胞癌中下调，并与晚期临床分期、分化程度差和区域淋巴结转移相关。再次表达导致凋亡增加。启动子甲基化增加与VSCC的晚期临床分期、分化程度差和区域淋巴结转移相关Labrieetal.,2015；Jiangetal.,2015；Higareda-Almarazetal.,2016。细胞质表达的LGALS7抑制p53并增加乳腺癌的化学耐药性Grossetetal.,2014。LGALS7在正常卵巢组织中不表达而在上皮性卵巢癌中表达。表达在高级别和转移性肿瘤中更为常见，与总生存相关。LGALS7表达由突变型p53诱导Kimetal.,2013；Labrieetal.,2014。LGALS7可用作转移性皮肤黑色素瘤的生物标志物。它也与头颈鳞状细胞癌和基底细胞癌的临床参数相关Timaretal.,2010；Cadaetal.,2009。LGALS7与乳腺癌发病率有关Tangetal.,2008。LGALS7表达可以由p53诱导并能够促凋亡Uedaetal.,2004。LGALS7B能增强HER2阳性乳腺癌的侵袭性Grossetetal.,2016。LGALS7B调节参与凋亡、组织形态发生、代谢、转运、趋化因子活性和免疫应答的分子Higareda-Almarazetal.,2016。LGALS7B在宫颈癌中下调。与低Gal-1表达相关的高LGALS7B表达与更好的预后相关Higareda-Almarazetal.,2016。LGALS7B在外阴鳞状细胞癌中高甲基化Jiangetal.,2015。前列腺癌中LGALS7B再表达增强对依托泊苷和顺铂的化学敏感性Labrieetal.,2015。LGALS7B在外阴鳞状细胞癌、前列腺癌和结直肠癌中下调。LGALS7B下调与晚期临床分期、肿瘤分化不良和区域淋巴结转移有关Labrieetal.,2015；Limetal.,2016；Jiangetal.,2015。细胞因子LGALS7B抑制dox诱导的PARP-1裂解，导致抑制p53启动并降低乳腺癌中的p21和CDKN1A表达Grossetetal.,2014。LGALS7B上调细胞凋亡并抑制IL-2和IFN-γ表达Yamaguchietal.,2013。LGALS7B在卵巢癌中过度表达，与较大年龄、高死亡率、肿瘤体积增加和生存差相关Kimetal.,2013；Labrieetal.,2014。LGALS7B的免疫组织化学染色可用于区分唾液腺肿瘤类型Remmelinketal.,2011。LGALS7B在头颈部基底细胞癌中下调。在头颈鳞状细胞癌中，LGALS7B显示不同的表达模式，并且不同的表达水平与角质化和分化相关Cadaetal.,2009。MALL可用于分类肺癌亚型Watanabeetal.,2010。MALL可能是前列腺癌中的转移抑制基因Yietal.,2009。MALLmRNA和蛋白表达在结肠癌患者中降低，与血管浸润、疾病复发、转移或死亡有关。MALL损失与总生存率和无病生存率下降有关。MALL过度表达抑制细胞增殖且抑制细胞系中的迁移Fanetal.,2011；Kimetal.,2008a；Wangetal.,2016c。MALL可在前列腺癌细胞系分泌的前列腺体上发现，其与小窝蛋白1相互作用Llorenteetal.,2004。MALL在非小细胞肺癌和宫颈鳞状细胞癌中下调。它在胶质瘤细胞中差异表达Aietal.,2003；Hattaetal.,2004；Kettunenetal.,2004。MCM4表达与上调的碳酸酐IX相关，碳酸酐IX是一种跨膜糖蛋白，其与几种实体包括食管癌的生存和癌症进展有关Huberetal.,2015。Has-miR-615-3p可能通过调节MCM4牵涉鼻咽癌Chenetal.,2015。MCM4可能在膀胱癌发展中发挥作用Zekrietal.,2015。p53获取功能的突变增加MCM4在乳腺癌中的表达Polotskaiaetal.,2015。MCM4在人类皮肤癌中有突变，显示降低DNA解旋酶的活性降低IshimiandIrie,2015。MCM4过度表达只与乳腺癌较短生存弱相关。MCM复合体所有六个部分的过度表达与较短生存强烈相关Kwoketal.,2015。MCM4在肺腺癌和喉鳞状细胞癌中差异表达Lianetal.,2013；Zhangetal.,2014b。MCM4在宫颈癌中显著过度表达Dasetal.,2013；Dasetal.,2015。MCM4可用作结直肠癌的一种生物标志物Fijnemanetal.,2012。抗酶抑制剂抑制ODC1的泛素非依赖性降解，导致多胺形成加速，引发胃癌、乳腺癌、肝细胞癌和食管鳞状细胞癌的发展Qiuetal.,2016。吡罗昔康抑制参与非黑色素瘤皮肤癌发生的ODC1依赖性多胺产生Campioneetal.,2015。ODC1调节对细胞分裂调控、分化、成熟和凋亡重要的腐胺Ramanietal.,2014；ZdrojewiczandLachowski,2014。ODC1是Myc和MYCN靶基因，ODC1高表达与神经母细胞瘤的无事件生存降低有关Funakoshi-Tago,2012；Salettaetal.,2014。阻断ODC1可用于结直肠癌的化学预防治疗Zhouetal.,2012。PARP9也称为ARTD9编码聚ADP-核糖聚合酶家族成员9，位于染色体3q21.1上RefSeq,2002。DTX3L与ARTD8和PARP9形成复合体，通过抑制肿瘤抑制因子IRF1，促进转移性前列腺癌细胞的增殖、化学耐药性和存活Bachmannetal.,2014。PARP9抑制弥漫性大B细胞淋巴瘤中的IFN-γ-STAT1-IRF1-p53信号传导并启动原癌基因IRF2和BCL-6的表达。这导致DLBCL的增殖、存活和化学耐药性Camiciaetal.,2013。PARP9表达为IFN-γ诱导型Juszczynskietal.,2006。PARP9可能是弥漫性大B细胞淋巴瘤中的药物靶点。PARP9是高危化学耐药性DLBCL中的致癌存活因子Bachmannetal.,2014；Aguiaretal.,2005；Camiciaetal.,2015。PKP1被证明在前列腺癌和食管腺癌中下调Kazetal.,2012；Yangetal.,2015。非肿瘤、前列腺BPH-1细胞系中PKP1的敲减导致细胞凋亡减少和基因如，前列腺癌相关SPOCK1基因差异表达Yangetal.,2015。总体来说，PKP1和SPOCK1表达改变似乎是前列腺癌中的频繁和严重事件，表明PKP1具有肿瘤抑制功能Yangetal.,2015。PKP1表达下降被证明与口腔鳞状细胞癌中显著更短的至远处转移发生时间有关Harrisetal.,2015。通过启动子甲基化导致的PKP1损失被描述为与Barrett食管进展为食管腺癌相关Kazetal.,2012。PKP1被证明在非小细胞肺癌中上调，可能是区分鳞状细胞癌样本的良好标志物Sanchez-Palenciaetal.,2011。PKP1被证明在分化良好的脂肪肉瘤细胞系GOT3中上调Perssonetal.,2008。PKP1表达下降被描述为可促进头颈鳞状细胞癌的活动性增加Sobolik-Delmaireetal.,2007。PKP1损失被证明与宫颈癌发生有关Schmitt-Graeffetal.,2007。PKP1被证明与口咽鳞状细胞癌患者的局部复发或转移以及不良预后有关Papagerakisetal.,2003。PLEC在结直肠腺癌、头颈鳞状细胞癌和胰腺癌中过度表达Leeetal.,2004；Katadaetal.,2012；Bauschetal.,2011。周斑蛋白在T24CDDPR膀胱癌细胞中降低Taokaetal.,2015。与健康组织相比，膀胱癌的PPL染色较低。PPL损失与病理分期和存活有关Matsumotoetal.,2014。PPL与上皮样肿瘤细胞相关Kohnetal.,2014。EVPL、周斑蛋白和外皮蛋白阴性小鼠显示皮肤癌抗性表型Cipolatetal.,2014；Natsugaetal.,2015；Natsugaetal.,2016。PPL在三阴性乳腺癌中高度表达Choietal.,2013。周斑蛋白由于超甲基化在食管鳞状细胞癌中下调。ESCC中PPL敲减与细胞移动和附着减少有关Otsuboetal.,2015；Tonoikeetal.,2011。副肿瘤性天疱疮显示具有对抗PPL的自身抗体YongandTey,2013；Lietal.,2009；Probstetal.,2009；Zimmermannetal.,2010。PRKDC是子宫内膜异位症相关卵巢癌和乳腺癌中常见的突变基因Eretal.,2016；Wheleretal.,2015。在结直肠癌中，与正常组织相比，PRKDC在癌组织中上调。PRKDC高表达的患者表现出较差的总生存期Sunetal.,2016。PRNP编码膜糖基磷脂酰肌醇锚定的糖蛋白，其往往聚集成棒状结构并且包含五个八肽的串联重复序列的高度不稳定区域。重复区域以及该基因其他区域的突变与各种朊病毒疾病有关。该基因已经发现有重迭开放阅读框，其编码较小的、结构不相关的蛋白质AltPrpRefSeq,2002。虽然其生理作用尚未完全确定，但PRNP参与神经干细胞的自我更新、多能基因表达、增殖和分化。PNRP在包括胶质母细胞瘤、乳腺癌、前列腺癌和结直肠癌的人肿瘤中起作用Yangetal.,2016b；Corsaroetal.,2016。在结直肠癌中，PRNP已被证明可促进上皮-间质转化Duetal.,2013。PNRP与MGr1-Ag37LRP联合的过度表达可预测胃癌预后差Zhouetal.,2014。PNRP表达与细胞的氧化还原状态有关，可能参与抗氧化防御。PNRP沉寂被证明可使癌细胞对乳腺癌和结肠癌的抗癌药物敏感Saueretal.,1999；Meslinetal.,2007；Parketal.,2015a；Yunetal.,2016。PROM2在肺腺癌中特异性上调Baoetal.,2016。PROM2在弹力纤维瘤和人前列腺癌中表达。PROM2在低侵袭性前列腺癌中表达较高，在高侵袭性前列腺癌中表达较低Yamazaki,2007；Zhangetal.,2002。PROM2在结肠癌中下调Dengetal.,2013。PROM2表达可用于区分肾嫌色细胞癌和肿瘤细胞瘤Rohanetal.,2006。RIPK4被证明在皮肤鳞状细胞癌中下调Poligoneetal.,2015。RIPK4与舌鳞癌细胞系TCA-8113的迁移和侵袭，弥漫性大B细胞淋巴瘤的生存期以及宫颈鳞状细胞癌总体生存、无病生存、进展和不良预后相关Wangetal.,2014c；Liuetal.,2015；Kimetal.,2008b。RIPK4与家族性胰腺癌相关Lucitoetal.,2007。RIPK4可能是宫颈鳞状细胞癌的一个潜在的诊断性和独立的预后标志物，是舌癌预后和治疗的生物标志物Wangetal.,2014c；Liuetal.,2015。RNASE7表达在皮肤癌中逐渐降低Scolaetal.,2012。RNASE7表达受几种致白血病蛋白酪氨酸激酶的影响Pierceetal.,2008。RPL8表达可受MYC诱导的核抗原和核仁蛋白66的影响Chowdhuryetal.,2014。RPL8可能参与骨肉瘤发生Sunetal.,2015a；YangandZhang,2013。RPL8受MYC启动的NO-66调节Geetal.,2012。RPL8突变与Diamond-Blackfan贫血有关Gazdaetal.,2012。RPL8表达可能与化疗反应有关Salasetal.,2009。RPL8在肝细胞癌中失调节Liuetal.,2007。在黑色素瘤中可发现RPL8的MHCII依赖性表达Swobodaetal.,2007。SERPINB5是很多癌症类型包括乳腺癌、肺癌、头颈癌、口腔癌和前列腺癌诊断一个有价值的分子标志物和预后的预测因子Marionietal.,2009；Lonardoetal.,2010；Sageretal.,1996；Sheng,2004。SERPINB5充当HDAC1活性的内源性调节剂，并与p53肿瘤抑制途径相互作用Maassetal.,2000；Kaplunetal.,2012。SLC25A3在慢性骨髓性白血病中去调节Oehleretal.,2009。SLC25A3的耗竭可消除对BAX的应激诱导线粒体靶向作用Buttneretal.,2011。在紫杉醇诱导的神经性疼痛大鼠中SLC6A11表达降低，这是在用紫杉醇治疗的癌症患者中可观察到的现象Yadavetal.,2015。ALA及其甲酯MAL是用于皮肤癌光动力治疗的前药。它们的摄取由SLC6A11介导Novaketal.,2011；Schultenetal.,2012；Bagloetal.,2013。用丙戊酸钠长期治疗胶质瘤细胞减少SLC6A11mRNA的表达Gaoetal.,2003。SLC6A15被超甲基化从而在结直肠癌中下调，可能是基于粪便测定法的候选生物标志物Kimetal.,2011；Mitchelletal.,2014。SLC7A1在急性骨髓性白血病原始细胞中组成性表达。这些原始细胞在精氨酸循环途径酶中缺乏，导致精氨酸积累和细胞增殖和存活Mussaietal.,2015。SLC7A1在结直肠癌中过度表达，导致精氨酸积累和细胞生长。13号染色体基因过度表达在CRC中很常见Campsetal.,2013；Luetal.,2013。SLC7A1可用作巨噬细胞分化的标志物。在诱导THP1单核细胞分化过程中其表达增加Barillietal.,2011。MCF-7乳腺癌细胞系的生长依赖于L-精氨酸。它表达SLC7A1，SLC7A1敲减导致精氨酸摄取减少、细胞活力降低和凋亡增加Abdelmagidetal.,2011。SLC7A1表达与许多癌症中表达的血红素加氧酶-1的表达强烈相关，促进肿瘤生长和存活Tauberetal.,2010。SLC7A1是肝细胞特异性miR-122的直接靶标，在肝细胞癌中下调。miR-122下调导致SLC7A1上调和细胞内精氨酸水平增加。该途径也是结直肠癌衍生肝转移的重要机制KeddeandAgami,2008；Iinoetal.,2013；Kishikawaetal.,2015。蛋白激酶C的启动导致SLC7A1内化。应激导致SLC7A1的差异性表达Kakudaetal.,1998；Rotmannetal.,2006。SUDS3损失导致细胞形态改变和细胞迁移增加Smithetal.,2012。SUDS3参与胸腺细胞分化Leeetal.,2012。SUDS3可能具有抗肿瘤作用Ramakrishnaetal.,2012。USP17对SUDS3进行去泛素化，导致SUDS3相关HDAC活性在癌症中发生改变Ramakrishnaetal.,2011。SUDS3参与有丝分裂Pondugulaetal.,2009。SUDS3在乳腺癌中表达Silveiraetal.,2009。SUDS3控制染色体分离，并可与p53相互作用Davidetal.,2006。TENM2可能涉及月经初潮的年龄。早期AAM与2型糖尿病、乳腺癌和卵巢癌以及心血管疾病相关，晚期AAM与低骨矿物质密度和心理障碍相关YermachenkoandDvornyk,2016。生活在高度污染地区的肺癌患者中存在DOCK2-TENM2基因融合转录物Yuetal.,2015a。TENM2在大多数恶性间皮瘤细胞中表达Ziegleretal.,2012。TENM2在食管鳞状细胞癌中可能下调Kanetal.,2006。II期结肠癌TGM5的局灶性缺失可能是该实体的驱动因素Brosensetal.,2010。在非小细胞肺癌中发生的TGM5突变在吸烟者和非吸烟者之间显示无差异YongjunZhangetal.,2013；Brodericketal.,2009；Rafnaretal.,2011；Choietal.,2016。前列腺癌中TGFBR3损失也下调了TGM5Sharifietal.,2007。XIRP1在基底样乳腺癌的转移癌中突变Hoadleyetal.,2016。与ER+HER2-乳腺癌相比，三阴性乳腺癌中富含XIRP1启动子基序特征Willisetal.,2015。XIRP1在维他命C治疗后上调，这也降低了癌细胞的生长Marshalletal.,2012；Nagappanetal.,2013。XIRP1在头颈鳞状细胞癌中突变，可能是一种肿瘤抑制基因Leeetal.,2010。XIRP1是一种氧化应激相关基因Baluchamyetal.,2010。ZBED6是IGF2的转录抑制因子，其在结直肠癌中过度表达并促进细胞增殖。ZBED6的敲减影响细胞周期，并导致RKO细胞系的细胞生长增强和HCT116细胞中细胞生长减少。ZBED6是参与Wnt、Hippo、TGF-β、EGFR和PI3K信号传导的几种基因的转录抑制因子，它们都参与结直肠癌发生Markljungetal.,2009；Andersson,2009；Anderssonetal.,2010；Huangetal.,2014；Jiangetal.,2014；Clarketal.,2015；Akhtaretal.,2015。是否能刺激免疫反应取决于是否存在被宿主免疫系统视为异物的抗原。发现肿瘤相关抗原的存在增加了运用宿主免疫系统干预肿瘤生长的可能性。目前，针对癌症免疫治疗，正在探索利用免疫系统的体液和细胞进行免疫的各种机制。细胞免疫反应的特定元素能特异性地识别和破坏肿瘤细胞。从肿瘤浸润细胞群或外周血中分离出的T-细胞表明，这些细胞在癌症的天然免疫防御中发挥了重要作用。特别是CD8阳性T细胞在这种反应中发挥重要作用，TCD8+能识别通常8至10个源自蛋白或位于细胞质的缺损核糖体产物DRIP的氨基酸残基的主要组织兼容性复合体MHC所载的肽中所含的I类分子。人MHC分子也称为人白细胞-抗原HLA。术语“T细胞反应”是指由一种肽在体外或体内诱导的效应子功能的特异性扩散和激活。对于MHCI类限制性细胞毒性T细胞，效应子功能可能为溶解肽脉冲的、肽前体脉冲的或天然肽提呈的靶细胞、分泌细胞因子，优选为肽诱导的干扰素-γ，TNF-α或IL-2，分泌效应分子，优选为肽诱导的颗粒酶或穿孔素，或脱颗粒。本文所用“肽”这一术语，是指一系列氨基酸残基，通常通过相邻氨基酸的α-氨基和羰基之间的肽键来连接。这些肽的长度优选为9个氨基酸，但至短可为8个氨基酸长度，至长可为10、11、12或13个氨基酸或更长，如果为MHC-II类肽时本发明肽的延长变体，至长可为14、15、16、17、18、19或20个氨基酸长度或更长。因此，“肽”这一术语应包括一系列氨基酸残基的盐，通常通过相邻氨基酸的α-氨基和羰基之间的肽键来连接。优选的情况是，盐为肽的药用盐，例如：氯化物或乙酸三氟乙酸盐。必须注意的是，本发明肽的盐与其体内状态的肽基本上不同，因为该不是体内的盐。术语“肽”应也包括“寡肽”。本文使用的术语“寡肽”是指一系列氨基酸残基，通常通过相邻氨基酸的α-氨基和羰基之间的肽键来连接。寡肽的长度对于本发明来说并不十分关键，只要在寡肽中保持正确的表位即可。通常，寡肽长度约小于30个氨基酸残基，约长于15个氨基酸。“多肽”这一术语是指一系列氨基酸残基，通常通过相邻氨基酸的α-氨基和羰基之间的肽键来连接。多肽的长度对于本发明来说并不十分关键，只要保持正确的表位即可。与术语肽或寡肽相对，“多肽”这一术语是指包含多于约30个氨基酸残基的分子。一种肽、寡肽、蛋白质或编码该分子的核苷酸如果能诱导免疫反应，则具有“免疫原性”因此是本发明中的一种“免疫原”。在本发明的情况下，免疫原性的更具体定义是诱导T细胞反应的能力。因此，“免疫原”是一种能够诱导免疫反应的分子，并且在本发明的情况下，是一种能诱导T细胞反应的分子。在另一方面，所述免疫原可以是肽，肽与MHC的复合体、和或用于提高特异性抗体或TCR抗性的蛋白。I类T细胞“表位”要求的是一种结合至MHCI类受体上的短肽，从而形成一种三元复合体MHCI类α链、β-2-微球蛋白和肽，其可以通过T细胞负载匹配T细胞受体与具有适当亲和力的MHC肽复合物结合来识别。结合至MHCI类分子的肽的典型长度为8-14个氨基酸，最典型为9个氨基酸长度。在人类中，有三种编码MHCI类分子的不同基因位点人MHC分子也是指定的人白细胞抗原HLA：HLA-A、HLA-B和HLA-C。HLA-A*01、HLA-A*02和HLA-B*07是可从这些基因位点表达的不同MHCI类等位基因的实例。表5：HLA-A*02和HLA-A*24和最常见HLA-DR血清类型的表达频率F。频率根据Mori等人Morietal.,1997使用的Hardy-Weinberg公式F＝1–1-Gf2改编，从美国人群范围内的单体型频率中推导出。由于连锁不平衡，某些HLA-DR等位基因内的A*02或A*24组合与其预期单一频率相比，可能是浓缩的或频率较低。有关详细信息，请参阅Chanock等人的文献Chanocketal.,2004。本发明的肽，优选当如本文描述纳入本发明的疫苗时与A*02结合。疫苗还可能包括泛结合MHCII类肽。因此，本发明的疫苗可用于治疗A*02阳性患者中的癌症，但不因为这些肽的广泛结核性而必须选择II类MHC同种异型。如果本发明的A*02肽与结合至另一等位基因例如A*24的肽组合，与单独的MHCI类等位基因相比，可治疗更高比例的患者群体。虽然在大多数人群中，低于50％的患者可由单独的等位基因来解决问题，但是本发明中一种含HLA-A*24和HLA-A*02表位的疫苗可以治疗任何相关人群中至少60％的患者。具体来说，各区域中，以下比例的患者这些等位基因中的至少一个有肯定效果：美国61％、西欧62％、中国75％、韩国77％、日本86％根据www.allelefrequencies.net计算。在一项优选的实施方案中，术语“核苷酸序列”是指脱氧核苷酸的杂聚物。编码特定肽、寡肽或多肽的核苷酸序列可为天然核苷酸序列，也可为合成核苷酸序列。一般来说，编码肽、多肽以及本发明蛋白的DNA片段由cDNA片段和短寡核苷酸衔接物，或一系列寡核苷酸组成，以提供一种合成基因，该基因能够在包含源自微生物或病毒操纵子的调节元素的重组转录单元中被表达。如本文所用的术语“肽的核苷酸编码”是指对肽进行核苷酸序列编码，其中该肽包括与将由用于产生TCR的树突细胞或另一细胞系统所表达该序列的生物系统兼容的人工人造启动密码子和终止密码子。本文提到的核酸序列既包括单链核酸也包括双链核酸。因此，除非本文另有所指，否则，例如对于DNA，具体的序列是该序列的单链DNA、该序列与其互补序列的双工双链DNA以及该序列的互补序列。“编码区”这一术语是指在基因的天然基因组环境中天然或正常编码该基因的表达产物的那部分基因，即，体内编码该基因的天然表达产物的区域。编码区可来自非突变“正常”基因、突变基因或异常基因，甚至还可以来自DNA序列，完全可在实验室中使用本领域熟知的DNA合成方法合成。“表达产物”这一术语是指多肽或蛋白，它是基因和遗传码退化并因而编码同样的氨基酸所造成的任何核酸序列编码同等物的翻译产物。“片段”这一术语，当指的是一种编码序列时，表示包含非完整编码区的DNA的一部分，其表达产物与完整编码区表达产物基本上具有相同的生物学功能或活性。“DNA片段”这一术语是指一种DNA聚合物，以单独的片段形式或一种较大DNA结构的组分形式存在，它们从至少分离过一次的DNA中以基本纯净的形式获得，即不含污染性内源性材料，并且获得的数量或浓度能够使用标准生化方法，例如使用克隆载体，进行识别、操纵和回收该片段及其组分核苷酸序列。此类片段以开放阅读框架未被内部未翻译序列打断或内含子通常提呈于真核基因中的形式存在。未翻译DNA序列可能存在于开放阅读框架的下游，在那里其不会干预编码区的操纵或表达。“引物”这一术语表示一种短核酸序列，其可与一个DNA链配对，并在DNA聚合酶开始合成脱氧核糖核酸链之处提供一个游离的3'-OH末端。“启动子”这一术语表示参与RNA聚合酶的结合从而激活转录的DNA区域。术语“分离”表示一种物质从其原来的环境例如，如果是天然发生的则是天然环境中被移走。例如，活体动物中的天然核苷酸或多肽不是分离的，但是，从天然系统中一些或所有共存物质中分离出来的核苷酸或多肽是分离的。此类多核苷酸可能是载体的一部分和或此类多核苷酸和多肽可能是一种组合物的一部分，并且由于该载体或组合物不是其天然环境的一部分，因此它仍然是分离的。本发明中披露的多核苷酸和重组或免疫原性多肽也可能以“纯化”的形式存在。术语“纯化”并非要求绝对的纯度；它只是一个相对的定义，可以包括高度纯化或部分纯化的制剂，相关领域技术人员能理解这些术语。例如，各个从已用传统方法纯化为具有电泳同构型的cDNA库中分离出的各种克隆物。明确考虑到将起始材料或天然物质纯化至少一个数量级，优选为两或三个数量级，更优选为四或五个数量级。此外，明确涵盖所述多肽的纯度优选为99.999％，或至少为99.99％或99.9％；甚而适宜为以重量计99％或更高。根据本发明公开的核酸和多肽表达产物，以及包含此类核酸和或多肽的表达载体可能以“浓缩的形式”存在。本文使用的术语“浓缩”是指材料的浓度至少是其自然浓度的大约2、5、10、100或1000倍，有优势的是，按重量计为0.01％，优选为至少0.1％。也明确考虑到，按重量计约为0.5％、1％、5％、10％和20％的浓缩制剂。序列、构型、载体、克隆物以及包含本发明的其他材料可有优势地以浓缩或分离的形式存在。“活性片段”这一术语是指产生免疫反应的片段即具有免疫原性活性，通常是一种肽、多肽或核酸序列的片段，不论是单独或可选地与合适的佐剂一起或在载体中给予一种动物，比如哺乳动物，例如兔子或小鼠，也包括人；这种免疫反应采用的形式是在接受动物如：人体内刺激T细胞反应。或者，“活性片段”也可用于诱导体外T细胞反应。本文使用的“部分”portion、“节段”segment、“片段”fragment这几个术语，当与多肽相关地使用时是指残基的连续序列，比如氨基酸残基，其序列形成一个较大序列的子集。例如，如果一个多肽以任一种肽链内切肽酶如胰蛋白酶或糜蛋白酶进行处理，则该处理获得的寡肽会代表起始多肽的部分、节段或片段。当与多核苷酸相关地使用时，这些术语是指用任何核酸内切酶处理所述多核苷酸产生的产物。根据本发明，术语“等同度百分比”或“等同百分比”，如果指的是序列，则表示在待对比序列“被对比序列”与所述序列或权利要求的序列“参考序列”对准之后将被对比序列与所述序列或权利要求的序列进行比较。然后根据下列公式计算等同度百分比：等同度百分比＝100[1-CR]其中C是参考序列与被对比序列之间对准长度上参考序列与被对比序列之间的差异数量，其中i参考序列中每个碱基或氨基酸序列在被对比序列中没有对应的对准碱基或氨基酸；ii参考序列中每个空隙，以及iii参考序列中每个对准碱基或氨基酸与被比对比序列中对准碱基或氨基酸不同，即构成一个差异以及iiii必须在对准序列的第1位置开始对准；并且R是参考序列与被对比序列对准长度上在参考序列中产生任何空隙也计算为一个碱基或氨基酸的参考序列中的碱基或氨基酸数目。如果“被对比序列”和“参考序列”之间存在的一个对准按上述计算的等同度百分比大致等于或大于指定的最低等同度百分比，则被对比序列与参考序列具有指定的最低等同度百分比，虽然可能存在按本文上述计算的等同度百分比低于指定等同度百分比的对准。因此，如上所述，本发明提出了一种肽，其包括选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的一个序列、或与SEQIDNO:1至SEQIDNO:91具有88％同源性的其变体、或诱导与该肽发生T细胞交叉反应的一个变体。本发明所述的肽具有与主要组织兼容性复合体MHCI或所述肽延长版本的II类分子结合的能力。在本发明中，“同源性”一词是指两个氨基酸序列之间的同一度参见上文的等同度百分比，如肽或多肽序列。前文所述的“同源”是通过将理想条件下调整的两个序列与待比较序列进行比对后确定的。此类序列同源性可通过使用ClustalW等算法创建一个排列而进行计算。也可用使用一般序列分析软件，更具体地说，是VectorNTI、GENETYX或由公共数据库提供的其他工具。本领域技术人员能评估特定肽变体诱导的T细胞是否可与该肽本身发生交叉反应Appayetal.,2006；Colombettietal.,2006；Fongetal.,2001；Zarembaetal.,1997。发明人用给定氨基酸序列的“变体”表示，一个或两个氨基酸残基等的侧链通过被另一个天然氨基酸残基的侧链或其他侧链取代而发生改变，这样，这种肽仍然能够以含有给定氨基酸序列由SEQIDNO:1至SEQIDNO:91组成的肽大致同样的方式与HLA分子结合。例如，一种肽可能被修饰以便至少维持如没有提高其能与HLA-A*02或-DR等合适MHC分子的结合槽相互作用和结合，以及至少维持如没有提高其与激活T细胞的TCR结合的能力。随后，这些T细胞可与细胞和杀伤细胞发生交叉反应，这些细胞表达多肽其中包含本发明中定义的同源肽的天然氨基酸序列。正如科学文献和数据库Rammenseeetal.,1999；Godkinetal.,1997中所述，HLA-A结合肽的某些位点通常为锚定残基，可形成一种与HLA结合槽的结合模序相称的核心序列，其定义由构成结合槽的多肽链的极性、电物理、疏水性和空间特性确定。因此，本领域技术人员能够通过保持已知的锚残基来修饰SEQIDNo:1至SEQIDNO:91提出的氨基酸序列，并且能确定这些变体是否保持与MHCI或II类分子结合的能力。本发明的变体保持与激活T细胞的TCR结合的能力，随后，这些T细胞可与表达一种包含本发明定义的同源肽的天然氨基酸序列的多肽的细胞发生交叉反应并杀死该等细胞。如果无另有说明，那么本文公开的原始未修饰肽可以通过在肽链内的不同可能为选择性位点上取代一个或多个残基而被修饰。优选情况是，这些取代位于氨基酸链的末端。此取代可能是保守性的，例如，其中一个氨基酸被具有类似结构和特点的另一个氨基酸所取代，比如其中一个疏水性氨基酸被另一个疏水性氨基酸取代。更保守的取代是具有相同或类似的大小和化学性质的氨基酸间的取代，例如，亮氨酸被异亮氨酸取代。在天然同源蛋白质家族序列变异的研究中，某些氨基酸的取代往往比其他氨基酸更具有耐受性，这些氨基酸往往表现出与原氨基酸的大小、电荷、极性和疏水性之间的相似性相关，这是确定“保守取代”的基础。在本文中，保守取代定义为在以下五种基团之一的内部进行交换：基团1—小脂肪族、非极性或略具极性的残基Ala,Ser,Thr,Pro,Gly；基团2—极性、带负电荷的残基及其酰胺Asp,Asn,Glu,Gln；基团3—极性、带正电荷的残基His,Arg,Lys；基团4—大脂肪族非极性残基Met,Leu,Ile,Val,Cys以及基团5—大芳香残基Phe,Tyr,Trp。较不保守的取代可能涉及一个氨基酸被另一个具有类似特点但在大小上有所不同的氨基酸所取代，如：丙氨酸被异亮氨酸残基取代。高度不保守的取代可能涉及一个酸性氨基酸被另一个具有极性或甚至具有碱性性质的氨基酸所取代。然而，这种“激进”取代不能认为是无效的而不予考虑，因为化学作用是不完全可预测的，激进的取代可能会带来其简单化学原理中无法预见的偶然效果。当然，这种取代可能涉及普通L-氨基酸之外的其他结构。因此，D-氨基酸可能被本发明的抗原肽中常见的L-氨基酸取代，也仍在本公开的范围之内。此外，非标准氨基酸即，除了常见的天然蛋白原氨基酸也可以用于取代之目的，以生产根据本发明的免疫原和免疫原性多肽。如果在一个以上位置上的取代发现导致肽的抗原活性基本上等于或大于以下定义值，则对这些取代的组合进行测试，以确定组合的取代是否产生对肽抗原性的迭加或协同效应。肽内被同时取代的位置最多不能超过4个。基本上由本文所指氨基酸序列组成的一种肽可能有一个或两个非锚定氨基酸见下面锚基序相关内容被交换，而不存在这种情况，即相比于未修饰的肽，与人类主要组织兼容性复合体MHC–I或II类分子的能力基本上被改变或受到不利影响。在另一实施方案中，在基本上由本文所述氨基酸序列组成的肽中，一个或两个氨基酸可与其保守交换伙伴交换见下文，而不存在这种情况，即相比于未修饰的肽，与人类主要组织兼容性复合体MHC–I或II类分子的能力基本上被改变或受到不利影响。这些基本不与T细胞受体互动的氨基酸残基可通过取代其他几乎不影响T细胞反应并不妨碍与相关MHC结合的氨基酸而得到修饰。因此，除了特定限制性条件外，本发明的肽可能为任何包括给定氨基酸序列或部分或其变体的肽发明人所用的这个术语包括寡肽或多肽。表6：根据SEQIDNO:4、6和10的肽的变体和基序较长延长的肽也可能适合。MHCI类表位通常长度为8至11个氨基酸可能由肽从较长的肽或包含实际表位的蛋白中加工而产生。两侧有实际表位的残基优选为在加工过程中几乎不影响暴露实际表位所需蛋白裂解的残基。本发明的肽可被延长多达四个氨基酸，即1、2、3或4个氨基酸，可按照4:0与0:4之间的任何组合添加至任意一端。本发明的延长组合可见表7。表7：本发明肽的延长组合拉伸延长的氨基酸可以是所述蛋白或任何其他氨基酸的原序列肽。延长可用于增强所述肽的稳定性或溶解性。因此，本发明所述的表位可能与天然肿瘤相关表位或肿瘤特异性表位相同，也可能包括来自参考肽的不超过四个残基的不同肽，只要它们有基本相同的抗原活性即可。在一项替代实施方案中，肽的一边或双边被延长4个以上的氨基酸，优选最多30个氨基酸的总长度。这可形成MHC-II类结合肽。结合至MHCII类肽可通过本领域中已知的方法进行测试。因此，本发明提出了MHCI类表位的肽和变体，其中所述肽或抗体的总长度为8至100个、优选为8至30个、最优选为8至14个氨基酸长度即10、11、12、13、14个氨基酸，如果为延长II类结合肽时，长度也可为15、16、17、18、19、20、21或22个氨基酸。当然，本发明的肽或变体能与人主要组织兼容性复合体MHCI或II类分子结合。肽或变体与MHC复合物的结合可用本领域内的已知方法进行测试。优选情况是，当本发明的肽特异性T细胞相比于取代肽受到检测时，如果取代肽在相对于背景肽溶解度增加达到最大值的一半，则该肽浓度不超过约1mM，优选为不超过约1μM，更优选为不超过约1nM，再优选为不超过约100pM，最优选为不超过约10pM。也优选为，取代肽被一个以上的T细胞识别，最少为2个，更优选为3个。在本发明的一个特别优选实施方案中，肽由或基本由根据SEQIDNO:1至SEQIDNO:91所选的氨基酸序列组成。“基本由...组成”是指本发明的肽，除了根据SEQIDNO:1至SEQIDNO:91中的任一序列或其变体组成外，还含有位于其他N和或C端延伸处的氨基酸，而它们不一定能形成作为MHC分子表位的肽。但这些延伸区域对有效将本发明中的肽引进细胞具有重要作用。在本发明的一实施例中，该肽为融合蛋白的一部分，含来自NCBI、GenBank登录号X00497的HLA-DR抗原相关不变链p33，以下称为“Ii”的80个N-端氨基酸等。在其他的融合中，本发明的肽可以被融合到本文所述的抗体、或其功能性部分，特别是融合入抗体的序列，以便所述抗体进行特异性靶向作用，或者，例如进入本文所述的树突状细胞特异性抗体。此外，该肽或变体可进一步修饰以提高稳定性和或与MHC分子结合，从而引发更强的免疫反应。肽序列的该类优化方法是本领域内所熟知的，包括，例如，反式肽键和非肽键的引入。在反式肽键氨基酸中，肽-CO-NH-并未连接其残基，但是其肽键是反向的。这种逆向反向模拟肽retro-inversopeptidomimetics可通过本领域已知的方法制备，例如：Meziere等人在Meziereetal.,1997中所述的方法，以引用的方式并入本文。这种方法涉及制备包含骨架而并非侧链改变的模拟肽。Meziere等人Meziereetal.,1997的研究显示，这些模拟肽有利于MHC的结合和辅助性T细胞的反应。以NH-CO键替代CO-NH肽键的逆向反向肽大大地提高了抗水解性能。非肽键为-CH2-NH、-CH2S-、-CH2CH2-、-CH＝CH-、-COCH2-、-CHOHCH2-和-CH2SO-等。美国4897445号专利提出了多肽链中非肽键-CH2-NH的非固相合成法，该方法涉及按标准程序合成的多肽以及通过氨基醛和一种含NaCNBH3的氨基酸相互作用而合成的非肽键。含上述序列的肽可与其氨基和或羧基末端的其他化学基团进行合成，从而提高肽的稳定性、生物利用度、和或亲和力等。例如，苄氧羰基、丹酰基等疏水基团或叔丁氧羰基团可加入肽的氨基末端。同样，乙酰基或9-芴甲氧羰基可能位于肽的氨基末端。此外，疏水基团、叔丁氧羰基团或氨基团都可能被加入肽的羧基末端。另外，本发明中的所有肽都可能经合成而改变其空间构型。例如，可能使用这些肽的一个或多个氨基酸残基的右旋体，通常不是其左旋体。更进一步地，本发明中肽的至少一个氨基酸残基可被熟知的一个非天然氨基酸残基取代。诸如此类的改变可能有助于增加本发明肽的稳定性、生物利用度和或结合作用。同样，本发明中的肽或变体可在合成肽之前或之后通过特异氨基酸的反应而进行化学修饰。此类修饰的实施例为本领域所熟知，例如，在R.Lundblad所著的《ChemicalReagentsforProteinModification》3rded.CRCPress,2004Lundblad,2004中有概述，以参考文献的方式并入本文。虽然氨基酸的化学修饰方法无限制，但其包括但不限于通过以下方法修饰：酰基化、脒基化、赖氨酸吡哆基化、还原烷基化、以2,4,6-三硝基苯磺酸TNBS三硝基苯基化氨基团、通过将半胱氨酸过甲酸氧化为磺基丙氨酸而对羧基团和巯基进行氨基修饰、形成易变衍生物、与其他巯基化合物形成混合二硫化合物、与马来酰亚胺反应，与碘乙酸或碘乙酰胺羧甲基化、在碱性pH值下与氰酸盐甲氨酰化。在这方面，技术人员参考了《CurrentProtocolsInProteinScience》Eds.Coliganetal.JohnWileyandSonsNY1995-2000Coliganetal.,1995中第15章所述的在蛋白质化学修饰相关的广泛方法。简言之，修饰蛋白质的精氨酰残基等往往基于于邻二羰基化合物如苯甲酰甲醛、2,3–丁二酮以及1,2-烯巳二酮的反应而形成加合物。另一个实施例是丙酮醛与精氨酸残基的反应。半胱氨酸可在赖氨酸和组氨酸等亲核位点不作随同修饰的情况下就得到修饰。因此，有大量试剂可进行半胱氨酸的修饰。Sigma-Aldrichhttp:www.sigma-aldrich.com等公司的网站含有具体试剂的信息。蛋白质中二硫键的选择性还原也很普遍。二硫键可在生物制药热处理中形成和氧化。伍德沃德氏试剂K可用于修饰特定的谷氨酸残基。N-3-二甲氨基丙基-N′-乙基-碳二亚胺可用于形成赖氨酸残基和谷氨酸残基的分子内交联。例如：焦碳酸二乙酯是修饰蛋白质组氨酸残基的试剂。组氨酸也可使用4-羟基-2-壬烯醛进行修饰。赖氨酸残基与其他α-氨基团的反应，例如，有利于肽结合到蛋白肽的表面或交联处。赖氨酸聚是多乙烯乙二醇的附着点，也是蛋白质糖基化的主要修饰位点。蛋白质的蛋氨酸残基可通过碘乙酰胺、溴乙胺、氯胺T等被修饰。四硝基甲烷和N-乙酰基咪唑可用于酪氨酸残基的修饰。经二酪氨酸形成的交联可通过过氧化氢铜离子完成。对色氨酸修饰的最近研究中使用了N-溴代琥珀酰亚胺、2-羟基-5-硝基苄溴或3-溴-3-甲基-2-2–硝苯巯基-3H-吲哚BPNS-粪臭素。当蛋白与戊二醛、聚乙二醇二丙烯酸酯和甲醛的交联用于配制水凝胶时，治疗性蛋白和含聚乙二醇的肽的成功修饰往往可延长循环半衰期。针对免疫治疗的变态反应原化学修饰往往通过氰酸钾的氨基甲酰化实现。本发明的另一实施方案涉及一种非天然肽，其中所述肽由或基本由根据SEQIDNo:1至SEQIDNo:156的氨基酸序列组成，并经合成产生即，合成为一种药用盐。合成产生肽的方法是本领域公知的。本发明肽的盐与其体内状态的肽基本上不同，因为这些体内产生的肽不是盐。该肽的非天然盐形式介导肽的溶解度，特别是包含所述肽的药物组合物的情况下，例如，本文所公开的肽疫苗。为了向需治疗的受试者有效地提供肽，需要肽具有充分、至少基本的溶解度。优选地，盐为肽的药用盐。本发明的这些盐包括碱和碱土盐类，诸如Hofmeister系列的盐，包含阴离子PO43-、SO42-、CH3COO-、Cl-、Br-、NO3-、ClO4-、I-、SCN-和阳离子NH4+、Rb+、K+、Na+、Cs+、Li+、Zn2+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Cu2+和Ba2+。特别地，盐选自NH43PO4、NH42HPO4、NH4H2PO4、NH42SO4、NH4CH3COO、NH4Cl、NH4Br、NH4NO3、NH4CIO4、NH4I、NH4SCN、Rb3PO4、Rb2HPO4、RbH2PO4、Rb2SO4、Rb4CH3COO、Rb4Cl、Rb4Br、Rb4NO3、Rb4CIO4、Rb4I、Rb4SCN、K3PO4、K2HPO4、KH2PO4、K2SO4、KCH3COO、KCl、KBr、KNO3、KClO4、KI、KSCN、Na3PO4、Na2HPO4、NaH2PO4、Na2SO4、NaCH3COO、NaCl、NaBr、NaNO3、NaCIO4、NaI、NaSCN、ZnCI2Cs3PO4、Cs2HPO4、CsH2PO4、Cs2SO4、CsCH3COO、CsCl、CsBr、CsNO3、CsCIO4、CsI、CsSCN、Li3PO4、Li2HPO4、LiH2PO4、Li2SO4、LiCH3COO、LiCl、LiBr、LiNO3、LiClO4、LiI、LiSCN、Cu2SO4、Mg3PO42、Mg2HPO4、MgH2PO42、Mg2SO4、MgCH3COO2、MgCl2、MgBr2、MgNO32、MgClO42、MgI2、MgSCN2、MnCl2、Ca3PO4,、Ca2HPO4、CaH2PO42、CaSO4、CaCH3COO2、CaCl2、CaBr2、CaNO32、CaClO42、CaI2、CaSCN2、Ba3PO42、Ba2HPO4、BaH2PO42、BaSO4、BaCH3COO2、BaCl2、BaBr2、BaNO32、BaClO42、BaI2和BaSCN2。特别优选为NH乙酸、MgCl2、KH2PO4、Na2SO4、KCl、NaCl和CaCl2，例如：氯化物或乙酸盐三氟乙酸盐。一般来说，肽和变体至少含氨基酸残基之间的肽联接可使用Lukas等人Lukasetal.,1981以及此处引用的参考文献所披露的固相肽合成Fmoc-聚酰胺模式进行合成。芴甲氧羰基Fmoc团对N-氨基提供临时保护。使用N,N-二甲基甲酰胺中的20％二甲基呱啶中对这种碱高度敏感的保护基团进行重复分裂。由于它们的丁基醚在丝氨酸苏氨酸和酪氨酸的情况下、丁基酯在谷氨酸和天门冬氨酸的情况下、叔丁氧羰基衍生物在赖氨酸和组氨酸的情况下、三苯甲基衍生物在半胱氨酸的情况下及4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺酰基衍生物在精氨酸的情况下，侧链功能可能会受到保护。只要谷氨酰胺和天冬酰胺为C-末端残基，侧链氨基功能保护所使用的是由4,4'-二甲氧基二苯基团。固相支撑基于聚二甲基丙烯酰胺聚合物，其由三个单体二甲基丙烯酰胺骨架单体、双丙烯酰乙烯二胺交联剂和N-丙烯酰肌胺酸甲酯功能剂构成。使用的肽-树脂联剂为酸敏感的4-羟甲基苯氧乙酸衍生物。所有的氨基酸衍生物均作为其预制对称酸酐衍生物加入，但是天冬酰胺和谷氨酰胺除外，它们使用被逆转的N,N-二环己基碳二亚胺1-羟基苯并三唑介导的耦合程序而加入。所有的耦合和脱保护反应用茚三酮、硝基苯磺酸或isotin测试程序监测。合成完成后，用浓度为95％含50％清道夫混合物的三氟醋酸，从伴随去除侧链保护基团的树脂支承物中裂解肽。常用的清道夫混合物包括乙二硫醇、苯酚、苯甲醚和水，准确的选择依据合成肽的氨基酸组成。此外，固相和液相方法结合使用对肽进行合成是可能的例如，请参阅Bruckdorferetal.,2004以及本文引用的参考文献。三氟乙酸用真空中蒸发、随后用承载粗肽的二乙基乙醚滴定进行去除。用简单萃取程序水相冻干后，该程序制得不含清道夫混合物的肽清除任何存在的清道夫混合物。肽合成试剂一般可从Calbiochem-Novabiochem诺丁汉，英国获得。纯化可通过以下技术的任何一种或组合方法进行，如：再结晶法、体积排阻色谱法、离子交换色谱法、疏水作用色谱法以及通常反相高效液相色谱法如使用乙腈水梯度分离。可以使用薄层色谱法、电泳特别是毛细管电泳、固相萃取CSPE、反相高效液相色谱法、酸解后的氨基酸分析、快原子轰击FAB质谱分析以及MALDI和ESI-Q-TOF质谱分析进行肽分析。为了选择过度提呈的肽，计算了提呈图，其显示样本中位提呈量以及复制变化。该特点使相关肿瘤实体的样本与正常组织样本的基线值并列。可通过计算调节线性混合效应模型Pinheiroetal.,2015的p值将以上每个特点并入过度提呈分数中，从而通过假发现率BenjaminiandHochberg,1995调整多项检验参见实施例1、图1。对于通过质谱法对HLA配体的识别和相对定量，对来自冲击冷冻组织样本的HLA分子进行纯化并对HLA相关肽进行分离。分离的肽分开，并通过在线纳米-电喷雾-电离nanoESI液相色谱-谱LC-MS实验进行鉴定。由此产生的肽序列的验证方法是，将头颈鳞状细胞癌样本N＝17个A*02阳性样本中记录的自然肿瘤相关肽TUMAP的片段模式与相同序列相应合成参考肽的片段模式进行比较。由于这些肽被直接鉴定为原发性肿瘤HLA分子的配体，因此这些结果为来自14名头颈鳞状细胞癌患者的原发癌症组织上确定肽的自然加工和提呈提供了直接证据。发现管道v2.1例如，参见US2013-0096016，并在此通过引用将其整体并入本文考虑到识别和选择相关过量提呈的候选肽疫苗，这基于与几种不同的非癌组织和器官相比癌症或其他受感染组织的HLA限制肽水平直接相对定量结果。这通过以下方法实现：使用专有数据分析管道处理的LC-MS采集数据、结合序列识别算法、谱聚类、计算离子、保留时间调整、充电状态卷积以及正态化而开发无标记差异化定量方法。为每种肽和样本确立了提呈水平，包括误差估计值。肿瘤组织大量提呈的肽以及肿瘤与非肿瘤组织和器官中过量提呈的肽已经得到确定。对来自头颈鳞状细胞癌组织样本的HLA肽复合物进行纯化，并且对HLA相关肽使用LC-MS进行分离和分析见实施例。本申请中包含的所有TUMAP使用原发性头颈鳞状细胞癌样本的方法进行鉴定，确认其在原发性头颈鳞状细胞癌上的提呈。在多个头颈鳞状细胞癌和正常组织上确定的TUMAP用无标记LC-MS数据的离子计数方法进行量化。该方法假定肽的LC-MS信号区域与样本中其丰度相关。各种LC-MS实验中肽的所有量化信号在集中趋势基础上进行正常化，根据每个样品进行平均，并合并入柱状图被称为提呈图。提呈图整合了不同分析方法，如：蛋白数据库检索、谱聚类、充电状态卷积除电和保留时间校准和正态化。除了过量提呈肽之外，也测试了潜在基因的mRNA表达。mRNA数据通过RNA测序分析正常组织和癌组织获得见实施例2、图2。正常组织数据的额外来源是从3000个正常组织样本中公开获得的RNA表达数据的数据库Lonsdale,2013。获得自蛋白的肽在癌组织中显示高表达编码mRNA，但是在重要正常组织中非常低或不存在，这些肽作为优选肽纳入本发明。本发明提出了有利于治疗癌肿肿瘤，优选为治疗过量提呈或只提呈本发明肽的头颈鳞状细胞癌。这些肽由质谱分析法直接显示出，而由HLA分子自然提呈于原发性头颈鳞状细胞癌。与正常组织相比，癌症中高度过量表达肽来源的许多源基因蛋白质也指定为“全长蛋白”或“基础蛋白”-本发明相关的“正常组织”是健康乳腺细胞或其他正常组织细胞，这表明肿瘤与这些源基因的高度关联性见实施例2。此外，这些肽本身也在肿瘤组织中过度提呈本发明相关的“肿瘤组织”是指来自头颈鳞状细胞癌患者的样本，但不在正常组织中过度提呈见实施例1。HLA结合肽能够被免疫系统识别，特别是T淋巴细胞。T细胞可破坏提呈被识别HLA肽复合体的细胞如：提呈衍生肽的头颈鳞状细胞癌细胞。本发明的所有肽已被证明具有刺激T细胞反应的能力，并过量提呈，因而可用于制备本发明的抗体和或TCR，例如可溶性TCR参见实施例3和实施例4。此外，肽与相应的MHC组合时，也可用于制备本发明的抗体和或TCR，特别是sTCR。各个方法均为技术人员所熟知，并在各个文献中可找到。因此，本发明的肽可用于在患者中产生免疫反应，从而能够毁灭肿瘤细胞。患者的免疫反应能够通过直接给予患者所述肽或前体物质如，加长肽、蛋白或编码这些肽的核酸，较理想是与加强免疫原性的制剂相结合，而进行诱导。源自该治疗性疫苗的免疫反应预期能够高度特异性地对抗肿瘤细胞，因为本发明的目标肽在正常组织上提呈的复制数目较少，防止患者发生对抗正常细胞的不良自体免疫反应的风险。本说明书还涉及包含一个α链和一个β链“αβTCR”的T细胞受体TCR。还提供了由MHC分子提呈时可与TCR和抗体结合的本发明的肽。本说明书还涉及核酸、载体和用于表达TCR的宿主细胞和本说明书的肽；以及使用它们的方法。术语“T细胞受体”缩写TCR是指一种异二聚体分子，其包含一个α多肽链α链和一个β多肽链β链，其中所述异二聚体受体能够结合由HLA分子提呈的肽抗原。该术语还包括所谓的γδTCR。在一个实施方案中，本说明书提供了如本文中所描述的产生TCR的方法，该方法包括在适于促进TCR表达的条件下培养能够表达TCR的宿主细胞。另一个方面，本说明书涉及一种根据本说明书的方法，其中通过使足量的抗原与抗原提呈细胞接触，将抗原加载到于合适抗原提呈细胞或人工抗原呈递细胞表面表达的I或II类MHC分子上，或者通过将I或II类MHC复合单体四聚体化，使抗原加载到I或II类MHC四聚体上。αβTCR的α和β链和γδTCR的γ和δ链通常被视为各自有两个“结构域”，即可变和恒定结构域。可变结构域由可变区V和连接区J的组合。可变结构域还可能包括一个前导区L。β和δ链还可能包括一个多样区D。α和β恒定结构域还可能包括锚定α和β链至细胞膜的C末端跨膜TM结构域。相对于γδ的TCR，如本文所用的术语“TCRγ可变域”是指无前导区L的TCRγVTRGV区与TCRγTRGJ区的组合，术语TCRγ恒定结构域是指细胞外TRGC区域，或C-末端截短TRGC序列。同样地，“TCRδ可变域”是指无前导区L的TCRδVTRDV区与TCRδDJTRDDTRDJ区的组合，术语“TCRδ恒定结构域”是指细胞外TRDC区域，或C-末端截短TRDC序列。本说明书的TCR优选结合至肽HLA分子复合体，其具有约100μM或更小、约50μM或更小、约25μM或更小或约10μM或更小的结合亲和力KD。更为优选的情况是具有约1μM或更小、约100nM或更小、约50nM或更小或约25nM或更小结合亲和力的高亲和力TCR。本发明TCR优选结合亲和力范围的非限制性示例包括约1nM至约10nM；约10nM至约20nM；约20nM至约30nM；约30nM至约40nM；约40nM至约50nM；约50nM至约60nM；约60nM至约70nM；约70nM至约80nM；约80nM至约90nM；以及约90nM至约100nM。与本说明书TCR相关，本文使用的“特异性结合”及其语法变体用于表示对100μM或更小的肽-HLA分子复合体有结合亲和力KD的TCR。本说明书的αβ异二聚体TCR可能具有其恒定结构域之间的引入二硫键。这种类型的优选TCR包括那些具有一个TRAC恒定域序列和TRBC1或TRBC2恒定域序列的TCR，除非TRAC的苏氨酸48和TRBC1或TRBC2的丝氨酸57被半胱氨酸残基取代，所述半胱氨酸形成TRAC恒定域序列和TCR的TRBC1或TRBC2恒定区序列之间的二硫键。不论具有或不具有上述的引入链间键，本说明书的αβ杂二聚体TCR可能具有一个TRAC恒定域序列和一个TRBC1或TRBC2恒定结构域序列，并且TRAC恒定结构域序列和TCR的TRBC1或TRBC2恒定结构域序列可能通过TRAC外显子2的Cys4和TRBC1或TRBC2外显子2的Cys4之间的天然二硫键相连。本说明书的TCR可能包括选自由放射性核素、荧光团和生物素组成组中的可检测标记。本说明书的TCR可能结合至治疗活性剂，如放射性核素、化学治疗剂或毒素。在一个实施方案中，具有在α链中至少一个突变和或具有在β链中至少一个突变的TCR与未突变TCR相比，已经修改了糖基化。在一个实施方案中，在TCRα链和或TCRβ链中包括至少一个突变的TCR对肽HLA分子复合体有结合亲和力和或结合半衰期，其是包含未突变TCRα链和或未突变TCRβ链的TCR的结合亲和力的至少两倍。肿瘤特异性TCR亲和力增强及其开发依赖于存在最佳TCR亲和力的窗口。这样窗口的存在是根据观察结果：HLA-A2限制性病原体特异性TCR与HLA-A2限制性肿瘤相关自身抗原特异性TCR相比，KD值通常大约低10倍。现已知，尽管肿瘤抗原可能具有免疫原性，但是因为肿瘤来自个体自身的细胞，因此仅突变蛋白质或翻译加工改变的蛋白将被免疫系统视为外来物质。上调或过度表达所谓的自体抗原的抗原不一定诱导针对肿瘤的功能免疫应答：表达对这些抗原具有高度反应性的TCR的T细胞会在一种称为中枢耐受的程序中在胸腺内被不利选择，也就是说只有对自身抗原具有低亲和力TCR的细胞才仍然存在。因此，本说明书的TCR或变体对肽的亲和力可通过本领域熟知的方法来增强。本说明书还涉及一种识别和分离本发明TCR的一种方法，所述方法包括：用A2肽单体从HLA-A*02阴性健康供体孵育PBMC，用四聚体-藻红蛋白PE孵育PBMC并通过荧光激活细胞分选FACS–Calibur方法分析分离高亲和力T细胞。本说明书还涉及一种识别和分离本发明TCR的一种方法，所述方法包括：获得含整个人体TCRαβ基因位点1.1和0.7Mb的转基因小鼠其T细胞表达多样化人类TCR，用于补偿小鼠TCR缺乏，用一种肽对小鼠进行免疫处理，用四聚体-藻红蛋白PE孵育从转基因小鼠中获得的PBMC，并通过荧光激活细胞分选FACS–Calibur方法分析分离高亲和力T细胞。一方面，为了获得表达本说明书TCR的T细胞，编码本说明书TCR-α和或TCR-β链的核酸被克隆入表达载体，诸如γ反转录病毒或慢病毒。重组病毒产生，然后测试功能，如抗原专一性和功能性亲合力。然后，最终产品的等分试样被用于转导靶T细胞群体一般纯化自患者的PBMC，在输入患者前展开。另一方面，为了获得表达本说明书TCR的T细胞，TCRRNA通过本领域中已知的技术例如，体外转录系统合成。然后，体外合成的TCRRNA通过电穿孔来重新表达肿瘤特异性TCR-α和或TCR-β链被引入获得自健康供体的初级CD8+T细胞。为了增加表达，编码本说明书TCR的核酸在操作上可连接到强启动子，例如逆转录病毒长末端重复序列LTR、巨细胞病毒CMV、鼠干细胞病毒MSCVU3、磷酸甘油酸激酶PGK、β肌动蛋白、泛素蛋白和猿猴病毒40SV40CD43复合启动子、延伸因子EF-1a和脾脏病灶形成病毒SFFV启动子。在一优选实施方案中，启动子与被表达的核酸异源。除了强启动子外，本说明书的TCR表达盒可能含有附加的元素，可提高转基因表达，包括中枢多聚嘌呤区CPPT，其促进了慢病毒构建体的核易位Follenzietal.,2000，和土拨鼠肝炎病毒转录后调控元素WPRE，其通过提高RNA稳定性增加转基因表达水平Zuffereyetal.,1999。本发明TCR的α和β链可由位于分开的载体核酸进行编码，或者可通过位于同一载体的多核苷酸编码。实现高水平的TCR表面表达需要引入TCR的TCR-α和TCR-β链高水平转录。为了实现它，本说明书的TCR-α和TCR-β链可在单一的载体中被克隆入双顺反子构建体，其已被证明能够克服这一障碍。使用TCR-α和TCR-β链在之间的病毒核糖体间进入位点IRES导致两链的协同表达，因为TCR-α和TCR-β链均由在翻译过程中分成两个蛋白质的单一转录物产生，从而确保了产生TCR-α和TCR-β链的相等摩尔比。Schmittetal.2009。编码本说明书TCR的核酸可以是被优化以从宿主细胞增加表达的密码子。遗传密码冗余让一些氨基酸被一个以上的密码子编码，但某些密码子没有其他密码子“优化”，因为匹配tRNA以及其他因子的相对可用性Gustafssonetal.,2004。修改TCR-α和TCR-β基因序列使得每个氨基酸被用于哺乳动物基因表达的最佳密码子编码，以及消除mRNA不稳定性基序或隐蔽剪接位点，已显示可显著提高TCR-α和TCR-β基因表达Scholtenetal.,2006。此外，引入的和内源性TCR链之间的错配可能会导致获得特异性，其构成自身免疫的显著风险。例如，混合TCR二聚体的形成可能会减少可用以形成正确配对TCR复合体的CD3分子数目，因此，可以显著降低表达所引入TCR的细胞的功能性亲合力Kuballetal.,2007。为了减少错配，本说明书引入的TCR链的C-末端结构域可以进行修改以促进链间亲和力，同时降低引入链与内源TCR配对的能力。这些策略可能包括用鼠配对物取代人类TCR-α和TCR-βC端结构域鼠化C端结构域；通过引入第二个半胱氨酸残基到引入TCR的TCR-α和TCR-β链产生C末端结构域的第二个链间二硫键半胱氨酸修饰；交换TCR-α和TCR-β链C端结构域的相互作用残基“杵臼结构”；直接融合TCR-α和TCR-β链可变结构域至CD3ζCD3ζ融合Schmittetal.2009。在一实施方案中，宿主细胞被改变结构以表达本说明书的TCR。在一优选实施方案中，宿主细胞为人T细胞或T细胞祖细胞。在一些实施方案中，T细胞或T细胞祖细胞从癌症患者中获得。在另一些实施方案中，T细胞或T细胞祖细胞从健康供体中获得。本说明书的宿主细胞相对于待治疗的患者可以为同种异体或自体的。在一实施方案中，宿主是被转化以表达αβTCR的γδT细胞。“药物组合物”是指适合在医疗机构用于人体的组合物。优选地，药物组合物为无菌状态，并根据GMP指南生产。药物组合物包括游离形式或以一种药用盐形式存在的肽也参见上文。此处使用的“药用盐”是指所公开的肽的一种衍生物，其中该肽由制酸或药剂的碱盐进行改性。例如，用与适合的酸反应的游离碱通常其中的中性药物有一个中性–NH2基团制备酸式盐。适合制备酸盐的酸包括有机酸，如：乙酸、丙酸、羟基酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、甲磺酸、苯磺酸、水杨酸等等、以及无机酸，如：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和磷酸等。相反，可在一种肽上提呈的酸性基团的碱盐制剂使用药用碱基进行制备，如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、三甲胺等等。在特别优选的实施方案中，药物组合物包括乙酸醋酸盐，三氟乙酸盐或盐酸氯化物形式的肽。本发明中所述的药剂优选为一种免疫治疗药剂，例如，一种疫苗。该疫苗可直接给到患者的受影响器官，也可i.d.、i.m.、s.c.、i.p.和i.v.注射方式全身给药，或体外应用到来自患者或其细胞株的细胞随后再将这些细胞注入到患者中，或体外用于从来自患者的免疫细胞的一个细胞亚群然后再将细胞重新给予患者。如果核酸体外注入细胞，可能有益于细胞转染，以共同表达免疫刺激细胞因子如白细胞介素-2。肽可完全单独给药，也可与免疫刺激佐剂相结合见下文、或与免疫刺激细胞因子联合使用、或以适当的输送系统给药例如脂质体。该肽也可结合形成一种合适的载体如钥孔虫戚血蓝蛋白KLH或甘露到合适的载体参阅WO9518145及Longeneckeretal.,1993。肽也可能被标记，可能是融合蛋白，或可能是杂交分子。在本发明中给出序列的肽预计能刺激CD4或CD8T细胞。然而，在有CD4T-辅助细胞的帮助时，CD8T细胞刺激更加有效。因此，对于刺激CD8T细胞的MHC-I类表位，一种杂合分子的融合伙伴或片段提供了刺激CD4阳性T细胞的适当表位。CD4-和CD8刺激表位为本领域所熟知、并包括本发明中确定的表位。一方面，疫苗包括至少含有SEQIDNO:1至SEQIDNO:91中提出的一种肽以及至少另外一种肽，优选为2至50个、更优选为2至25个、再优选为2至20个、最优选为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18个肽。肽可能从一个或多个特定TAA中衍生，并且可能与MHCI类分子结合。另一方面，本发明提出了一种编码本发明中肽或肽变体的核酸如多聚核苷酸。多聚核苷酸可能为，例如，DNA、cDNA、PNA、RNA或其组合物，它们可为单链和或双链、或多聚核苷酸的原生或稳定形式如：具有硫代磷酸骨架的多聚核苷酸，并且只要它编码肽，就可能包含也可能不包含内含子。当然，多聚核苷酸只能编码加入天然肽键并含有天然氨基酸残基的肽。另一个方面，本发明提出了一种可根据本发明表达多肽的表达载体。对于连接多核苷酸，已经开发出多种方法，尤其是针对DNA，可通过向载体补充可连接性末端等方法进行连接。例如，可向DNA片段加入补充性均聚物轨道，之后DNA片段被插入到载体DNA。然后，通过补充性均聚物尾巴的氢键结合，将载体和DNA片段结合，从而形成重组DNA分子。含有一个或多个酶切位点的合成接头为DNA片段与载体连接提供了另一种方法。含各种限制性核酸内切酶的合成接头可通过多种管道购得，其中包括从国际生物技术公司InternationalBiotechnologiesInc,NewHaven,康涅狄格州,美国购得。编码本发明多肽的DNA理想修饰方法是使用Saiki等人Saikietal.,1988所采用的聚合酶链反应方法。此方法可用于将DNA引入合适的载体例如，通过设计合适的酶切位点，也可用于本领域已知的其他有用方法修饰DNA。如果使用病毒载体，痘病毒载体或腺病毒载体为优选。之后，DNA或在逆转录病毒载体情况下，RNA可能表达于合适的宿主，从而制成含本发明肽或变体的多肽。因此，可根据已知技术使用编码本发明肽或变体的DNA，用本文所述方法适当修饰后，构建表达载体，然后表达载体用于转化合适宿主细胞，从而表达和产生本发明中的多肽。此类技术包括那些公开于，例如，美国专利4,440,859、4,530,901、4,582,800、4,677,063、4,678,751、4,704,362、4,710,463、4,757,006、4,766,075和4,810,648。编码含本发明化合物多肽的DNA或在逆转录病毒载体情况下，RNA可能被加入到其他多种DNA序列，从而引入到合适的宿主中。同伴DNA将取决于宿主的性质、DNA引入宿主的方式、以及是否需要保持为游离体还是要相互结合。一般来说，DNA可以适当的方向和正确的表达阅读框架附着到一种表达载体如质粒中。如有必要，该DNA可能与所需宿主所识别的相应转录和翻译调节控制核苷酸序列连接，尽管表达载体中一般存在此类控制功能。然后，该载体通过标准方法被引入宿主。一般来说，并不是所有的宿主都会被载体转化。因此，有必要选择转化过的宿主细胞。选择方法包括用任何必要的控制元素向表达载体插入一个DNA序列，该序列对转化细胞中的可选择性属性如抗生素耐药性进行编码。另外，有这种选择属性的基因可在另外一个载体上，该载体用来协同转化所需的宿主细胞。然后，本发明中的重组DNA所转化的宿主细胞在本文中所述本领域技术人员熟悉的合适条件下培养足够长的时间，从而表达之后可回收的肽。有许多已知的表达系统，包括细菌如大肠杆菌和枯草芽孢杆菌、酵母如酵母菌、丝状真菌如曲霉菌、植物细胞、动物细胞及昆虫细胞。该系统可优选为哺乳动物细胞，如来自ATCC细胞生物学库CellBiologyCollection中的CHO细胞。典型的哺乳动物细胞组成型表达载体质粒包括CMV或含一个合适的多聚A尾巴的SV40启动子以及抗性标志物如新霉素。一个实例为从Pharmacia公司Piscataway，新泽西州，美国获得的pSVL。一种可诱导型哺乳动物表达载体的例子是pMSG，也可以从Pharmacia公司获得。有用的酵母质粒载体是pRS403-406和pRS413-416，一般可从StratageneCloningSystems公司LaJolla,加州92037，美国获得。质粒pRS403、pRS404、pRS405和pRS406是酵母整合型质粒YIp，并插入了酵母可选择性标记物HIS3、TRP1、LEU2和URA3。pRS413-416质粒为酵母着丝粒质粒Ycp。基于CMV启动子的载体如，来自于Sigma-Aldrich公司提供了瞬时或稳定的表达、胞浆表达或分泌，以及FLAG、3xFLAG、c-myc或MATN不同组合物中的N-端或C-端标记。这些融合蛋白可用于检测、纯化及分析重组蛋白。双标融合为检测提供了灵活性。强劲的人巨细胞病毒CMV启动子调控区使得COS细胞中的组成蛋白表达水平高达1mgL。对于较弱的细胞株，蛋白水平一般低于0.1mgL。SV40复制原点的出现将导致DNA在SV40复制容纳性COS细胞中高水平复制。例如，CMV载体可包含细菌细胞中的pMB1pBR322的衍生物复制原点、细菌中进行氨苄青霉素抗性选育的钙-内酰胺酶基因、hGHpolyA和f1的原点。含前胰岛素原引导PPT序列的载体可使用抗FLAG抗体、树脂和板引导FLAG融合蛋白分泌到进行纯化的培养基中。其他与各种宿主细胞一起应用的载体和表达系统是本领域熟知众所周知的。在另一个实施方案中，对本发明的两个或更多的肽或肽变体进行编码，因此，以一个连续顺序类似于“一串珠子”的构建体表达。在达到目标，所述肽或肽变体可能通过连接符氨基酸的延伸处例如LLLLLL连接或融合一起，也可能他们之间没有任何附加的肽而被连接。这些构建体也可用于癌症治疗，可诱导涉及MHCI和MHCII类分子的免疫应答。本发明还涉及一种宿主细胞，其以本发明的多核苷酸载体构建转化而来。宿主细胞可为原核细胞，也可为真核细胞。在有些情况下，细菌细胞为优选原核宿主细胞，典型为大肠杆菌株，例如，大肠杆菌菌株DH5从BethesdaResearchLaboratories公司Bethesda,马里兰州,美国获得和RR1从美国菌种保藏中心ATCC,Rockville,马里兰州,美国，ATCC编号31343获得。首选的真核宿主细胞包括酵母、昆虫和哺乳动物细胞，优选为脊椎动物细胞，如：小鼠、大鼠、猴子或人成纤维细胞和结肠癌细胞株中的细胞。酵母宿主细胞包括YPH499、YPH500和YPH501，一般可从StratageneCloningSystems公司LaJolla,CA92037,美国获得。首选哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢CHO细胞为ATCC中的CCL61细胞、NIH瑞士小鼠胚胎细胞NIH3T3为ATCC中的CRL1658细胞、猴肾源性COS-1细胞为ATCC中的CRL1650细胞以及人胚胎肾细胞的293号细胞。首选昆虫细胞为Sf9细胞，可用杆状病毒表达载体转染。有关针对表达选择合适宿主细胞的概要，可从教科书PaulinaBalbásandArgeliaLorence《MethodsinMolecularBiologyRecombinantGeneExpression,ReviewsandProtocols》PartOne,SecondEdition,ISBN978-1-58829-262-9和技术人员知道的其他文献中查到。含本发明DNA结构的适当宿主细胞的转化可使用大家熟知的方法完成，通常取决于使用载体的类型。关于原核宿主细胞的转化，请参见，例如，Cohen等人的文献Cohenetal.,1972和GreenandSambrook,2012。酵母细胞的转化在Sherman等人的文章Shermanetal.,1986中进行了描述。BeggsBeggs,1978中所述的方法也很有用。对于脊椎动物细胞，转染这些细胞的试剂等，例如，磷酸钙和DEAE-葡聚糖或脂质体配方，可从StratageneCloningSystems公司或LifeTechnologies公司Gaithersburg,MD20877，美国获得。电穿孔也可用于转化和或转染细胞，是本领域用于转化酵母细胞、细菌细胞、昆虫细胞和脊椎动物细胞大家熟知的方法。被成功转化的细胞即含本发明DNA结构的细胞可用大家熟知的方法如PCR进行识别。另外，上清液存在的蛋白可使用抗体进行检测。应了解，本发明中的某些宿主细胞用于制备本发明中的肽，例如细菌细胞、酵母细胞和昆虫细胞。但是，其他宿主细胞可能对某些治疗方法有用。例如，抗原提呈细胞如树突状细胞可用于表达本发明中的肽，使他们可以加加载相应的MHC分子中。因此，本发明提出了含本发明中核酸或表达载体的一种宿主细胞。在一个优选实施方案中，宿主细胞为抗原提呈细胞，尤其是树突状细胞或抗原提呈细胞。2010年4月29日，美国食品和药物管理局FDA批准载有含前例腺酸性磷酸酶PAP的重组融合蛋白可用于治疗无症状或症状轻微的转移性HRPCRinietal.,2006；Smalletal.,2006。另一方面，本发明提出了一种配制一种肽及其变体的方法，该方法包括培养宿主细胞和从宿主细胞或其培养基中分离肽。在另一个实施方案中，本发明中的肽、核酸或表达载体用于药物中。例如，肽或其变体可制备为静脉i.v.注射剂、皮下s.c.注射剂、皮内i.d.注射剂、腹膜内i.p.注射剂、肌肉i.m.注射剂。肽注射的优选方法包括s.c.、i.d.、i.p.、i.m.和i.v.注射。DNA注射的优选方法为i.d.、i.m.、s.c.、i.p.和i.v.注射。例如，给予50μg至1.5mg，优选为125μg至500μg的肽或DNA，这取决于具体的肽或DNA。上述剂量范围在以前的试验中成功使用Walteretal.,2012。用于主动免疫接种的多聚核苷酸可为基本纯化形式，也可包被于载体或输送系统。核酸可能为DNA、cDNA、PNA、RNA，也可能为其组合物。这种核酸的设计和引入方法为本领域所熟知。例如，文献中有其概述Teufeletal.,2005。多核苷酸疫苗很容易制备，但这些载体诱导免疫反应的作用模式尚未完全了解。合适的载体和输送系统包括病毒DNA和或RNA，如基于腺病毒、牛痘病毒、逆转录病毒、疱疹病毒、腺相关病毒或含一种以上病毒元素的混合病毒的系统。非病毒输送系统包括阳离子脂质体和阳离子聚合物，是DNA输送所属领域内熟知的系统。也可使用物理输送系统，如通过“基因枪”。肽或核酸编码的肽可以是一种融合蛋白，例如，含刺激T细胞进行上述CDR的表位。本发明的药物也可能包括一种或多种佐剂。佐剂是那些非特异性地增强或加强免疫反应的物质例如，通过CD8-阳性T细胞和辅助TTH细胞介导的对一种抗原的免疫应答，因此被视为对本发明的药剂有用。适合的佐剂包括但不仅限于1018ISS、铝盐、AS15、BCG、CP-870,893、CpG7909、CyaA、dSLIM、鞭毛蛋白或鞭毛蛋白衍生的TLR5配体、FLT3配体、GM-CSF、IC30、IC31、咪喹莫特resiquimod、ImuFactIMP321、白细胞介素IL-2、IL-13、IL-21、干扰素α或β，或其聚乙二醇衍生物、ISPatch、ISS、ISCOMATRIX、ISCOMs、LipoVac、MALP2、MF59、单磷酰脂A、MontanideIMS1312、MontanideISA206、MontanideISA50V、MontanideISA-51、水包油和油包水乳状液、OK-432、OM-174、OM-197-MP-EC、ONTAK、OspA、载体系统、基于聚丙交酯复合乙交酯[PLG]和右旋糖苷微粒、重组人乳铁传递蛋白SRL172、病毒颗粒和其他病毒样颗粒、YF-17D、VEGFtrap、R848、β-葡聚糖、Pam3Cys、源自皂角苷、分支杆菌提取物和细菌细胞壁合成模拟物的Aquila公司的QS21刺激子，以及其他专有佐剂，如：Ribi'sDetox、Quil或Superfos。优选佐剂如：弗氏佐剂或GM-CSF。前人对一些树突状细胞特异性免疫佐剂如MF59及其制备方法进行了描述AllisonandKrummel,1995。也可能使用细胞因子。一些细胞因子直接影响树突状细胞向淋巴组织迁移如，TNF-，加速树突状细胞成熟为T淋巴细胞的有效抗原提呈细胞如，GM-CSF、IL-1和IL-4美国5849589号专利，特别以其完整引用形式并入本文，并充当免疫佐剂如IL-12、IL-15、IL-23、IL-7、IFN-α、IFN-βGabrilovichetal.,1996。据报告，CpG免疫刺激寡核苷酸可提高佐剂在疫苗中的作用。如果没有理论的约束，CpG寡核苷酸可通过Toll样受体TLR主要为TLR9激活先天非适应性免疫系统从而起作用。CpG引发的TLR9活化作用提高了对各种抗原的抗原特异性体液和细胞反应，这些抗原包括肽或蛋白抗原、活病毒或被杀死的病毒、树突状细胞疫苗、自体细胞疫苗以及预防性和治疗性疫苗中的多糖结合物。更重要的是，它会增强树突状细胞的成熟和分化，导致TH1细胞的活化增强以及细胞毒性T淋巴细胞CTL生成加强，甚至CD4T细胞说明的缺失。甚至有疫苗佐剂的存在也能维持TLR9活化作用诱发的TH1偏移，这些佐剂如：正常促进TH2偏移的明矾或弗氏不完全佐剂IFA。CpG寡核苷酸与以下其他佐剂或配方一起制备或联合给药时，表现出更强的佐剂活性，如微粒、纳米粒子、脂肪乳或类似制剂，当抗原相对较弱时，这些对诱发强反应尤为必要。他们还能加速免疫反应，使抗原剂量减少约两个数量级，在有些实验中，对不含CpG的全剂量疫苗也能产生类似的抗体反应Krieg,2006。美国6406705B1号专利对CpG寡核苷酸、非核酸佐剂和抗原结合使用促使抗原特异性免疫反应进行了描述。一种CpGTLR9拮抗剂为Mologen公司德国柏林的dSLIM双干环免疫调节剂，这是本发明药物组合物的优选成分。也可使用其他如TLR结合分子，如：RNA结合TLR7、TLR8和或TLR9。其他有用的佐剂例子包括但不限于化学修饰性CpG如CpR、Idera、dsRNA模拟物，如，PolyI:C及其衍生物如：AmpliGen、Hiltonol、多聚-ICLC、多聚IC-R、多聚I:C12U、非CpG细菌性DNA或RNA以及免疫活性小分子和抗体，如：环磷酰胺、舒尼替单抗、西乐葆、NCX-4016、西地那非、他达拉非、伐地那非、索拉非尼、替莫唑胺、temsirolimus、XL-999、CP-547632、帕唑帕尼、VEGFTrap、ZD2171、AZD2171、抗-CTLA4、免疫系统的其他抗体靶向性主要结构如：抗-CD40、抗-TGFβ、抗-TNFα受体和SC58175，这些药物都可能有治疗作用和或充当佐剂。技术人员无需过度进行不当实验就很容易确定本发明中有用的佐剂和添加剂的数量和浓度。首选佐剂是抗-CD40、咪喹莫特、瑞喹莫德、GM-CSF、环磷酰胺、舒尼替尼、贝伐单抗、干扰素α、CpG寡核苷酸及衍生物、多聚I:C及衍生物、RNA、西地那非和PLG或病毒颗粒的微粒制剂。本发明药物组合物的一个优选实施方案中，佐剂从含集落刺激因子制剂中选择，如粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF，沙格司亭、环磷酰胺、咪喹莫特、resiquimod和干扰素-α。本发明药物组合物的一个优选实施方案中，佐剂从含集落刺激因子制剂中选择，如粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF，沙格司亭、环磷酰胺、咪喹莫特和resimiquimod。在本发明药物组合物的一个优选实施方案中，佐剂为环磷酰胺、咪喹莫特或resiquimod。更优选的佐剂是MontanideIMS1312、MontanideISA206、MontanideISA50V、MontanideISA-51、聚-ICLC和抗CD40mAB或其组合物。此组合药物为非肠道注射使用，如皮下、皮内、肌肉注射，也可口服。为此，肽和其他选择性分子在药用载体中分解或悬浮，优选为水载体。此外，组合物可包含辅料，如：缓冲剂、结合剂、冲击剂、稀释剂、香料、润滑剂等。这些肽也可与免疫刺激物质合用，如：细胞因子。可用于此类组合物的更多辅料可在从A.Kibbe所著的HandbookofPharmaceuticalExcipientsKibbe,2000等书中获知。此组合药物可用于阻止、预防和或治疗腺瘤或癌性疾病。例如，EP2112253中有示例制剂。重要的是要认识到，通过本发明的疫苗引发的免疫应答在不同的细胞阶段和开发的不同阶段攻击癌症。而且不同的癌症相关信号通路被攻击。这相对于其他疫苗的优势，这些疫苗只针对一个或几个靶标，这可能会导致肿瘤很容易适应于攻击肿瘤逃逸。此外，并非所有的个体肿瘤都表达相同模式的抗原。因此，几个肿瘤相关肽的组合确保了每个肿瘤都承担至少一些靶标。该组合物以这样的方式设计，预期每个肿瘤可表达几种抗原并覆盖肿瘤生长和维持所需要的几种独立的途径。因此，疫苗可易于“现成的”用于较大患者群体。这意味着，预选择接受疫苗治疗的患者可限制为HLA分型，无需抗原表达的任何额外的生物标志物评估，但仍然确保多个靶标同时被诱导的免疫应答攻击，这对于疗效很重要Banchereauetal.,2001；Walteretal.,2012。本文所用的“支架”一词是指与如抗原决定因子特异性结合的分子。在一项实施方案中，支架是能够引导其所连接的实体例如，第二抗原结合部分至目标靶点，例如，至特定类型的肿瘤细胞或承载抗原决定簇的肿瘤基质如根据目前申请中肽和MHC的复合体。在另一项实施例中，支架能够通过其靶抗原例如T细胞受体复合体抗原激活信号通路。支架包括但不限于抗体及其片段，抗体的抗原结合区，其包含抗体重链可变区和抗体轻链可变区，结合的蛋白包括至少一个锚蛋白重复序列基元和单域抗原结合SDAB分子、适体、可溶TCR和经修饰的细胞，例如同种异体或自体T细胞。为了评估某个分子是否是结合至靶点的支架，可进行结合测定。“特定”结合是指，与其他天然肽-MHC复合体相比，该支架与感兴趣的肽-MHC复合体更好地结合，结合程度为，拥有能够杀死承载特定靶点细胞的活性分子的支架不能够杀死无特定靶点但提呈一个或多个其他肽-MHC复合体的另一细胞。如果交叉反应性肽-MHC的肽并不是天然的，即，并非来自人HLA-多肽组，则结合至其他肽-MHC复合体是无关紧要的。评估靶细胞杀伤的测试在本领域中是公知的。它们应该含有未改变的肽-MHC提呈的靶细胞原发细胞或细胞系或载有肽的细胞进行，以便达到天然肽-MHC的水平。各支架可包括一个标记，其通过确定是否存在或不存在卷标所提供的信号可检测到结合支架。例如，该支架可用荧光染料或任何其他适用的细胞标记分子进行标记。此类标记分子是本领域中公知的。例如，通过荧光染料进行的荧光标记可通过荧光或激光扫描显微术或流式细胞术提供结合适体的可视化。各支架可与第二个活性分子例如IL-21、抗CD3、抗CD28结合。关于多肽支架的进一步信息，可参阅，例如，在WO2014071978A1背景技术部分，并作为参考文献引用。本发明还涉及适体。适体例如，参见WO2014191359及其中引用的文献是短的单链核酸分子，其可以折迭为所定义的三维结构并识别特定的靶标结构。它们似乎是开发靶向治疗的合适替代方法。适体已显示可选择性与具有高亲和力和特异性的复合体靶标相结合。识别细胞表面分子的适体在过去十年内已经确定，并为开发诊断和治疗方法提供了手段。由于适体已显示几乎无毒性和免疫原性，因此，它们是生物医学应用中有前景的候选物质。事实上适体，例如前例腺特异性膜抗原识别适体，已被成功地用于靶向治疗并在体内模型的异种移植物中显示出功能。此外，认识到特定肿瘤细胞系的适体也已确定。可选择DNA适体来揭示各种癌细胞的广谱标识属性，特别是那些来自于实体瘤的细胞，而非致瘤和主要健康细胞不被识别。如果所识别的适体不仅识别肿瘤特异性子类型，而且与一系列肿瘤相互作用，这使适体适用于作为所谓的广谱诊断和治疗手段。此外，用流式细胞仪对细胞结合行为的研究显示，适体在纳摩尔范围内显示出很好的亲和力。适体用于诊断和治疗目的。此外，也可能显示，一些适体被肿瘤细胞吸取，因而可作为抗癌剂靶向递送的分子赋形剂，例如siRNA进入肿瘤细胞。可选择适体针对复合体的靶标，如细胞和组织以及包含、优选包括根据任何SEQIDNO1至SEQIDNO91的一个序列、根据当前发明的肽复合体与MHC分子，使用细胞SELEX通过指数富集的配体系统进化技术。本发明中的肽可用于生成和开发出针对MHC肽复合物的特定抗体。这些抗体可用于治疗，将毒素或放射性物质靶向病变组织。这些抗体的另一用途是为了成像之目的如PET将放射性核素靶向病变组织。这可有助于检测小转移灶或确定病变组织的大小和准确位置。因此，本发明的另一方面是提出产生特异性结合至与HLA限制性抗原络合的I或II类人主要组织兼容性复合体MHC的一种重组抗体的方法，该方法包括：用可溶形式的与HLA限制性抗原络合的MHCI或II类分子对包含表达所述主要组织兼容性说复合体MHCI或II类的基因工程非人哺乳动物进行免疫；将mRNA分子与产生所述非人哺乳动物细胞的抗体分离；产生一个噬菌体显示库，显示由所述mRNA分子编码的蛋白分子；以及将至少一个噬菌体与所述噬菌体显示库分离，所述的至少一个噬菌体显示所述抗体特异性地结合至与HLA限制性抗原络合的所述人主要组织兼容性说复合体MHCI或II类。本发明的另一方面提出一种抗体，其特异性结合至与一种HLA限制性抗原络合的I或II类人主要组织兼容性说复合体MHC，其中该抗体优选为多克隆抗体、单克隆抗体、双特异性抗体和或嵌合抗体。产生这种抗体和单链I类主要组织兼容性复合物的相应方法，以及产生这些抗体的其他工具在WO03068201、WO2004084798、WO0172768、WO03070752以及出版物Cohenetal.,2003a；Cohenetal.,2003b；Denkbergetal.,2003中进行了披露，为了本发明之目的，所有参考文献通过引用被完整地并入本文。优选地，该抗体与复合体的结合亲和力低于20纳摩尔，优选为低于10纳摩尔，这在本发明情况下也被视为具有“特异性”。本发明涉及一种肽，包含选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的序列或该序列的与SEQIDNO:1至SEQIDNO:91具有88％同源性优选为相同的变体，或诱导T细胞与其发生交叉反应的变体，其中，所述肽不是基本的全长多肽。本发明进一步涉及一种肽，包含选自SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的序列、或与SEQIDNO:1至SEQIDNO:91具有至少88％同源性优选为相同的变体，其中所述肽或变体的总长度为8至100个、优选为8至30个、最优选为8至14个氨基酸。本发明进一步涉及本发明的肽，其具有与主要组织兼容性复合体MHCI或II类分子结合的能力。本发明进一步涉及本发明中的肽，其中肽由或基本由根据SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的氨基酸序列组成。本发明进一步涉及本发明的肽，其中该肽在化学上被修饰和或包含非肽键。本发明进一步涉及本发明的肽，其中该肽为融合蛋白的一部分，特别包括HLA-DR抗原相关不变链Ii的N-端氨基酸，或其中该肽与一种抗体例如，树突状细胞特定抗体融合。本发明进一步涉及一种核酸，其编码本发明所述肽，前提是该肽并非完整完全的人蛋白。本发明进一步涉及一种本发明的核酸，为DNA、cDNA、PNA、RNA或其组合。本发明进一步涉及一种能表达或正在表达本发明核酸的表达载体。本发明进一步涉及本发明的肽、本发明的核酸或本发明的表达载体在药物中的用途，特别是用于治疗头颈鳞状细胞癌。本发明进一步涉及含本发明核酸或本发明表达载体的宿主细胞。本发明进一步涉及本发明的宿主细胞，其为抗原提呈细胞，优选为树突细胞。本发明进一步涉及制备本发明肽的方法，所述方法包括培养本发明的宿主细胞以及从所述宿主细胞或其培养基中分离肽。本发明进一步涉及本发明中的方法，其中通过使足量的抗原与抗原提呈细胞接触，抗原被载在表达于合适抗原提呈细胞或人工抗原呈递细胞表面的I或II类MHC分子上。本发明进一步涉及本发明的方法，其中该抗原提呈细胞包括一个表达载体，该载体有能力表达含SEQIDNO:1至SEQIDNO:91或其变体氨基酸序列的肽。本发明进一步涉及以本发明方法制造的激活的T细胞，其中所述T细胞有选择性地识别一种细胞，该细胞异常表达含本发明氨基酸序列的多肽。本发明进一步涉及一种杀伤患者靶细胞的方法，其中患者的靶细胞异常表达含本发明任何氨基酸序列的多肽，该方法包括给予患者有效量的本发明T细胞。本发明进一步涉及本发明的任意肽、本发明的核酸、本发明的表达载体、本发明的细胞、本发明的激活细胞毒性T淋巴细胞作为药物或在制造药物中的用途。本发明进一步涉及本发明的用途，其中药剂可有效抗癌。本发明进一步涉及本发明的用途，其中该药剂为一种疫苗。本发明进一步涉及一种本发明的用途，其中药剂可有效抗癌。本发明进一步涉及本发明中的用途，其中所述癌细胞为头颈鳞状细胞癌细胞或其他实体或血液肿瘤细胞，如急性骨髓性白血病、乳腺癌、胆管癌、脑癌、慢性淋巴细胞性白血病、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、膀胱癌、子宫癌细胞。本发明进一步涉及一种基于本发明肽的特定标志物蛋白和生物标志物，在此称为“靶标”，其可用于诊断和或判断头颈鳞状细胞癌的预后。本发明还涉及这些新靶点在癌症治疗中的用途。本文中术语“抗体”为广义上的定义，既包括多克隆也包括单克隆抗体。除了完整或“全部”的免疫球蛋白分子，“抗体”这一术语还包括这些免疫球蛋白分子和人源化免疫球蛋白分子的片段如，CDR、Fv、Fab和Fc片段或聚合物，只要它们表现出本发明的任何期望属性例如，头颈鳞状细胞癌标志物多肽的特异性结合、将毒素传递给癌症标志物基因表达水平增加时的头颈鳞状细胞癌细胞和或抑制头颈鳞状细胞癌标志物多肽的活性。只要有可能，本发明的抗体可从商业来源购买。本发明的抗体也可能使用已知的方法制得。技术人员会了解全长头颈鳞状细胞癌标志物多肽或其片段可用于制备本发明的抗体。用于产生本发明抗体的多肽可部分或全部地由天然源经纯化而得，也可利用重组DNA技术生产。例如，本发明的编码肽的cDNA，例如，该肽为根据SEQIDNO:1至SEQIDNO:91多肽的肽，或其中一个变体或片段，可在原核细胞中如：细菌或真核细胞如：酵母、昆虫或哺乳动物细胞中表达，之后，可纯化重组蛋白，并用于产生一种特异性结合用于产生本发明抗体的头颈鳞状细胞癌标志物多肽的单克隆或多克隆抗体制剂。本领域的技术人员会认识到，两种或两种以上不同集合的单克隆抗体或多克隆抗体能最大限度地增加获得一种含预期用途所需的特异性和亲和力例如，ELISA法、免疫组织化学、体内成像、免疫毒素疗法的抗体的可能性。根据抗体的用途，用已知的方法对其期望活性进行测试例如，ELISA法、免疫组织化学、免疫治疗等；要获取产生和测试抗体的进一步指导，请参阅，例如，Greenfield,2014Greenfield,2014。例如，该抗体可用ELISA法或免疫印迹法、免疫组织化学染色福尔马林固定的癌组织或冰冻的组织切片进行检测。在初次体外表征后，用于治疗或体内诊断用途的抗体根据已知的临床测试方法进行检测。此处使用的术语“单克隆抗体”是指从大量同质抗体中获得的一种抗体，即，由相同的抗体组成的抗体群，但可能少量提呈的自然突变除外。此处所述的单克隆抗体具体包括嵌合“抗体，其中一部分重链和或轻链与从特定物种中获得的抗体或属于特定抗体类型和分类型抗体的相应序列相同同质，同时，剩余链与从其他物种中获得的抗体或属于特定抗体类型和子类型抗体的相应序列以及这些抗体的片段相同同质，只要他们表现出预期的拮抗活性美国4816567号专利，其在此以其整体并入。本发明的单克隆抗体可能使用杂交瘤方法制得。在杂交瘤方法中，老鼠或其他适当的宿主动物，通常用免疫制剂以引发产生或能产生将特异性结合至免疫制剂的抗体。或者，淋巴细胞可在体外进行免疫。单克隆抗体也可由DNA重组方法制得，如：美国4816567号专利所述。编码本发明单克隆抗体的DNA可很容易地使用传统程序进行分离和测序例如：通过使用能与编码鼠抗体重链和轻链的基因特异性结合的寡核苷酸探针。体外方法也适用于制备单价抗体。抗体消化以产生抗体的片段，尤其是Fab片段，可以通过使用本领域已知的常规技术完成。例如，可以通过使用木瓜蛋白酶完成消化。木瓜蛋白酶消化的实施例在WO9429348和美国4342566号专利中有描述。抗体的木瓜蛋白酶消化通常产生两种相同的抗原结合性片段，称为Fab片段每个片段都有一个抗原结合点和残余Fc片段。胃蛋白酶处理产生一个Fab'2片段和一个pFc'片段。抗体片段，不论其是否附着于其他序列，均可包括特定区域或特定氨基酸残基的插入、删除、替换、或其他选择性修饰，但前提是，片段的活性与非修饰的抗体或抗体片段相比没有显著的改变或损害。这些修饰可提供一些额外的属性，如：删除添加可与二硫键结合的氨基酸，以增加其生物寿命、改变其分泌特性等。在任何情况下，抗体片段必须拥有生物活性的特性，如：结合活性、调节结合域的结合力等。抗体的功能性或活性区域可通过蛋白特定区域的基因突变、随后表达和测试所表达的多肽进行确定。这些方法为本行业技术人员所熟知，可包括编码抗体片段的核酸的特定位点基因突变。本发明的抗体可进一步包括人源化抗体或人抗体。非人如：鼠抗体的人源化形式为嵌合抗体免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其片段如：Fv、Fab、Fab'或抗体的其他抗原结合序列，其中包含从非人免疫球蛋白中获得的最小序列。人源化抗体包括人免疫球蛋白受体抗体，其中来自受体互补决定区CDR的残基被来自非人物种供体抗体如具有与其特异性、亲和力和能力的小鼠、大鼠或兔子CDR的残基取代。在某些情况下，人类免疫球蛋白的Fv框架FR残基被相应的非人残基取代。人源化抗体可能还包括既非受体抗体、也非输入CDR或框架序列中发现的残基。一般来说，人源化抗体将包括几乎所有的至少一个、通常为二个可变域，其中，全部或几乎全部的CDR区域均对应于非人免疫球蛋白的区域并且全部或几乎全部的FR区域均为人免疫球蛋白相同序列的区域。理想情况是，人源化抗体还将包括至少免疫球蛋白恒定区Fc的一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区的一部分。人源化非人抗体的方法为本行业所熟知。一般来说，人源化抗体具有一个或多个从非人源头引入的氨基酸残基。这些非人氨基酸残基往往被称为“输入”残基，通常从“输入”可变域中获得。人源化基本上可以通过将啮齿动物CDR或CDR序列取代为相应的人抗体序列而完成。因此，这种“人源化”抗体为嵌合抗体美国4816567号专利，其中大大少于完整的人可变域被来自于非人物种的相应序列取代。在实践中，人源化抗体通常为人抗体，其中有些CDR残基以及可能的一些FR残基被来自啮齿动物抗体中的类似位点的残基取代。可使用免疫后在内源性免疫球蛋白产生缺失时能产生完整人抗体的转基因动物如：小鼠。例如，它被描述为，嵌合和种系突变小鼠中的抗体重链连接区域基因的纯合性缺失导致内源性抗体生成的完全抑制。在此种系变种小鼠中人种系免疫球蛋白基因数组的转移在抗原挑战后将导致人抗体的生成。人抗体也可在噬菌体展示库中产生。本发明的抗体优选为通过药用载体的形式给予受试者。通常，在制剂中使用适量的药用盐，以使制剂等渗。药用载体的例子包括生理盐水、林格氏液和葡萄糖溶液。溶液的pH值优选为约5至8，更优选为约7至7.5。此外，载体还包括缓释制剂，如：含有抗体的固体疏水性聚合物半透性基质，其中基质为有形物品形式，如：薄膜、脂质体或微粒。本行业的技术人员熟知，某些载体可能为更优选，取决于例如，抗体的给药途径和浓度。该抗体可通过注射如：静脉内、腹腔内、皮下、肌肉内或通过输注等其他方法给予受试者、患者或细胞，确保其以有效的形式传输到血液中。这些抗体也可以通过瘤内或瘤周途径给予，从而发挥局部和全身的治疗作用。局部或静脉注射为优选。抗体给药的有效剂量和时间表可根据经验确定，并且作出此类决定属本行业的技术范围内。本行业的技术人员会明白，必须给予的抗体剂量根据以下因素会有所不同，例如：接受抗体的受试者、给药途径、使用的抗体以及其他正在使用的药物的特定类型。单独使用的抗体的通常日剂量可能为约1μgkg至最多100mgkg体重或更多，这取决于上述因素。给予抗体，优选为治疗头颈鳞状细胞癌后，治疗抗体的疗效可通过技术人员熟知的不同方法评估。例如：接受治疗的受试者癌症的大小、数量和或分布可使用标准肿瘤成像技术进行监测。因治疗而给予的抗体与不给予抗体时的病程相比，可阻止肿瘤生长、导致肿瘤缩小、和或阻止新肿瘤的发展，这样的抗体是一种有效治疗癌症的抗体。本发明的另一方面提出了制备识别特异性肽-MHC复合物的可溶性T细胞受体sTCR的一种方法。这种可溶性T细胞受体可从特异性T细胞克隆中产生，并且它们的亲和力可以通过互补决定区靶向诱变而增加。为了T细胞受体选择之目的，可以使用噬菌体展示美国20100113300，Liddyetal.,2012。为了在噬菌体展示期间以及实际使用为药物时稳定T细胞受体之目的，可通过非天然二硫键、其他共价键单链T细胞受体或通过二聚化结构域连接α和β链Boulteretal.,2003；Cardetal.,2004；Willcoxetal.,1999。T细胞受体可以连接到毒素、药物、细胞因子参见US20130115191、域招募效应细胞，如抗CD3域等，以便对靶细胞执行特定的功能。此外，它可能表达于用于过继转移的T细胞。进一步的信息可在WO2004033685A1和WO2004074322A1中找到。sTCR的组合在WO2012056407A1中进行了描述。WO2013057586A1中公开了制备的进一步的方法。此外，可用本发明的肽和或TCR或抗体或其他结合分子在活检样本的基础上验证病理师对癌症的诊断。该抗体或TCR也可用于体内诊断实验。一般来说，抗体用放射性核素标记如：111In、99Tc、14C、131I、3H、32P或35S，从而可免疫闪烁扫描法使肿瘤局限化。在一实施方案中，其中的抗体或片段与两个或两个以上选自包括上述蛋白的组的蛋白质靶目标细胞外域结合，并且亲和力值Kd低于1x10μM。诊断用抗体可通过各种影像学方法使用适合检测的探针进行标记。探针检测方法包括但不限于，荧光、光、共聚焦和电镜方法；磁共振成像和光谱学技术；透视、计算机断层扫描和正电子发射断层扫描。合适的探针包括但不限于，荧光素、罗丹明、曙红及其它荧光团、放射性同位素、黄金、钆和其他稀土、顺磁铁、氟-18和其他正电子发射放射性核素。此外，探针可能是双功能或多功能的，并且用一种以上的上述方法可进行检测。这些抗体可用所述的探针直接或间接进行标记。抗体探针的连接，包括探针的共价连接、将探针融合入抗体、以及螯合化合物的共价连接从而结合探针、以及其他本行业熟知的方法。对于免疫组织化学方法，疾病组织样本可能是新鲜或冷冻或可能包埋于石蜡中以及用福尔马林等防腐剂固定。固定或包埋的切片包括与标记一抗和二抗接触的样本，其中该抗体用于检测原位蛋白的表达。本发明的另一方面包括一种体外制备激活的T细胞的方法，该方法包括将T细胞与载有抗原的人MHC分子在体外接触足够的一段时间，这些分子在合适的抗原提呈细胞表面表达，从而以抗原特异性方式激活T细胞，其中所述抗原为根据本发明所述的一种肽。优选情况是足够量的抗原与抗原提呈细胞一同使用。优选情况是，哺乳动物细胞的TAP肽转运载体缺乏或水平下降或功能降低。缺乏TAP肽转运载体的适合细胞包括T2、RMA-S和果蝇细胞。TAP是与抗原加工相关的转运载体。人体肽载入的缺陷细胞株T2从属美国菌种保藏中心ATCC,12301ParklawnDrive,Rockville,马里兰州20852，美国目录号CRL1992；果蝇细胞株Schneider2号株从属ATCC目录CRL19863；小鼠RMA-S细胞株Ljunggren等人描述过LjunggrenandKarre,1985。优选情况是，宿主细胞在转染前基本上不表达MHCI类分子。刺激因子细胞还优选为表达对T细胞共刺激信号起到重要作用的分子，如，B7.1、B7.2、ICAM-1和LFA3中的任一种分子。大量MHCI类分子和共刺激分子的核酸序列可从GenBank和EMBL数据库中公开获得。当MHCI类表位用作一种抗原时，T细胞为CD8阳性T细胞。如果抗原提呈细胞受到转染而表达这种表位，则优选的细胞包括一个表达载体，该载体有能力表达含SEQIDNO:1至SEQIDNO:91的肽或变体氨基酸序列。可使用其他一些方法来体外生成T细胞。例如，自体肿瘤浸润性淋巴细胞可用于生成CTL。Plebanski等人在Plebanskietal.,1995使用自体外周血淋巴细胞PLB制得T细胞。另外，也可能用肽或多肽脉冲处理树突状细胞或通过与重组病毒感染而制成自体T细胞。此外，B细胞可用于制备自体T细胞。此外，用肽或多肽脉冲处理或用重组病毒感染的巨噬细胞可用于配制自体T细胞。S.Walter等人在Walteretal.,2003中描述了通过使用人工抗原提呈细胞aAPC体外激活T细胞，这也是生成作用于所选肽的T细胞的一种合适方法。在本发明中，根据生物素：链霉素生物化学方法通过将预制的MHC：肽复合物耦合到聚苯乙烯颗粒微球而生成aAPC。该系统实现了对aAPC上的MHC密度进行精确调节，这使得可以在血液样本中选择地引发高或低亲合力的高效抗原特异性T细胞反应。除了MHC：肽复合物外，aAPC还应携运含共刺激活性的其他蛋白，如耦合至表面的抗-CD28抗体。此外，此类基于aAPC的系统往往需要加入适当的可溶性因子，例如，诸如白细胞介素12的细胞因子。也可用同种异体细胞制得T细胞，在WO9726328中详细描述了一种方法，以参考文献方式并入本文。例如，除了果蝇细胞和T2细胞，也可用其他细胞来提呈肽，如CHO细胞、杆状病毒感染的昆虫细胞、细菌、酵母、牛痘感染的靶细胞。此外，也可使用植物病毒例如，参阅Porta等人在Portaetal.,1994中描述了将豇豆花叶病毒开发为一种提呈外来肽的高产系统。被激活的T细胞直接针对本发明中的肽，有助于治疗。因此，本发明的另一方面提出了用本发明前述方法制得的激活T细胞。按上述方法制成的激活T细胞将会有选择性地识别异常表达含SEQIDNO:1至SEQIDNO91氨基酸序列的多肽。优选情况是，T细胞通过与其含HLA肽复合物的TCR相互作用如，结合而识别该细胞。T细胞是杀伤患者靶细胞方法中有用的细胞，其靶细胞异常表达含本发明中氨基酸序列的多肽。此类患者给予有效量的激活T细胞。给予患者的T细胞可能源自该患者，并按上述方法激活即，它们为自体T细胞。或者，T细胞不是源自该患者，而是来自另一个人。当然，优选情况是该供体为健康人。发明人使用“健康个体”是指一个人一般状况良好，优选为免疫系统合格，更优选为无任何可很容易测试或检测到的疾病。根据本发明，CD8-阳性T细胞的体内靶细胞可为肿瘤细胞有时表达MHC-II类抗原和或肿瘤周围的基质细胞肿瘤细胞有时也表达MHC-II类抗原；Dengjeletal.,2006。本发明所述的T细胞可用作治疗性组合物中的活性成分。因此，本发明也提出了一种杀伤患者靶细胞的方法，其中患者的靶细胞异常表达含本发明中氨基酸序列的多肽，该方法包括给予患者上述有效量的T细胞。发明人所用的“异常表达”的意思还包括，与正常组织表达水平相比，多肽过量表达，或该基因在肿瘤起源的组织中未表达而在肿瘤中表达。“过量表达”是指多肽水平至少为正常组织中的1.2倍；优选为至少为正常组织中的2倍，更优选为至少5或10倍。T细胞可用本领域已知的方法制得如，上述方法。T细胞继转移方案为本领域所熟知的方案。综述可发现于：Gattionietal.和Morganetal.Gattinonietal.,2006；Morganetal.,2006。本发明的另一个方面包括使用与MHC复合的肽，以生成T细胞受体，其核酸被克隆并被引入至宿主细胞，优选为T细胞。然后，该通过基因工程改变的T细胞可转给患者用于癌症治疗。本发明的任一分子即肽、核酸、抗体、表达载体、细胞，激活T细胞、T细胞受体或编码核酸都有益于治疗疾病，其特点在于细胞逃避免疫反应的打击。因此，本发明的任一分子都可用作药剂或用于制造药剂。这种分子可单独使用也可与本发明中的其他分子或已知分子联合使用。本发明还涉及一种试剂盒，其包括：a一个容器，包含上述溶液或冻干粉形式的药物组合物；b可选的第二个容器，其含有冻干粉剂型的稀释剂或重构液；和c可选的i溶液使用或ii重构和或使用冻干制剂的说明。该试剂盒还步包括一个或多个iii缓冲剂，iv稀释剂，v过滤液，vi针，或v注射器。容器最好是瓶子、小瓶、注射器或试管，可以为多用途容器。药物组合物最好是冻干的。本发明中的试剂盒优选包含一种置于合适容器中的冻干制剂以及重组和或使用说明。适当的容器包括，例如瓶子、西林瓶如双室瓶、注射器如双室注射器和试管。该容器可能由多种材料制成，如玻璃或塑料。试剂盒和或容器最好有容器或关于容器的说明书，指明重组和或使用的方向。例如，标签可能表明冻干剂型将重组为上述肽浓度。该标签可进一步表明制剂用于皮下注射。存放制剂的容器可使用多用途西林瓶，使得可重复给予例如，2-6次重组剂型。该试剂盒可进一步包括装有合适稀释剂如碳酸氢钠溶液的第二个容器。稀释液和冻干制剂混合后，重组制剂中的肽终浓度优选为至少0.15mgmL肽＝75μg，不超过3mgmL肽＝1500μg。该试剂盒还可包括商业和用户角度来说可取的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂，过滤液、针头、注射器和带有使用说明书的包装插页。本发明中的试剂盒可能有一个单独的容器，其中包含本发明所述的药物组合物制剂，该制剂可有其他成分例如，其他化合物或及其药物组合物，也可无其他成分，或者每种成分都有其不同容器。优选情况是，本发明的试剂盒包括与本发明的一种制剂，包装后与第二种化合物如佐剂例如GM-CSF、化疗药物、天然产品、激素或拮抗剂、抗血管生成剂或抑制剂、凋亡诱导剂或螯合剂或其药物组合物联合使用。该试剂盒的成分可进行预络合或每种成分在给予患者之前可放置于单独的不同容器。该试剂盒的成分可以是一种或多种溶液，优选为水溶液，更优选为无菌水溶液。该试剂盒的成分也可为固体形式，加入合适的溶剂后转换为液体，最好放置于另一个不同的容器中。治疗试剂盒的容器可能为西林瓶、试管、烧瓶、瓶子、注射器、或任何其他盛装固体或液体的工具。通常，当成分不只一种时，试剂盒将包含第二个西林瓶或其他容器，使之可以单独定量。该试剂盒还可能包含另一个装载药用液体的容器。优选情况是，治疗试剂盒将包含一个设备如，一个或多个针头、注射器、滴眼器、吸液管等，使得可注射本发明的药物本试剂盒的组合物。本发明的药物配方适合以任何可接受的途径进行肽给药，如口服肠道、鼻内、眼内、皮下、皮内、肌内，静脉或经皮给药。优选为皮下给药，最优选为皮内给药，也可通过输液泵给药。由于本发明的肽从头颈鳞状细胞癌中分离而得，因此，本发明的药剂优选用于治疗头颈鳞状细胞癌。本发明进一步涉及为个体患者制备个体化药物的一种方法，其中包括：制造含选自预筛选TUMAP存储库至少一种肽的药物组合物，其中药物组合物中所用的至少一种肽选择为适合于个体患者。在一项实施方案中，药物组合物为一种疫苗。该方法也可以改动以产生下游应用的T细胞克隆物，如：TCR隔离物或可溶性抗体和其他治疗选择。“个体化药物”是指专门针对个体患者的治疗，将仅用于该等个体患者，包括个体化活性癌症疫苗以及使用自体组织的过继细胞疗法。如本文所述，“存储库”应指已经接受免疫原性预筛查和或在特定肿瘤类型中过量提呈的一组或一系列肽。“存储库”一词并不暗示，疫苗中包括的特定肽已预先制造并储存于物理设备中，虽然预期有这种可能性。明确预期所述肽可以用于新制造每种个体化疫苗，也可能被预先制造和储存。存储库例如，数据库形式由肿瘤相关肽组成，其在各种HLA-AHLA-B和HLA-C等位基因头颈鳞状细胞癌患者的肿瘤组织中高度过度表达。其可能含有包括MHCI类和MHCII类肽或延长的MHCI类肽。除了从几种头颈鳞状细胞癌组织中采集的肿瘤相关肽外，存储库还可能包含HLA-A*02和HLA-A*24标记肽。这些肽可对TUMAP诱导的T细胞免疫进行量化比较，从而可得出疫苗抗肿瘤反应能力的重要结论。其次，在没有观察到来自患者“自身”抗原TUMAP的任何疫苗诱导的T细胞反应时，它们可作为来自“非自身”抗原的重要阳性对照肽。第三，它还可对患者的免疫功能状态得出结论。存储库的TUMAP通过使用一种功能基因组学方法进行鉴定，该方法结合了基因表达分析、质谱法和T细胞免疫学该方法确保了只选择真实存在于高百分比肿瘤但在正常组织中不表达或仅很少量表达的TUMAP用于进一步分析。对于初始肽的选择，患者头颈鳞状细胞癌样本和健康供体的血液以循序渐进的方法进行分析：1.肿瘤材料的HLA配体用质谱法确定；2.使用全基因组信使核糖核酸mRNA表达分析法用于确定恶性肿瘤组织小细胞肺癌与一系列正常器官和组织相比过度表达的基因；3.确定的HLA配体与基因表达数据进行比较。肿瘤组织上过度提呈或选择性提呈的肽，优选为第2步中检测到的选择性表达或过量表达基因所编码的考虑为多肽疫苗的合适候选TUMAP；4.文献检索以确定更多证据以支持确认为TUMP的肽的相关性；5.mRNA水平过度表达的相关性通过由第3步选定的在肿瘤组织上的TUMAP的重新检测以及在健康组织上的缺乏或低频率而确定；6.为了评估通过选定的肽诱导体内T细胞反应是否可行，使用健康供体以及小细胞肺癌患者的人T细胞进行体外免疫原性测定。一方面，在将所述肽加入存储库之前，对其进行筛查以了解免疫原性。举例来说但不限于此，纳入存储库的肽的免疫原性的确定方法包括体外T细胞激活，具体为：用装载肽MHC复合物的人工抗原提呈细胞和抗CD28抗体反复刺激来自健康供体的CD8+T细胞。这种方法优选用于罕见癌症以及有罕见表达谱的患者。与含目前开发为固定组分的多肽鸡尾酒相反的是，存储库可将肿瘤中抗原的实际表达于疫苗进行更高程度的匹配。在多目标方法中，每名患者将使用几种“现成”肽的选定单一肽或组合。理论上来说，基于从50抗原肽库中选择例如5种不同抗原肽的一种方法可提供大约170万种可能的药物产品DP组分。在一方面，使用本发明此处或后文所述的方法，基于个体患者的适合性，选择所述肽以包含在疫苗中。HLA表型、转录和肽组学资料从患者的肿瘤材料和血液样本中收集，以确定最合适每名患者且含有“存储库”和患者独特即突变TUMAP的肽。将选择的那些肽选择性地或过度表达于患者肿瘤中，并且可能的情况下，如果用患者个体PBMC进行检测，则表现出很强的体外免疫原性。优选的情况是，疫苗所包括的肽的一种确定方法包括：a识别由来自个体患者肿瘤样本提呈的肿瘤相关肽TUMAP；b将a中鉴定的肽与上述肽的存储库数据库进行比对；且c从存储库数据库中选择与患者中确定的肿瘤相关肽相关的至少一种肽。例如，肿瘤样本提呈的TUMAP的鉴定方法有：a1将来自肿瘤样本的表达数据与所述肿瘤样本组织类型相对应的正常组织样本的表达数据相比对，以识别肿瘤组织中过量表达或异常表达的蛋白；以及a2将表达数据与结合到肿瘤样本中I类MHC和或II类分子的MHC配体序列相关联，以确定来源于肿瘤过量表达或异常表达的蛋白质的MHC配体。优选情况是，MHC配体的序列的确定方法是：洗脱来自肿瘤样本分离的MHC分子结合肽，并对洗脱配体进行测序。优选情况是，肿瘤样本和正常组织从同一患者获得。除了使用存储库数据库模型选择肽以外，或作为一种替代方法，TUMAP可能在新患者中进行鉴定，然后列入疫苗中。作为一种实施例，患者中的候选TUMAP可通过以下方法进行鉴定：a1将来自肿瘤样本的表达数据与所述肿瘤样本组织类型相对应的正常组织样本的表达数据相比对，以识别肿瘤组织中过量表达或异常表达的蛋白；以及a2将表达数据与结合到肿瘤样本中I类MHC和或II类分子的MHC配体序列想关联，以确定来源于肿瘤过量表达或异常表达的蛋白质的MHC配体。作为另一实施例，蛋白的鉴定方法为可包含突变，其对于肿瘤样本相对于个体患者的相应正常组织是独特的，并且TUMAP可通过特异性靶向作用于变异来鉴定。例如，肿瘤以及相应正常组织的基因组可通过全基因组测序方法进行测序：为了发现基因蛋白质编码区域的非同义突变，从肿瘤组织中萃取基因组DNA和RNA，从外周血单核细胞PBMC中提取正常非突变基因组种系DNA。运用的NGS方法只限于蛋白编码区的重测序外显子组重测序。为了这一目的，使用供货商提供的靶序列富集试剂盒来捕获来自人样本的外显子DNA，随后使用HiSeq2000Illumina公司进行测序。此外，对肿瘤的mRNA进行测序，以直接定量基因表达，并确认突变基因在患者肿瘤中表达。得到的数以百万计的序列读数通过软件算法处理。输出列表中包含突变和基因表达。肿瘤特异性体突变通过与PBMC衍生的种系变化比较来确定，并进行优化。然后，为了存储库可能测试新确定的肽了解如上所述的免疫原性，并且选择具有合适免疫原性的候选TUMAP用于疫苗。在一个示范实施方案中，疫苗中所含肽通过以下方法确定：a用上述方法识别由个体患者肿瘤样本提呈的肿瘤相关肽TUMAP；b将a中鉴定的肽与肿瘤中与相应的正常组织相比经过免疫原性和过量提呈预筛查的肽库进行比对；c从存储库中选择与患者中确定的肿瘤相关肽相关的至少一种肽；及d可选地选择至少一种在a中新确定的肽，确认其免疫原性。在一个示范实施方式中，疫苗中所含肽通过以下方法确定：a识别由来自个体患者肿瘤样本提呈的肿瘤相关肽TUMAP；以及b在a中选择至少一种新确定的肽，并确认其免疫原性。一旦选定了用于个体化肽疫苗的肽时，则产生疫苗。该疫苗优选为一种液体制剂，包括溶解于20-40％DMSO之间，优选为约30-35％DMSO，例如，约33％DMSO中的个体肽。列入产品的每种肽都溶于DMSO中。单个肽溶液浓度的选择取决于要列入产品中的肽的数量。单肽-DMSO溶液均等混合，以实现一种溶液中包含所有的肽，且浓度为每肽～2.5mgml。然后该混合溶液按照1：3比例用注射用水进行稀释，以达到在33％DMSO中每肽0.826mgml的浓度。稀释的溶液通过0.22μm无菌筛检程序进行过滤。从而获得最终本体溶液。最终本体溶液填充到小瓶中，在使用前储存于-20℃下。一个小瓶包含700μL溶液，其中每种肽含有0.578mg。其中的500μL每种肽约400μg将用于皮内注射。本发明的肽除了用于治疗癌症，也可用于诊断。由于肽由头颈鳞状细胞癌细胞产生，并且已确定这些肽在正常组织中不存在或水平较低，因此这些肽可用于诊断癌症是否存在。血液样本中组织活检物含权利要求的肽，可有助于病理师诊断癌症。用抗体、质谱或其他本领域内已知的方法检测某些肽可使病理师判断该组织样本为恶性的还是炎症或一般病变，也可用作头颈鳞状细胞癌的生物标志物。肽基团的提呈使得能对病变组织进行分类或进一步分成子类。对病变标本中肽的检测使得能对免疫系统治疗方法的利益进行判断，特别是如果T-淋巴细胞已知或预计与作用机制有关。MHC表达的缺失是一种机制，充分说明了哪些受感染的恶性细胞逃避了免疫监视。因此，肽的提呈表明，分析过的细胞并没有利用这种机制。本发明的肽可用于分析淋巴细胞对肽的反应如T细胞反应，或抗体对肽或MHC分子络合的肽发生的反应。这些淋巴细胞反应可以作为预后指标，决定是否采取进一步的治疗。这些反应也可以用作免疫疗法中的替代反应指标，旨在以不同方式诱导淋巴细胞反应，如接种蛋白疫苗、核酸、自体材料、淋巴细胞过继转移。基因治疗中，淋巴细胞对肽发生的反应可以在副作用的评估中考虑。淋巴细胞反应监测也可能成为移植疗法随访检查中的一种有价值的工具，如，用于检测移植物抗宿主和宿主抗移植物疾病。下列描述优选方案的实施例将对本发明进行说明，并参照随附图表但是不仅限于此。考虑到本发明的目的，文中引用的所有参考文献通过引用的方式并入在本文中。附图说明图1A至1D显示了正常组织白色柱和和头颈鳞状细胞癌黑色柱中各种肽的过量提呈。图1A基因符号：KRT6C、KRT6A、KRT6B，肽：GLAGGFGGPGFPVSEQIDNO.:1；从左至右的组织：6脂肪组织，8肾上腺，1胆管，24血细胞，15血管，10骨髓，15大脑，7乳房，11食管，2眼睛，6胆囊，16心脏，17肾脏，27大肠，24肝，49肺，7淋巴结，12神经，5卵巢，15胰腺，6甲状旁腺，3腹膜，7垂体腺，10胎盘，3胸膜，11前列腺，9骨骼肌，11皮肤，16小肠，13脾，9胃，8睾丸，3胸腺，8甲状腺，18气管，7输尿管，8膀胱，6子宫，12头颈部，17HNSCC。图1B基因符号：KRT、KRT6A、KRT6B，肽：SLYGLGGSKRISISEQIDNO.:3；从左至右的组织：6脂肪组织，8肾上腺，1胆管，24血细胞，15血管，10骨髓，15大脑，7乳房，11食管，2眼睛，6胆囊，16心脏，17肾脏，27大肠，24肝，49肺，7淋巴结，12神经，5卵巢，15胰腺，6甲状旁腺，3腹膜，7垂体腺，10胎盘，3胸膜，11前列腺，9骨骼肌，11皮肤，16小肠，13脾，9胃，8睾丸，3胸腺，8甲状腺，18气管，7输尿管，8膀胱，6子宫，12头颈部，17HNSCC。图1C基因符号：KRT5，肽：STASAITPSVSEQIDNO.:9；从左至右的组织：6脂肪组织，8肾上腺，1胆管，24血细胞，15血管，10骨髓，15大脑，7乳房，11食管，2眼睛，6胆囊，16心脏，17肾脏，27大肠，24肝，49肺，7淋巴结，12神经，5卵巢，15胰腺，6甲状旁腺，3腹膜，7垂体腺，10胎盘，3胸膜，11前列腺，9骨骼肌，11皮肤，16小肠，13脾，9胃，8睾丸，3胸腺，8甲状腺，18气管，7输尿管，8膀胱，6子宫，12头颈部，17HNSCC。图1D基因符号：SLC25A3，肽：FVAGYIAGVSEQIDNO.:61；从左至右的组织：3细胞系2肾脏，1胰腺，7正常组织1肾上腺，1结肠，2淋巴结，1胎盘，2脾，36癌组织5白细胞白血病，3脑癌，1食管癌，1胆囊癌，5头颈癌，1肾癌，1肝癌，8肺癌，4淋巴结癌，3卵巢癌，2胃癌。图1E至1Q显示了各种肽在不同癌症组织中的过度提呈黑点。上面部分：根据技术重复测量值的中值MS信号强度绘制为点，单一HLA-A*02阳性正常组织为灰色点，检测到该肽的肿瘤样本为黑点。肿瘤和正常样本按照器官起源分组，箱须图代表了多个样本归一化信号强度的中位数，第25和第75百分位箱以及最小值和最大值须。正常器官根据风险类别排列顺序血细胞、血管、脑、肝、肺：高风险，灰色点；生殖器官、乳腺、前列腺：低风险，灰色点；所有其他器官：中等风险；灰色点。下面部分：每个器官的相对肽检测频率显示为脊柱图。图表下面的数字表示每个器官分析的总样本数中检测到肽的样本数正常样本N＝526，肿瘤样本N＝562。如果在一个样本上检测到肽，但因技术原因无法量化，则该样本纳入检测频率图中，但图表上部分不显示任何点。组织从左到右：正常样本：血细胞；bloodvess血管；脑；心；肝；肺；脂肪脂肪组织；adren.gl.肾上腺；胆管；膀胱；BM骨髓；软骨；esoph食管；眼；gallb胆囊；头颈部；肾；large_int大肠；LN淋巴结；神经；胰腺；parathyr甲状旁腺；perit腹膜；pituit垂体；胸膜；skel.mus骨骼肌；皮肤；small_int小肠；脾；胃；甲状腺；气管；输尿管；乳房；卵巢；胎盘；前列腺；睾丸；胸腺；子宫。肿瘤样本：AML：急性骨髓性白血病；BRCA：乳腺癌；CCC：胆管细胞癌；CLL：慢性淋巴细胞性白血病；CRC：结直肠癌；GBC：胆囊癌；GBM：胶质母细胞瘤；GC：胃癌；GEJC：胃贲门食管癌；HCC：肝细胞癌；HNSCC：头颈癌；MEL：黑色素瘤；NHL：非霍奇金淋巴瘤；NSCLC：非小细胞肺癌；OC：卵巢癌；OSCAR：食管癌；PACA：胰腺癌；PRCA：前列腺癌；RCC：肾细胞癌；SCLC：小细胞肺癌；UBC：膀胱癌；UEC：子宫内膜癌。图1E基因符号：KRT6C、KRT6A、KRT1、KRT6B、KRT75、KRT5，肽：PVCPPGGIQEVSEQIDNO:2，图1F基因符号：PKP1，肽：SMLNNIINLSEQIDNO:15，图1G基因符号：PRKDC，肽：GLIEWLENTVSEQIDNO:45，图1H基因符号：ATP5G2、ATP5G1、ATP5G3，肽：AILGFALSEASEQIDNO:57，图1I基因符号：ITGB4，肽：SLSDIQPCLSEQIDNO:58，图1J基因符号：KRT5，肽：ALMDEINFMKMSEQIDNO:63，图1K基因符号：ESRP2，肽：ALASAPTSVSEQIDNO:75，图1L基因符号：PARP9，肽：ILFDEVLTFASEQIDNO:76，图1M基因符号：MCM4，肽：QLLQYVYNLSEQIDNO:83，图1N基因符号：FHAD1，肽：QLIEKITQVSEQIDNO:85，图1O基因符号：PLEC，肽：ALPEPSPAASEQIDNO:87，图1P基因符号：G3BP1，肽：TLNDGVVVQVSEQIDNO:90，图1Q基因符号：ODC1，肽：MLFENMGAYTVSEQIDNO.:91。图2A至C显示了本发明的源基因的代表性表达特征，这些基因在一系列正常组织白色柱的头颈鳞状细胞癌中以及15个头颈鳞状细胞癌样本黑色柱中高度过度表达或专门表达。图2A基因符号：PGLYRP4，肽：AIYEGVGWNVSEQIDNO:33；图2B基因符号：PAPL，肽：KLLPGVQYVSEQIDNO:38；图2C基因符号：LGALS7、LGALS7B，肽：RLVEVGGDVQLSEQIDNO.:53。图3显示了示例性的免疫原性资料：肽特定多聚体染色后流式细胞仪结果。图4显示健康HLA-A*02+供体的肽特异性CD8+T细胞体外反应的示例性结果。CD8+T细胞制备的方法为：使用抗CD28mAb和HLA-A*02涂层的人工APC分别与SeqIDNO.:17肽A，左图、SeqIDNO.:28肽B，左图和SeqIDNO.:29肽C，左图合成。经过12个周期的刺激后，用A*02SeqIDNO.:17A、A*02SeqIDNO.:28B或A*02SeqIDNO.:29C的2D多聚体染色法对肽反应性细胞进行检测。右图A、B和C显示用不相关A*02肽复合体刺激的细胞对照染色。活单细胞在CD8+淋巴细胞上得到门控。Boolean门控帮助排除用不同肽特定的多聚体检测的假阳性事件。提示了特异性多聚体+细胞和CD8+淋巴细胞的频率。实施例实施例1细胞表面提呈的肿瘤相关肽的识别和定量组织样本患者的肿瘤组织获得自：AsterandDetroit,MI,美国&Royston,Herts,英国、ProteoGenexInc.CulverCity,CA,美国。正常组织获得自AsterandDetroit,MI,美国&Royston,Herts,英国、Bio-OptionsInc.Brea,CA,美国、BioServeBeltsville,MD,美国、CapitalBioScienceInc.Rockville,MD,美国、GeneticistInc.Glendale,CA,美国、京都府立医科大学KPUMKyoto,日本、ProteoGenexInc.CulverCity,CA,美国、TissueSolutionsLtdGlasgow,英国、日内瓦大学医院Geneva,瑞士、海德堡大学医院Heidelberg,德国、慕尼黑大学医院Munich,德国、蒂宾根大学医院Tübingen,德国。所有患者在手术或尸检前都获得了书面知情同意。切除后组织立即进行冷休克处理，在分离TUMAP前储存于-70℃或以下。从组织样本中分离HLA肽根据方案Falketal.,1991；Seegeretal.,1999略加修改，使用HLA-A*02特异性抗体BB7.2、HLA-A、HLA-B、HLAC特异性抗体W632、CNBr活化的琼脂糖凝胶、酸处理和超滤方法以免疫沉淀法从实体组织中获得了冷冻组织样本的HLA肽库。质谱分析获得的HLA肽库根据其疏水性用反相色谱nanoAcquityUPLCsystem,Waters分离，洗脱肽用装有电喷雾源的LTQ-velos融合杂交质谱ThermoElectron进行了分析。肽库被直接加载填充有1.7μmC18反相材料Waters的分析用熔炼石英微毛细管柱75μm内径x250mm，应用流速为400nL每分钟。随后，使用来自流速为300nL每分钟、浓度为10％至33％溶剂B中的两步180分钟二元梯度法对肽进行分离。梯度由溶剂A含0.1％甲酸的水和溶剂B含0.1％甲酸的乙腈。金镀膜玻璃毛细管PicoTip,NewObjective用于引入到纳升电喷雾源。使用前5TOP5策略在数据依赖模式下操作LTQ-Orbitrap质谱仪。简言之，首先以高精确质量完全扫描在orbitrap开始一个扫描周期R＝30000，之后用先前选定离子的动态排除技术在orbitrap中对5种含量最为丰富的前体离子进行MSMS扫描R＝7500。串联质谱以SEQUEST和另一种手动控制器进行解读。生成的自然肽破碎模式与合成序列相同参考肽的破碎模式进行比较后，确保了被识别的肽序列。无标记相对LC-MS定量通过离子计数即通过LC-MS功能提取和分析来进行Muelleretal.,2007。该方法假定肽的LC-MS信号区域与样本中其丰度相关。提取的特征通过充电状态去卷积和保留时间校准进行进一步处理Muelleretal.,2008；Sturmetal.,2008。最后，所有的LC-MS特征与序列鉴定结果交叉引用，以将不同样本和组织的定量数据与肽呈递特征结合。定量数据根据集中数据以两层方式进行正态化处理，以说明技术和生物学复制变异。因此，每个被识别的肽均可与定量资料相关，从而可得出样本和组织之间的相对定量。此外，对候选肽获得的所有定量数据进行手动检查，以确保数据的一致性，并验证自动化分析的准确度。对于每种肽，计算了提呈图，其显示样本平均提呈量以及复制变化。这些特征使头颈鳞状细胞癌样本与正常组织样本的基线值并列。示范性过度提呈肽的提呈谱示于图1中。示范性肽的提呈分数见表8。表8：提呈分数。该表列出了与一系列正常组织相比在肿瘤上非常高度过量提呈+++、与一系列正常组织相比在肿瘤上高度过量提呈++或与一系列正常组织相比在肿瘤上过量提呈+的HLA-A*02肽。被认为与肿瘤比较相关的一系列正常组织组包括：脂肪组织、肾上腺、胆管、血细胞、血管、骨髓、脑、食道、眼、胆囊、头颈部、心脏、肾、大肠、肝、肺、淋巴结、神经、胰腺、甲状旁腺、腹膜、垂体、胸膜、骨骼肌、皮肤、小肠、脾、胃、甲状腺、气管、输尿管、膀胱。实施例2编码本发明肽的基因的表达谱与正常细胞相比在肿瘤细胞上一种肽过度提呈或特定提呈足够其在免疫治疗中有效使用，一些肽为肿瘤特异性的，尽管存在其源蛋白也存在于正常组织中。但是，mRNA表达谱增加了免疫治疗目标肽选择中其他级别的安全性。特别是对于具有高安全性风险的治疗选择，诸如亲和力成熟的TCR，理想的目标肽将来源于对该肿瘤独一无二且不出现于正常组织中的蛋白。RNA来源与制备手术切除组织标本按如上所述参见实施例1在获得每名患者的书面知情同意后提供。手术后立即速冻肿瘤组织标本，之后在液态氮中用杵臼匀浆。使用TRI试剂Ambion公司,Darmstadt，德国之后用RNeasyQIAGEN公司，Hilden，德国清理从这些样本中制备总RNA；这两种方法都根据制造商的方案进行。用于RNASeq实验来自健康人体组织的总RNA获得自：AsterandDetroit，MI，美国&Royston，Herts，英国、BioCatGmbHHeidelberg，德国、Bio-OptionsInc.Brea，CA，美国、BioServeBeltsville，MD，美国、CapitalBioScienceInc.Rockwell，MD，美国、GeneticistInc.Glendale，CA，美国、IstitutoNazionaleTumori“Pascale”Naples，意大利、ProteoGenexInc.CulverCity，CA，美国、海德堡大学医院Heidelberg、德国。用于RNASeq实验来自肿瘤组织的总RNA获得自：AsterandDetroit，MI，美国&Royston，Herts，英国、ProteoGenexInc.CulverCity，CA，美国。所有RNA样品的质量和数量在Agilent2100生物分析仪Agilent，Waldbronn，德国上使用RNA6000PicoLabChip试剂盒Agilent评估。RNA序列实验通过新一代测序技术RNAseq由CeGaTTübingen,德国对肿瘤和正常组织的RNA样本进行基因表达分析。简言之，根据供货商的方案IlluminaInc.,SanDiego,CA,美国，其中包括RNA碎片化、cDNA转化和测序适配器的加入，利用IlluminaHiSeqv4试剂盒准备测序文库。从多个样本获得的文库根据制造商的说明等摩尔混合并在IlluminaHiSeq2500序列发生器上测序，产生50bp的单端读数。处理的读数使用STAR软件映像至人类基因组GRCh38。根据ENSEMBL序列数据库的说明Ensembl77，表达数据在转录水平设置为RPKM每百万映射读数每千碱基读数，由Cufflinks软件生成并在外显子水平上设置总读数，由Bedtools软件生成。外显子读数被归为外显子长度和校准尺寸，以获得RPKM值。本发明的代表性源基因在头颈鳞状细胞癌中高度过量表达的表达谱如图2所示。进一步代表性基因的表达分数见表9。表9：表达分数。该表列出了与一系列正常组织相比在肿瘤上非常高度过量表达+++、与一系列正常组织相比在肿瘤上高度过量表达++或与一系列正常组织相比在肿瘤上过量表达+的基因的肽。本基线得分根据以下相关正常组织的测量值计算：脂肪组织、肾上腺、动脉、胆管、血细胞、骨髓、脑、软骨、结肠、食道、眼、胆囊、头颈部和唾液腺、心脏、肾、肝、肺、淋巴结、胰腺、甲状旁腺、外周神经、腹膜、垂体腺、胸膜、直肠、骨骼肌、皮肤、小肠、脾、胃、甲状腺、气管、输尿管、膀胱、静脉。如果获得同一组织类型几个样本的表达数据，则使用各样本的算术平均值进行计算。实施例3MHC-I类提呈肽的体外免疫原性为了获得关于本发明TUMAP的免疫原性信息，发明人使用体外T细胞扩增分析方法进行了研究，其中该分析方法基于使用装载肽MHC复合物和抗CD28抗体的人工抗原提呈细胞aAPC进行反复刺激。用这种方法，发明人可显示，本发明的HLA-A*0201限制TUMAP具有免疫原性，这表明这些肽为对抗人CD8+前体T细胞的T细胞表位表10。CD8+T细胞体外启动为了用载有肽-MHC复合物pMHC和抗CD28抗体的人工抗原提呈细胞进行体外刺激，发明人首先从德国UniversityclinicsMannheim中获取健康供体CD8微珠MiltenyiBiotech,Bergisch-Gladbach,德国通过积极选择白细胞清除术后新鲜HLA-A*02产物而分离出CD8+T细胞。PBMC和分离出的CD8+淋巴细胞使用前在T细胞培养基TCM中培养，培养基包括RPMI-GlutamaxInvitrogen公司，Karlsruhe，德国并补充10％热灭活人AB血清PAN-Biotech公司，Aidenbach，德国、100Uml青霉素100μgml链霉素Cambrex公司，Cologne，德国，1mM丙酮酸钠CCPro公司，Oberdorla，德国和20μgml庆大霉素Cambrex公司。在此步骤，2.5ngml的IL-7PromoCell公司，Heidelberg，德国和10Uml的IL-2NovartisPharma公司，Nürnberg，德国也加入TCM。对于pMHC抗-CD28涂层珠的生成、T细胞的刺激和读出，使用每刺激条件四个不同pMHC分子以及每个读出条件8个不同的pMHC分子在高度限定的体外系统中进行。纯化的共刺激小鼠IgG2a抗人CD28抗体9.3Jungetal.,1987使用制造商Perbio公司，波恩，德国推荐的N-羟基琥珀酰亚胺生物素进行化学生物素化处理。所用珠为5.6μm的链霉抗生物素蛋白包裹的多聚苯乙烯颗粒BangsLabooratories，伊利诺伊州，美国。用于阳性和阴性对照刺激物的pMHC分别为A*0201MLA-001从Melan-AMART-1中修饰制得的肽ELAGIGILTVSEQIDNO:157和A*0201DDX5-001从DDX5中获得的YLLPAIVHISEQIDNO:158。800.000珠200μl包裹于含有4x12.5ng不同生物素-pMHC的96孔板、进行洗涤，随后加入体积为200μl的600ng生物素抗-CD28。在37℃下，在含5ngmlIL-12PromoCell的200μlTCM中共培养1x106CD8+T细胞与2x105的清洗涂层珠3天，从而启动刺激。之后，一半培养基与补充80UmlIL-2的新鲜TCM进行交换，并且培养在37℃下持续4天。这种刺激性周期总共进行3次。对于使用每条件8种不同pMHC分子的pMHC多聚体读出，二维组合编码方法如前述使用Andersenetal.,2012，稍作修饰，涵盖耦合至5种不同的荧光染料。最后，用LivedeadnearIR染料Invitrogen公司，Karlsruhe，德国、CD8-FITC抗体克隆SK1BD公司，Heidelberg，德国和荧光pMHC多聚体而执行多聚体分析。对于分析，使用了配有合适激光仪和筛检程序的BDLSRIISORP细胞仪。肽特异性细胞以占总CD8+细胞的百分比形式进行计算。多聚体分析结果使用FlowJo软件TreeStar公司，Oregon，美国进行评估。特定多聚体+CD8+淋巴细胞的体外填装用与阴性对照刺激组比较而进行检测。如果健康供体中的至少一个可评价的体外刺激孔在体外刺激后发现含有特异性CD8+T细胞株即该孔包含至少1％特定多聚体+CD8+T细胞，并且特定多聚体+的百分比至少为阴性对照刺激中位数的10倍，则检测给定抗原的免疫原性。头颈鳞状细胞癌肽体外免疫原性对于受到测试的HLA-I类肽，可通过肽特异性T细胞株的生成证明其体外免疫原性。TUMAP特异性多聚体对本发明的2种肽染色后流式细胞仪检测的典型结果如图3所示，同时也含有相应的阴性对照信息。TUMAP特异性多聚体对本发明的3种肽染色后流式细胞仪检测的其他典型结果如图4所示，同时也含有相应的阴性对照信息。本发明17种肽的结果汇总于表10A。本发明17种肽的其他结果汇总于表10B。表10A：本发明中HLAI类肽的体外免疫原性申请人对本发明的肽所做的体外免疫原性实验的示例性结果。＝70％＝++++序列ID号肽代码序列孔供体98RAD54B-001SLYKGLLSV++++++101C4orf36-001GLLPSAESIKL+++++105KRT-010STYGGGLSV+++++108KRT5-001SLYNLGGSKRISI+++++109IGF2BP3-001KIQEILTQV++++113PKP1-002NLMASQPQL+++++++114TP6-001VLVPYEPPQV+++++118KRT-006TLLQEQGTKTV+++123GJB5-001LLSGDLIFL++++++127FHL2-001SLFGKKYIL++++++135DNMT3B-001GLFSQHFNL+++137LOC-002GLAPFLLNAV+++++143FAP-003YVYQNNIYL+++145TMEM222-001LLYGKYVSV++++++147DNMT1-001ILMDPSPEYA+++++++150NLRP2-001ILAEEPIYIRV+++++++154BDH1-001KMWEELPEVV+++++表10B：本发明中HLAI类肽的体外免疫原性申请人对本发明的HLA-A*02限制肽所做的体外免疫原性实验的示例性结果。提示了体外免疫原性实验的结果。阳性孔和供体其他可评价的百分比概括为＝70％＝++++实施例4肽的合成所有的肽通过使用Fmoc策略以标准、广为接受的固相肽合成法合成。每个肽的身份和纯度已使用质谱和RP-HPLC分析法确定。用冻干法三氟乙酸盐获得白色至类白色的肽，纯度为50％。所有的TUMAP优选作为三氟乙酸盐或乙酸盐进行给药，其他药用盐形式也可以。实施例5MHC结合测定本发明基于T细胞疗法的候选肽进一步测试其MHC结合能力亲和性。单个肽-MHC复合体通过UV-配体交换产生，其中，紫外线敏感肽经紫外线照射后裂解，与分析的相关肽交换。只有能够有效地结合并稳定肽接受MHC分子的候选肽才能阻止MHC复合物的解离。为了确定交换反应的产率，将基于稳定MHC复合物轻链β2m的检测结果进行ELISA测定。检测总体上按照Rodenko等人在Rodenkoetal.,2006中描述的方法进行。96孔MAXISorp板NUNC在室温下在PBS中以2ugml链霉包被过夜，四次洗涤并在37℃下在含封闭缓冲液的2％BSA中封闭1小时。折迭的HLA-A*02:01MLA-001单体作为标准品，涵盖15-500ngml的范围。紫外线交换反应的肽-MHC单体在封闭缓冲液中稀释100倍。样本在37℃下孵育1小时，洗涤四次，在37℃下以2ugmlHRP缀合抗-β2m温育1小时，再次洗涤，并以NH2SO4封堵的TMB溶液进行检测。在450nm处测量吸收。在生成和产生抗体或其片段时和或T细胞受体或其片段时，通常优选显示为高交换产率优选为高于50％，最优选为高于75％的候选肽，这是因为它们对MHC分子表现出足够的亲合力，并能防止MHC复合体的解离。表11：MHC-I类结合分数。HLA-I类限制肽与HLA-A*02:01的结合根据肽交换产量分类：10％＝+；20％＝++；50＝+++；75％＝++++参考文献列表Abdel-Ghany,M.etal.,JBiolChem2762001:25438-25446Abdelmagid,S.A.etal.,JCellBiochem.1122011:1084-1092Adhikary,G.etal.,PLoS.One.82013:e84324Aguiar,R.C.etal.,JBiolChem2802005:33756-33765Ahmed,N.etal.,BiolChem3972016:1265-1276Ai,R.etal.,GeneExpr.112003:35-45Aisa,Y.etal.,Int.JHematol.822005:266-269Aizawa,S.etal.,JOralSci.562014:209-214Akbari,M.R.etal.,Hum.Genet.1292011:573-582Akhtar,AliM.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A1122015:7743-7748Albergaria,A.etal.,Int.JDev.Biol552011:811-822Allison,J.P.etal.,Science2701995:932-933Alrawi,S.J.etal.,AnticancerRes262006:107-119Ammendola,M.etal.,Biomed.ResInt.20142014:154702Andersen,R.S.etal.,Nat.Protoc.72012:891-902Andersson,L.,ColdSpringHarb.Symp.Quant.Biol742009:319-325Andersson,L.etal.,Transcription.12010:144-148Annibaldi,A.etal.,PLoS.One.62011:e29024Apostolopoulou,M.etal.,PLoS.One.72012:e33289Appay,V.etal.,Eur.JImmunol.362006:1805-1814Arif,Q.etal.,Arch.Pathol.LabMed.1392015:978-980Attallah,A.M.etal.,Tumour.Biol362015:7667-7674Baak,J.P.etal.,JClinPathol.592006:1017-1028Bachmann,S.B.etal.,MolCancer132014:125Baglo,Y.etal.,PLoS.One.82013:e65200Bailey,C.M.etal.,JCellPhysiol2092006:617-624Balakrishnan,A.etal.,GenesChromosomes.Cancer452006:883-892Baluchamy,S.etal.,InVitroCellDev.BiolAnim462010:718-725Banchereau,J.etal.,Cell1062001:271-274Bao,L.etal.,CellBiolToxicol.322016:419-435Bar-Shavit,R.etal.,MethodsCellBiol1322016:341-358Barach,Y.S.etal.,TrendsMol.Med172011:47-55Barilli,A.etal.,JLeukoc.Biol902011:293-303Barry,G.S.etal.,Oncotarget.72016:18953-18964Bauml,J.M.etal.,Ther.Adv.Med.Oncol82016:168-175Bausch,D.etal.,ClinCancerRes172011:302-309Beatty,G.etal.,JImmunol1662001:2276-2282Beggs,J.D.,Nature2751978:104-109Benjamini,Y.etal.,JournaloftheRoyalStatisticalSociety.SeriesBMethodological,Vol.571995:289-300Benzon,B.etal.,ProstateCancerProstatic.Dis.2016Binai,N.A.etal.,Endocrine.442013:496-503Blanckaert,V.etal.,Int.JOncol462015:2649-2655Bongiovanni,L.etal.,Vet.Dermatol.252014:138-140Bonitsis,N.etal.,Exp.Oncol282006:187-193Bottino,C.etal.,FrontImmunol.52014:56Bouameur,J.E.etal.,JInvestDermatol.1342014:885-894Boulter,J.M.etal.,ProteinEng162003:707-711Boyero,L.etal.,Int.JMedSci.102013:1166-1173Braumuller,H.etal.,Nature2013Brendle,A.etal.,Carcinogenesis292008:1394-1399Broderick,P.etal.,CancerRes692009:6633-6641Brosens,R.P.etal.,JPathol.2212010:411-424Brossart,P.etal.,Blood901997:1594-1599Bruckdorfer,T.etal.,Curr.Pharm.Biotechnol.52004:29-43Bruna,F.etal.,StemCellRes182017:5-13Bryan,R.T.,Philos.Trans.RSoc.LondBBiolSci.3702015:20140042Bryan,R.T.etal.,JUrol.1842010:423-431Bu,W.etal.,Oncogene302011:4399-4409Bustin,S.A.etal.,DNACellBiol202001:331-338Buttner,S.etal.,EMBOJ302011:2779-2792Cada,Z.etal.,Histol.Histopathol.242009:41-48Camicia,R.etal.,JCellSci.1262013:1969-1980Camicia,R.etal.,Mol.Cancer142015:207Campione,E.etal.,DrugDesDevel.Ther.92015:5843-5850Camps,J.etal.,CancerRes732013:2003-2013Canto,I.etal.,Mini.RevMedChem122012:804-811Card,K.F.etal.,CancerImmunolImmunother.532004:345-357Cazier,J.B.etal.,NatCommun.52014:3756Chang,H.H.etal.,Cancer1172011:353-360Chanock,S.J.etal.,Hum.Immunol.652004:1211-1223Chanthammachat,P.etal.,Arch.OralBiol582013:1677-1685Chen,J.etal.,Int.JClinExp.Pathol.82015:2026-2032Chen,L.etal.,Oncotarget.2016Chen,Q.etal.,PLoS.One.92014:e88386Chien,A.J.etal.,BreastCancerResTreat.1552016:521-530Choi,J.R.etal.,Ann.Occup.Environ.Med282016:13Choi,Y.K.etal.,CancerGenomicsProteomics.102013:265-275Chowdhury,R.etal.,Nature5102014:422-426Chuang,J.J.etal.,Toxicol.Appl.Pharmacol.2792014:322-330Chung,T.K.etal.,Int.JCancer1372015:776-783Cipolat,S.etal.,Elife.32014:e01888Clark,D.L.etal.,JAnimSci.932015:2546-2558Cohen,C.J.etal.,JMolRecognit.162003a:324-332Cohen,C.J.etal.,JImmunol1702003b:4349-4361Cohen,S.N.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A691972:2110-2114Coligan,J.E.etal.,CurrentProtocolsinProteinScience1995Colombetti,S.etal.,JImmunol.1762006:2730-2738Corsaro,A.etal.,Oncotarget.72016:38638-38657D'Asti,E.etal.,Semin.Thromb.Hemost.402014:284-295Das,M.etal.,PLoS.One.82013:e69607Das,M.etal.,Tumour.Biol362015:9987-9994David,G.etal.,Oncogene252006:7354-7360Davies,E.L.etal.,Eur.JCancer351999:902-907Delgado,A.P.etal.,CancerGenomicsProteomics.112014:201-213Deng,M.etal.,JBiolChem2842009:7875-7888Deng,W.etal.,CellPhysiolBiochem.352015:1677-1688Deng,Y.etal.,CancerInvest312013:97-102Dengjel,J.etal.,ClinCancerRes122006:4163-4170Denkberg,G.etal.,JImmunol1712003:2197-2207Depianto,D.etal.,NatGenet.422010:910-914Dewar,R.etal.,Arch.Pathol.LabMed1352011:422-429doPrado,R.F.etal.,OralSurg.OralMedOralPathol.OralRadiol.Endod.1042007:e40-e44Dorn,J.etal.,OncolLett.92015:418-424Dotlic,S.etal.,Appl.Immunohistochem.Mol.Morphol.222014:537-542Dou,N.etal.,Am.JCancerRes62016:2641-2650Drucker,K.L.etal.,BMC.Cancer152015:565Du,L.etal.,CancerRes732013:2682-2694Dubash,A.D.etal.,JCellBiol2022013:653-666Duggan,M.A.,GanToKagakuRyoho29Suppl12002:176-193Economopoulou,P.etal.,Ann.Transl.Med.42016:173Eichler,T.E.etal.,KidneyInt.902016:568-579El-Rifai,W.etal.,CancerRes622002:6823-6826Elste,A.P.etal.,JMol.Histol.412010:89-99Epp,N.etal.,JCellBiol1772007:173-182Er,T.K.etal.,JMol.Med.Berl2016Esteban-Jurado,C.etal.,Eur.JHum.Genet.242016:1501-1505Ettl,T.etal.,ClinExp.Med2016Evangelista,M.T.etal.,JCutan.Pathol.422015:824-831Falk,K.etal.,Nature3511991:290-296Fan,J.etal.,ClinCancerRes172011:2908-2918Fang,W.K.etal.,AsianPac.JCancerPrev.152014:871-876Fang,W.Y.etal.,ActaBiochim.Biophys.Sin.Shanghai372005:541-546Fauci,J.M.etal.,Gynecol.Oncol1272012:420-425Fevre-Montange,M.etal.,Int.JOncol352009:1395-1407Fijneman,R.J.etal.,ClinCancerRes182012:2613-2624Fong,L.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A982001:8809-8814French,J.etal.,Histochem.J342002:223-231Frohwitter,G.etal.,OncolLett.122016:107-113Funakoshi-Tago,M.,YakugakuZasshi1322012:1267-1272Furstenberger,G.etal.,ProstaglandinsOtherLipidMediat.822007:128-134Gabrilovich,D.I.etal.,NatMed.21996:1096-1103Galoian,K.etal.,Mol.ClinOncol32015:171-178Gandhi,C.R.etal.,Gastroenterology1482015:379-391Gao,W.etal.,BMC.Cancer152015:367Gao,Y.etal.,DiYi.Jun.Yi.Da.Xue.Xue.Bao.232003:885-887Gao,Y.B.etal.,NatGenet.462014:1097-1102Gattinoni,L.etal.,NatRev.Immunol62006:383-393Gazda,H.T.etal.,Hum.Mutat.332012:1037-1044Ge,W.etal.,NatChemBiol82012:960-962Gelfand,R.etal.,Int.JOncol502017:49-65Gemmill,R.M.etal.,CancerLett.3002011:66-78Gieseler,F.etal.,CellCommun.Signal.112013:86Giguere,A.etal.,CancerGenet.Cytogenet.2022010:94-100Gnjatic,S.etal.,ProcNatl.Acad.Sci.U.S.A1002003:8862-8867Godkin,A.etal.,Int.Immunol91997:905-911Gomez-Morales,M.etal.,Histopathology632013:103-113Gorski,J.J.etal.,BreastCancerResTreat.1222010:721-731Green,M.R.etal.,MolecularCloning,ALaboratoryManual4th2012Greenfield,E.A.,Antibodies:ALaboratoryManual2nd2014Grin,A.etal.,Hum.Pathol.462015:541-548Grosset,A.A.etal.,BMC.Cancer142014:801Grosset,A.A.etal.,PLoS.One.112016:e0166731Gruber,A.D.etal.,CancerRes591999:5488-5491Gupta,S.K.etal.,Innate.Immun.192013:86-97Haass,N.K.etal.,PigmentCellRes182005:150-159Hammam,O.etal.,JEgypt.Soc.Parasitol.442014:733-740Harris,T.M.etal.,Arch.Pathol.LabMed.1392015:494-507Hatina,J.etal.,Neoplasma592012:728-736Hatta,M.etal.,JObstet.Gynaecol.Res302004:53-58Hayes,D.C.etal.,AnticancerRes262006:1567-1575He,C.S.etal.,CellPhysiolBiochem.402016:1221-1229He,X.etal.,Int.JBiolMacromol.722015:1081-1089Heidenreich,B.etal.,Curr.Opin.Genet.Dev.242014:30-37Heikinheimo,K.etal.,JDent.Res862007:544-549Heikinheimo,K.etal.,JDent.Res942015:101-111Herold-Mende,C.etal.,CellTissueRes3062001:399-408Higareda-Almaraz,J.C.etal.,BMC.Cancer162016:680Hoadley,K.A.etal.,PLoS.Med132016:e1002174Honrado,E.etal.,CritRevOncolHematol.592006:27-39Horiguchi,K.etal.,Oncogene312012:3190-3201Hu,J.etal.,Int.JClinExp.Pathol.82015:9182-9188Huang,Y.P.etal.,Biomedicine.Taipei62016:3Huang,Y.Z.etal.,Sci.Rep.42014:4570Huber,A.R.etal.,BMC.Gastroenterol.152015:80Hwang,M.L.etal.,JImmunol.1792007:5829-5838Hwang,Y.S.etal.,JCancerPrev.202015:121-128Ida-Yonemochi,H.etal.,Mod.Pathol.252012:784-794Iino,I.etal.,CancerSci.1042013:624-630Inamura,K.etal.,LungCancer1032017:44-51Ioana,M.etal.,JGastrointestin.LiverDis.192010:155-159Iorns,E.etal.,BreastCancerResTreat.1352012:79-91Ishii,H.etal.,JBiolChem2892014:27386-27399Ishimi,Y.etal.,JBiochem.1572015:561-569Janakiram,M.etal.,DiscovMed142012:229-236Janakiram,M.etal.,Immunotherapy82016:809-819Jiang,L.etal.,PLoS.One.92014:e94187Jiang,M.M.etal.,ZhongguoShiYan.Xue.Ye.Xue.ZaZhi.212013:821-829Jiang,R.etal.,JBiolChem2862011:9127-9135Jiang,Y.etal.,OncolLett.102015:3826-3831Johnson,R.H.etal.,Oncotarget.2015Joosse,S.A.etal.,ClinCancerRes182012:993-1003Jung,G.etal.,ProcNatlAcadSciUSA841987:4611-4615Jurcic,V.etal.,Histol.Histopathol.302015:945-953Juszczynski,P.etal.,Mol.CellBiol262006:5348-5359Kakuda,D.K.etal.,Biochim.Biophys.Acta14141998:75-84Kan,T.etal.,Oncology702006:25-33Kaplun,A.etal.,CritRevEukaryot.GeneExpr.222012:249-258Kasthuri,R.S.etal.,JClinOncol272009:4834-4838Katada,K.etal.,JProteomics.752012:1803-1815Katoh,M.,Int.JOncol412012:1913-1918Kawakami,K.etal.,Int.JOncol2015Kaz,A.M.etal.,GenesChromosomes.Cancer512012:384-393Kedde,M.etal.,CellCycle72008:899-903Kettunen,E.etal.,CancerGenet.Cytogenet.1492004:98-106Kibbe,A.H.,HandbookofPharmaceuticalExcipientsrd2000Kim,H.J.etal.,AnticancerRes332013:1555-1561Kim,K.etal.,Int.JColorectalDis.232008a:569-580Kim,K.H.etal.,NucleicAcidsRes432015:7462-7479Kim,S.W.etal.,Blood1112008b:1644-1653Kim,T.W.etal.,Oncotarget.2016Kim,Y.H.etal.,Ann.Surg.Oncol182011:2338-2347Kinyamu,H.K.etal.,Mol.Carcinog472008:845-885Kishikawa,T.etal.,Oncotarget.62015:8339-8352Kitchen,M.O.etal.,Epigenetics.112016:237-246Klawitter,J.etal.,BreastCancerRes122010:R16Knudsen,K.A.etal.,JCellBiochem.952005:488-496Koba,S.etal.,Am.JDermatopathol.372015:e31-e36Kobos,R.etal.,JPathol.2292013:743-754Koc,E.C.etal.,Mitochondrion.242015:113-121Kocaturk,B.etal.,Thromb.Res129Suppl12012:S69-S75Kocaturk,B.etal.,JThromb.Haemost.11Suppl12013:285-293Kohn,K.W.etal.,PLoS.One.92014:e99269Kolin,D.L.etal.,BiolChem3952014:1087-1093Koringa,P.G.etal.,Vet.CompOncol2013Krepischi,A.C.etal.,BreastCancerRes142012:R24Krieg,A.M.,NatRev.DrugDiscov.52006:471-484Kwok,H.F.etal.,Am.JCancerRes52015:52-71Kwon,J.etal.,IntJOncol432013:1523-1530Labrie,M.etal.,PLoS.One.102015:e0131307Labrie,M.etal.,Oncotarget.52014:7705-7721Lee,D.J.etal.,CancerBiolTher.102010:689-693Lee,D.M.etal.,Environ.Toxicol.Pharmacol.342012:858-868Lee,J.Y.etal.,Carcinogenesis302009:1528-1531Lee,K.Y.etal.,JMed.352004:141-149Leiserson,M.D.etal.,GenomeBiol162015:160Leiserson,M.D.etal.,GenomeBiol172016:168Leung,F.etal.,CancerEpidemiol.BiomarkersPrev.252016:1333-1340Leung,J.etal.,Immune.Netw.142014:265-276Lexander,H.etal.,Anal.Quant.Cytol.Histol.272005:263-272Li,J.etal.,ChinMedJEngl.1222009:486-495Li,J.Z.etal.,ChinMed.JEngl.1212008:1882-1890Li,L.etal.,AsianPac.JCancerPrev.132012a:3265-3270Li,T.etal.,Exp.Dermatol.242015:342-348Li,W.Q.etal.,Carcinogenesis342013:1536-1542Li,X.etal.,Oncogene232004:1474-1480Li,X.etal.,Biochem.Biophys.ResCommun.4192012b:148-153Li,Y.etal.,JCellPhysiol2122007:675-681Lian,M.etal.,PLoS.One.82013:e84854Liddy,N.etal.,NatMed.182012:980-987Lim,L.C.etal.,Pathol.OncolRes222016:169-177Lima,L.G.etal.,Biosci.Rep.332013Lin,C.S.etal.,CancerLett.3682015:36-45Lin,H.S.etal.,Arch.Otolaryngol.HeadNeckSurg.1302004:311-316Lion,M.etal.,CellCycle122013:1211-1224Liu,C.L.etal.,Eur.RevMedPharmacol.Sci.202016:4466-4473Liu,D.Q.etal.,Sci.Rep.52015:11955Liu,J.etal.,JBiochem.1482010:659-667Liu,Y.etal.,OncolRep.182007:943-951Ljunggren,H.G.etal.,JExp.Med.1621985:1745-1759Llorente,A.etal.,JCellSci.1172004:5343-5351Lo,W.Y.etal.,JProteomics.772012:154-166Lonardo,F.etal.,Curr.Pharm.Des162010:1877-1881Longenecker,B.M.etal.,AnnN.Y.Acad.Sci.6901993:276-291Lonsdale,J.,Nat.Genet.452013:580-585Loos,M.etal.,ClinDev.Immunol.20102010:683875Low,K.C.etal.,TrendsBiochem.Sci.382013:426-434Lu,J.J.etal.,ChinJNatMed.132015a:673-679Lu,Y.etal.,BMC.Mol.Biol162015b:21Lu,Y.etal.,PLoS.One.82013:e73866Lubben,B.etal.,JBiolChem2701995:11549-11554Lucito,R.etal.,CancerBiolTher.62007:1592-1599Lukas,T.J.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A781981:2791-2795Lundblad,R.L.,ChemicalReagentsforProteinModification3rd2004Luo,D.etal.,Biochem.Biophys.ResCommun.2016Maass,N.etal.,ActaOncol392000:931-934Maerki,S.etal.,JCellBiol1872009:791-800Man,Y.etal.,TohokuJExp.Med2342014:29-40Mange,A.etal.,JProteomics.1422016:114-121Marech,I.etal.,WorldJGastroenterol.202014:8910-8920Marioni,G.etal.,ActaOtolaryngol.1292009:476-480Markljung,E.etal.,PLoS.Biol72009:e1000256Marshall,P.A.etal.,JSteroidBiochem.Mol.Biol1322012:147-159Martinez,O.etal.,PLoS.One.52010:e10398Masugi,Y.etal.,LabInvest952015:308-319Matin,S.F.etal.,Urol.Oncol322014:309-316Matsumoto,K.etal.,Biomed.Res352014:201-206Matsuzaka,K.etal.,Bull.TokyoDent.Coll.452004:229-233McDoniels-Silvers,A.L.etal.,ClinCancerRes82002:1127-1138Mei,Z.Z.etal.,JBiolChem2912016:18176-18189Melaiu,O.etal.,Mutat.Res7712015:6-12Meschenmoser,K.etal.,InVivo272013:431-442Meslin,F.etal.,CancerRes672007:10910-10919Messina,M.etal.,Blood1232014:2378-2388Meziere,C.etal.,JImmunol1591997:3230-3237Min,L.etal.,Histopathology672015:677-688Misago,N.etal.,JDermatol.432016:439-442Mitchell,S.M.etal.,BMC.Cancer142014:54Mlacki,M.etal.,PLoS.One.92014:e89247Morgan,P.R.etal.,Eur.JCancerBOralOncol30B1994:160-166Morgan,R.A.etal.,Science3142006:126-129Mori,M.etal.,Transplantation641997:1017-1027Morris,L.G.etal.,NatGenet.452013:253-261Morris,M.R.etal.,Oncogene302011:1390-1401Mortara,L.etal.,ClinCancerRes.122006:3435-3443Moskvina,L.V.etal.,Arkh.Patol.722010:58-61Mountzios,G.etal.,Ann.Oncol252014:1889-1900Mueller,L.N.etal.,JProteome.Res72008:51-61Mueller,L.N.etal.,Proteomics.72007:3470-3480Mumberg,D.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A961999:8633-8638Muramatsu,T.etal.,OralOncol392003:199-203Mussai,F.etal.,Blood1252015:2386-2396Myklebust,M.P.etal.,Br.JCancer1062012:756-762Naeem,A.S.etal.,CellDeath.Differ.222015:2123-2132Nagappan,A.etal.,BMC.Biochem.142013:24Nagata,M.etal.,PLoS.One.92014:e93164Narayanan,B.A.,Curr.CancerDrugTargets.62006:711-727Narisawa,Y.etal.,JDermatol.422015:445-452NationalCancerInstitute,5-6-2015,www.cancer.govNatsuga,K.etal.,JInvestDermatol.2015Natsuga,K.etal.,JInvestDermatol.1362016:99-106Neumann,M.etal.,Blood1212013:4749-4752North,J.P.etal.,Am.JSurg.Pathol.392015:1347-1356Novak,B.etal.,NaunynSchmiedebergsArch.Pharmacol.3842011:583-602Nygren,M.K.etal.,FrontBiosci.Elite.Ed32011:989-993Oehler,V.G.etal.,Blood1142009:3292-3298Oh,H.R.etal.,CellOncolDordr.372014:455-461Oi,N.etal.,Oncogene342015:2660-2671Oikonomopoulou,K.etal.,BiolChem3912010:299-310Ormanns,S.etal.,Br.JCancer1132015:1460-1466Otsubo,T.etal.,CancerMed42015:415-425Palacios,J.etal.,Pathobiology752008:85-94Papagerakis,S.etal.,Hum.Pathol.342003:565-572Paparella,M.L.etal.,JOralPathol.Med442015:801-809Paredes,J.etal.,BreastCancerRes92007:214Paredes,J.etal.,Biochim.Biophys.Acta18262012:297-311Park,J.Y.etal.,Oncotarget.62015a:5342-5353Park,Y.H.etal.,Int.JCancer1362015b:1976-1984Pereira,P.M.etal.,Org.Biomol.Chem.122014:1804-1811Perrin,C.etal.,Am.JDermatopathol.332011:131-139Persson,F.etal.,CancerLett.2602008:37-47Pickering,C.R.etal.,ClinCancerRes202014:6582-6592Pierce,A.etal.,Mol.CellProteomics.72008:853-863Pigullo,S.etal.,Pediatr.BloodCancer522009:376-378Pinheiro,J.etal.,nlme:LinearandNonlinearMixedEffectsModelshttp:CRAN.R-project.orgpacke＝nlme2015Piura,B.etal.,Harefuah1442005:261-5,303,302Plebanski,M.etal.,Eur.JImmunol251995:1783-1787Poligone,B.etal.,JInvestDermatol.1352015:869-876Polotskaia,A.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A1122015:E1220-E1229Pondugula,S.etal.,Mol.CellBiol292009:4891-4905Porta,C.etal.,Virology2021994:949-955Preisz,K.etal.,Orv.Hetil.1482007:979-983Probst,C.etal.,ClinChim.Acta4102009:13-18Qiu,S.etal.,CancerSci.2016Qu,T.etal.,Mol.MedRep.142016:5041-5048Rafnar,T.etal.,CancerRes712011:1356-1361Ramakrishna,S.etal.,PLoS.One.72012:e37772Ramakrishna,S.etal.,JBiolChem2862011:10505-10514Ramani,D.etal.,ClinNutr.332014:14-22Ramani,V.C.etal.,BMC.Cancer82008:373Ramena,G.etal.,PLoS.One.112016:e0147489Rammensee,H.etal.,Immunogenetics501999:213-219Rashid,R.etal.,Mol.Cell212006:249-260Rastelli,F.etal.,Tumori962010:875-888Ratovitski,E.A.,FEBSLett.5872013:3581-3586RefSeq,TheNCBIhandbook[Internet],Chapter18,2002,http:www.ncbi.nlm.nih.govbooksNBK21091Remmelink,M.etal.,Histopathology582011:543-556Resende,C.etal.,Helicobacter.16Suppl12011:38-44Reyes,C.etal.,Appl.Immunohistochem.Mol.Morphol.212013:283-286Ribeiro,A.S.etal.,FrontOncol42014:371Riker,A.I.etal.,BMC.MedGenomics12008:13Rini,B.I.etal.,Cancer1072006:67-74Rock,K.L.etal.,Science2491990:918-921Rohan,S.etal.,ClinCancerRes122006:6937-6945Rohrbeck,A.etal.,PLoS.One.42009:e7315Rooney,M.S.etal.,Cell1602015:48-61Rotmann,A.etal.,Biochem.J3952006:117-123Rotty,J.D.etal.,JCellBiol1972012:381-389Ruf,W.,Thromb.Res130Suppl12012:S84-S87Ruf,W.etal.,JThromb.Haemost.9Suppl12011:306-315Rui,X.etal.,Int.JClinExp.Pathol.82015:5435-5442Saaber,F.etal.,Pathol.ResPract.2112015:208-213Sabeti,S.etal.,IndianJDermatol.582013:331-336Safadi,R.A.etal.,OralSurg.OralMed.OralPathol.OralRadiol.1212016:402-411Sager,R.etal.,Curr.Top.Microbiol.Immunol.213Pt11996:51-64Saiki,R.K.etal.,Science2391988:487-491Salas,S.etal.,Int.JCancer1252009:851-860Saletta,F.etal.,BBA.Clin12014:59-77Sanchez-Palencia,A.etal.,Int.JCancer1292011:355-364Sasaki,Y.etal.,CancerBiolTher.132012:1512-1521Sato,T.etal.,Oncogene332014:2215-2224Sauer,H.etal.,FreeRadic.BiolMed271999:1276-1283Sawada,K.etal.,JOralSci.582016:325-331Schmitt-Graeff,A.etal.,Histopathology512007:87-97Schrader,C.H.etal.,Mol.Cancer142015:107Schulten,R.etal.,NaunynSchmiedebergsArch.Pharmacol.3852012:969-979Schumann,H.etal.,Br.JDermatol.1672012:929-936Scola,N.etal.,Br.JDermatol.1672012:591-597Seal,S.etal.,CancerRes632003:8596-8599Sedda,S.etal.,WorldJGastroenterol.202014:11977-11984Seeger,F.H.etal.,Immunogenetics491999:571-576Seishima,M.etal.,Arch.Dermatol.1402004:1500-1503Sellheyer,K.,JCutan.Pathol.422015:90-101Sharifi,N.etal.,Prostate672007:301-311Shen,M.etal.,Environ.Mol.Mutagen502009:285-290Shen,X.etal.,Tumour.Biol362015:7133-7142Sheng,S.,FrontBiosci.92004:2733-2745Sherman,F.etal.,LaboratoryCourseManualforMethodsinYeastGenetics1986Shi,L.etal.,BMC.Cancer162016:815Shim,J.H.etal.,CancerPrev.ResPhila32010:670-679Shimbo,T.etal.,PLoS.One.52010:e10566Shinmura,K.etal.,Dis.Markers20142014:619273Shruthi,D.K.etal.,JOralMaxillofac.Pathol.182014:365-371Sidiropoulos,K.G.etal.,Mol.Oncol102016:993-1007Silveira,A.C.etal.,CancerLett.2762009:32-37Singh-Jasuja,H.etal.,CancerImmunol.Immunother.532004:187-195Sinha,N.etal.,OralOncol492013:854-862Sivanathan,L.etal.,Prostate742014:537-546Sizemore,G.M.etal.,JBiolChem2892014:24102-24113Skipworth,R.J.etal.,Int.JOncol362010:973-982Slaga,T.J.etal.,Prog.ClinBiolRes3911995:1-20Small,E.J.etal.,JClinOncol.242006:3089-3094Smith,K.T.etal.,Mol.CellProteomics.112012:1815-1828Sobolik-Delmaire,T.etal.,CellCommun.Adhes.142007:99-109Solus,J.F.etal.,Int.JSurg.Pathol.242016:29-36Somasekharan,S.P.etal.,JCellBiol2082015:913-929Song,B.etal.,Exp.Ther.Med122016:2455-2468Soreide,K.etal.,JPathol.2092006:147-156Southgate,J.etal.,Histol.Histopathol.141999:657-664Sturm,M.etal.,BMC.Bioinformatics.92008:163Sun,B.C.etal.,ZhonghuaYi.Xue.ZaZhi.862006:1808-1812Sun,L.etal.,Mol.MedRep.122015a:4266-4272Sun,N.K.etal.,Oncotarget.62015b:27065-27082Sun,S.etal.,Gene5842016:90-96Suzuki,A.etal.,CancerSci.992008:986-994Swatler,J.etal.,PostepyHig.MedDosw.Online.702016:25-42Swoboda,R.K.etal.,CancerRes672007:3555-3559Tai,G.etal.,PLoS.One.82013:e81167Taintor,A.R.etal.,JAm.Acad.Dermatol.562007:S73-S76Tamir,A.etal.,JOvarian.Res72014:109Tamm-Rosenstein,K.etal.,PLoS.One.82013:e68907Tang,B.etal.,Oncotarget.62015a:12723-12739Tang,H.B.etal.,ZhonghuaYi.Xue.ZaZhi.882008:1553-1556Tang,X.H.etal.,Oncotarget.62015b:24424-24435Taniguchi,T.etal.,NatMed92003:568-574Taoka,Y.etal.,Biomed.Res362015:253-261Tauber,S.etal.,Mol.Cancer92010:200Teles,Alves,Ietal.,Oncogene342015:568-577Tennenbaum,T.etal.,JInvestig.Dermatol.Symp.Proc.11996:157-161Teo,C.R.etal.,CellSignal.282016:1479-1488Terada,T.,Int.JClinExp.Pathol.52012:596-600Teufel,R.etal.,CellMolLifeSci.622005:1755-1762Tian,S.Y.etal.,Int.JClinExp.Pathol.72014:3752-3762Timar,J.etal.,ClinExp.Metastasis272010:371-387Tomlinson,R.L.etal.,Mol.BiolCell192008:3793-3800Tonoike,Y.etal.,BMC.CellBiol122011:41Tran,E.etal.,Science3442014:641-645Trojandt,S.etal.,Hum.Immunol.772016:1223-1231Tsuji,A.B.etal.,Biochem.Biophys.ResCommun.3332005:1370-1377Tsutsui,M.etal.,Int.JOncol472015:867-874Ueda,S.etal.,CancerRes642004:5672-5676Vadie,N.etal.,RNA.Biol122015:893-899Vakrakou,A.etal.,BiolChem3952014:1105-1117Valletta,D.etal.,Carcinogenesis352014:1407-1415Vanaja,D.K.etal.,CancerRes632003:3877-3882Vasca,V.etal.,OncolLett.82014:2501-2504Vieira,A.F.etal.,Mol.Cancer142015:178Vigneswaran,N.etal.,OralMaxillofac.Surg.ClinNorthAm.262014:123-141Vliet-Gregg,P.A.etal.,Virology4782015:50-60Volkmer,J.P.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A1092012:2078-2083Walia,V.etal.,CancerRes692009:6624-6632Walia,V.etal.,Oncogene312012:2237-2246Walter,S.etal.,JImmunol1712003:4974-4978Walter,S.etal.,NatMed.182012:1254-1261Wang,J.etal.,Br.JDermatol.1532005:558-564Wang,L.etal.,JCutan.Pathol.422015a:361-367Wang,L.etal.,Int.JCancer1342014a:2764-2771Wang,L.etal.,Tumour.Biol372016a:14939-14947Wang,M.etal.,Exp.Dermatol.232014b:636-638Wang,S.etal.,Cytokine862016b:110-118Wang,X.etal.,Oncotarget.72016c:22911-22927Wang,X.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A1102013:15997-16002Wang,X.etal.,Mol.CellBiol272007:3098-3108Wang,X.etal.,Eur.JPharmacol.7682015b:116-122Wang,X.etal.,Sci.Rep.62016d:19006Wang,X.etal.,Int.JBiolMarkers292014c:e150-e159Wang,Z.S.etal.,Oncotarget.72016e:44266-44276Ward,A.M.etal.,RNA.Biol82011:1173-1186Watanabe,T.etal.,CancerCellInt.102010:2Wheler,J.J.etal.,BMC.Cancer152015:442Willcox,B.E.etal.,ProteinSci.81999:2418-2423Willers,I.M.etal.,Biochim.Biophys.Acta18072011:543-551Williams,L.M.etal.,Aquat.Toxicol.1802016:141-154Willis,S.etal.,MetaGene42015:129-141Winslow,S.etal.,Mol.Cancer122013:156Witte,D.etal.,JClinMed52016Wojtalewicz,N.etal.,PLoS.One.92014:e90461Wojtukiewicz,M.Z.etal.,CancerMetastasisRev342015:775-796Wong,M.P.etal.,Pathology402008:611-616WorldHealthOrganization,2014,http:www.who.intenWreesmann,V.B.etal.,ORLJOtorhinolaryngol.RelatSpec.692007:218-225Wu,S.etal.,Oncotarget.2016Xi,Y.etal.,Monoclon.Antib.Immunodiagn.Immunother.342015:346-353Xie,C.etal.,Sci.Rep.62016a:27528Xie,X.etal.,Obesity.Silver.Spring242016b:389-397Xin,Z.etal.,VirchowsArch.4652014:35-47Xu,C.etal.,PLoS.Genet.92013:e1003169Xu,X.etal.,Proteomics.102010:1374-1390Xue,L.Y.etal.,ZhonghuaZhong.LiuZaZhi.322010:838-844Yadav,R.etal.,JNeurochem.1332015:857-869Yamaguchi,T.etal.,Exp.Dermatol.222013:840-842Yamazaki,K.,Ultrastruct.Pathol.312007:209-219Yang,C.etal.,Tumour.Biol2015Yang,F.etal.,Biomed.Rep.42016a:681-686Yang,H.Y.etal.,JProteomics.752012a:3639-3653Yang,J.etal.,Curr.Opin.Oncol252013:398-406Yang,L.etal.,Carcinogenesis332012b:1863-1870Yang,L.etal.,JBiolChem2912016b:3905-3917Ye,Z.etal.,CellPhysiolBiochem.392016:1568-1580Yermachenko,A.etal.,Gene5902016:85-89Yi,K.H.etal.,Immunol.Rev2292009:145-151Yi,Y.etal.,Mol.Cytogenet.22009:18Yong,A.A.etal.,Australas.JDermatol.542013:241-250YongjunZhang,M.M.etal.,JCancerResTher.92013:660-663Yu,X.J.etal.,EBioMedicine22015a:583-590Yu,Y.etal.,ACSAppl.Mater.Interfaces.72015b:4401-4405Yu,Y.etal.,PLoS.One.82013:e83943Yun,C.W.etal.,AnticancerRes362016:4449-4458Zaremba,S.etal.,CancerRes.571997:4570-4577Zdrojewicz,Z.etal.,PostepyHig.MedDosw.Online.682014:393-403Zekri,A.R.etal.,AsianPac.JCancerPrev.162015:3543-3549Zhang,H.etal.,Oncotarget.62015:17039-17053Zhang,Q.etal.,Endocrinology1432002:4788-4796Zhang,S.etal.,JMol.Histol.452014a:283-292Zhang,W.etal.,Tumori1002014b:338-345Zhang,Y.etal.,PLoS.One.72012:e30188Zhao,L.H.etal.,Genet.Mol.Res142015:5417-5426Zhao,L.J.etal.,ChinMed.JEngl.1262013:4260-4264Zhao,S.etal.,ClinCancerRes232017:311-319Zheng,G.etal.,FEBSJ2772010:4506-4518Zhou,L.etal.,Int.JCancer1352014:2329-2337Zhou,P.etal.,Eur.JCancerPrev.212012:231-240Zhou,X.etal.,Oncotarget.72016:67196-67211Zhu,X.etal.,JDermatol.342007:503-511Zhu,Y.etal.,Mol.BiolCell152004:81-90Ziari,K.etal.,Biologicals432015:181-185Ziegler,A.etal.,CancerLett.3262012:1-7Zimmermann,J.etal.,JDtsch.Dermatol.Ges.82010:598-606Zubor,P.etal.,Mol.Biol.Rep.422015:977-988序列表伊玛提克斯生物技术有限公司用于头颈鳞状细胞癌和其他癌症免疫治疗的新型肽和支架I32988WODE102016115974.32016-08-26US62379,8642016-08-26158PatentIn版本3.5113PRT智人（Homosapiens）1GlyLeuAlaGlyGlyPheGlyGlyProGlyPheProVal1510211PRT智人2ProValCysProProGlyGlyIleGlnGluVal1510313PRT智人3SerLeuTyrGlyLeuGlyGlySerLysArgIleSerIle1510410PRT智人4IleLeuAspIleAsnAspAsnProProVal1510510PRT智人5ValCysProProGlyGlyIleGlnGluVal1510610PRT智人6AlaLeuTyrAspAlaGluLeuSerGlnMet1510711PRT智人7AlaLeuGluGluAlaAsnAlaAspLeuGluVal1510811PRT智人8AlaGlnLeuAsnIleGlyAsnValLeuProVal1510910PRT智人9SerThrAlaSerAlaIleThrProSerVal15101010PRT智人10ThrLeuTrpProAlaThrProProLysAla1510119PRT智人11ValLeuPheSerSerProProValIle15129PRT智人12ThrLeuThrAspGluIleAsnPheLeu15139PRT智人13SerLeuValSerTyrLeuAspLysVal15149PRT智人14ArgIleMetGluGlyIleProThrVal15159PRT智人15SerMetLeuAsnAsnIleIleAsnLeu15169PRT智人16AlaLeuLysAspSerValGlnArgAla15179PRT智人17SerIleTrpProAlaLeuThrGlnVal15189PRT智人18TyrLeuTyrProAspLeuSerArgLeu15199PRT智人19AlaLeuAlaLysLeuLeuProLeuLeu152011PRT智人20TyrLeuIleAsnGluIleAspArgIleArgAla1510219PRT智人21PheLeuHisGluProPheSerSerVal152210PRT智人22LysLeuProGluProCysProSerThrVal15102310PRT智人23SerLeuProGluSerGlyLeuLeuSerVal1510249PRT智人24LeuLeuIleAlaIleAsnProGlnVal152511PRT智人25SerLeuCysProProGlyGlyIleGlnGluVal15102611PRT智人26ThrLeuValAspGluAsnGlnSerTrpTyrLeu1510279PRT智人27TyrLeuAlaGluProGlnTrpAlaVal152811PRT智人28AlaValAspProValSerGlySerLeuTyrVal1510299PRT智人29ArgLeuLeuProAspLeuAspGluVal153010PRT智人30ThrLeuAlaSerLeuGlyTyrAlaValVal1510319PRT智人31HisLeuAlaThrValLysLeuLeuVal153211PRT智人32IleGlnAspAlaGluGlyAlaIleHisGluVal15103310PRT智人33AlaIleTyrGluGlyValGlyTrpAsnVal1510349PRT智人34AlaLeuAspThrPheSerValGlnVal153510PRT智人35AlaLeuValGlyAspValIleLeuThrVal1510369PRT智人36GlyLeuTrpSerSerIlePheSerLeu15379PRT智人37IleLeuLeuGluAspValPheGlnLeu15389PRT智人38LysLeuLeuProGlyValGlnTyrVal153911PRT智人39LeuLeuProGluAspAspThrArgAspAsnVal1510409PRT智人40LeuLeuThrProLeuAsnLeuGlnIle154114PRT智人41ArgLeuAsnGlyGluGlyValGlyGlnValAsnIleSerVal1510429PRT智人42AlaLeuTyrThrSerGlyHisLeuLeu15439PRT智人43AlaValLeuGlyGlyLysLeuTyrVal15449PRT智人44GlyLeuGlyAspAspSerPheProIle154510PRT智人45GlyLeuIleGluTrpLeuGluAsnThrVal15104610PRT智人46GlyLeuIleSerSerIleGluAlaGlnLeu15104710PRT智人47GlnLeuLeuGluGlyGluLeuGluThrLeu1510489PRT智人48TyrLeuLeuAspTyrProAsnAsnLeu15499PRT智人49TyrLeuTrpGluAlaHisThrAsnIle15509PRT智人50AlaLeuSerAsnValValHisLysVal15519PRT智人51PheLeuIleProSerIleIlePheAla155210PRT智人52LeuLeuPheThrGlyLeuValSerGlyVal15105311PRT智人53ArgLeuValGluValGlyGlyAspValGlnLeu15105410PRT智人54ArgLeuSerGlyGluGlyValGlyProVal1510559PRT智人55ValLeuAsnValGlyValAlaGluVal15569PRT智人56PheLeuGlnLeuGluThrGluGlnVal155710PRT智人57AlaIleLeuGlyPheAlaLeuSerGluAla1510589PRT智人58SerLeuSerAspIleGlnProCysLeu15599PRT智人59TyrLeuGlnAsnGluValPheGlyLeu156010PRT智人60SerLeuGlyAsnPheLysAspAspLeuLeu1510619PRT智人61PheValAlaGlyTyrIleAlaGlyVal15629PRT智人62IleLeuSerSerAlaCysTyrThrVal156311PRT智人63AlaLeuMetAspGluIleAsnPheMetLysMet15106410PRT智人64LysIleLeuGluSerLeuPheValSerLeu15106510PRT智人65AlaLeuTrpGlyPhePheProValLeuLeu1510669PRT智人66ThrLeuLeuSerGluIleAlaGluLeu15679PRT智人67AlaGlnLeuAsnLeuIleTrpGlnLeu156810PRT智人68LysIleLeuGluMetAspAspProArgAla1510699PRT智人69TyrValMetGluSerMetThrTyrLeu15709PRT智人70PheLeuPheProAlaPheLeuThrAla15719PRT智人71SerLeuPheProTyrValValLeuIle15729PRT智人72SerLeuAspGlyAsnProLeuAlaVal157310PRT智人73TyrIleAspProTyrLysLeuLeuProLeu1510749PRT智人74SerLeuThrSerPheLeuIleSerLeu15759PRT智人75AlaLeuAlaSerAlaProThrSerVal157610PRT智人76IleLeuPheAspGluValLeuThrPheAla1510779PRT智人77SerLeuArgAlaPheLeuMetProIle15789PRT智人78ValLeuTyrGlyAspValGluGluLeu157911PRT智人79GlyLeuHisGlnAspPheProSerValValLeu15108011PRT智人80GlyLeuTyrGlyIleLysAspAspValPheLeu15108111PRT智人81ValLeuAlaGluAsnProAspIlePheAlaVal15108210PRT智人82ValLeuAspIleAsnAspAsnProProVal1510839PRT智人83GlnLeuLeuGlnTyrValTyrAsnLeu158410PRT智人84AlaLeuMetAlaGlyCysIleGlnGluAla1510859PRT智人85GlnLeuIleGluLysIleThrGlnVal15869PRT智人86SerLeuGlnGluArgGlnValPheLeu15879PRT智人87AlaLeuProGluProSerProAlaAla15889PRT智人88LeuMetAlaProAlaProSerThrVal15899PRT智人89ValLeuAspGluGlyLeuThrSerVal159010PRT智人90ThrLeuAsnAspGlyValValValGlnVal15109111PRT智人91MetLeuPheGluAsnMetGlyAlaTyrThrVal1510929PRT智人92IleLeuLeuAspValLysThrArgLeu15939PRT智人93AlaLeuSerAsnValIleHisLysVal159410PRT智人94SerIlePheGluGlyLeuLeuSerGlyVal15109510PRT智人95SerLeuAspGluAsnSerAspGlnGlnVal15109613PRT智人96PheGlnLeuAspProSerSerGlyValLeuValThrVal1510979PRT智人97LeuIleLeuGluSerIleProValVal15989PRT智人98SerLeuTyrLysGlyLeuLeuSerVal15999PRT智人99ThrAlaSerAlaIleThrProSerVal1510010PRT智人100ValLeuValSerAspGlyValHisSerVal151010111PRT智人101GlyLeuLeuProSerAlaGluSerIleLysLeu151010211PRT智人102ThrLeuAlaGluLeuGlnProProValGlnLeu15101039PRT智人103ValLeuAlaGluGlyGlyGluGlyVal151049PRT智人104SerLeuSerProValIleLeuGlyVal151059PRT智人105SerThrTyrGlyGlyGlyLeuSerVal151069PRT智人106ValLeuValAspGlnSerTrpValLeu151079PRT智人107TyrLeuGluGluAspValTyrGlnLeu1510813PRT智人108SerLeuTyrAsnLeuGlyGlySerLysArgIleSerIle15101099PRT智人109LysIleGlnGluIleLeuThrGlnVal151109PRT智人110LeuLeuProProProProProProAla1511111PRT智人111SerLeuAlaProGlyAspValValArgGlnVal151011213PRT智人112AlaLeuLeuAspGlyGlySerGluAlaTyrTrpArgVal15101139PRT智人113AsnLeuMetAlaSerGlnProGlnLeu1511410PRT智人114ValLeuValProTyrGluProProGlnVal151011511PRT智人115ValThrAlaAlaTyrMetAspThrValSerLeu15101169PRT智人116SerLeuTrpProSerProGluGlnLeu151179PRT智人117GlyLeuAlaPheSerLeuTyrGlnAla1511811PRT智人118ThrLeuLeuGlnGluGlnGlyThrLysThrVal151011910PRT智人119GlyLeuLeuAspProSerValPheHisVal15101209PRT智人120TyrLeuValAlaLysLeuValGluVal151219PRT智人121SerLeuTyrGlyTyrLeuArgGlyAla1512211PRT智人122IleLeuAspGluAlaGlyValLysTyrPheLeu15101239PRT智人123LeuLeuSerGlyAspLeuIlePheLeu151249PRT智人124TyrMetLeuAspIlePheHisGluVal151259PRT智人125AlaLeuAsnProGluIleValSerVal151269PRT智人126IleLeuValAspTrpLeuValGluVal151279PRT智人127SerLeuPheGlyLysLysTyrIleLeu151289PRT智人128ThrLeuHisArgGluThrPheTyrLeu1512911PRT智人129SerLeuSerGlyGluIleIleLeuHisSerVal151013010PRT智人130ThrLeuAspGlyAlaAlaValAsnGlnVal15101319PRT智人131LeuGlnLeuAspLysGluPheGlnLeu1513210PRT智人132ThrLeuTyrProGlyArgPheAspTyrVal15101339PRT智人133LeuLeuLeuProLeuGlnIleLeuLeu151349PRT智人134IleLeuIleGlyGluThrIleLysIle151359PRT智人135GlyLeuPheSerGlnHisPheAsnLeu1513611PRT智人136SerLeuMetGluProProAlaValLeuLeuLeu151013710PRT智人137GlyLeuAlaProPheLeuLeuAsnAlaVal151013810PRT智人138AlaLeuLeuThrGlyIleIleSerLysAla15101399PRT智人139GlnLeuGlyProValProValThrIle151409PRT智人140TyrLeuPheGluAsnIleSerGlnLeu1514110PRT智人141PheLeuAsnProAspGluValHisAlaIle151014210PRT智人142SerLeuValSerGluGlnLeuGluProAla15101439PRT智人143TyrValTyrGlnAsnAsnIleTyrLeu151449PRT智人144LysIleSerThrIleThrProGlnIle151459PRT智人145LeuLeuTyrGlyLysTyrValSerVal151469PRT智人146GlyLeuLeuGluGluLeuValThrVal1514710PRT智人147IleLeuMetAspProSerProGluTyrAla151014810PRT智人148LeuLeuPheAspAlaProAspLeuArgLeu151014910PRT智人149ValLeuLeuAsnIleAsnGlyIleAspLeu151015011PRT智人150IleLeuAlaGluGluProIleTyrIleArgVal15101519PRT智人151GlnLeuCysAspLeuAsnAlaGluLeu151529PRT智人152SerLeuTrpGlnAspIleProAspVal151539PRT智人153ValLeuPheLeuGlyLysLeuLeuVal1515410PRT智人154LysMetTrpGluGluLeuProGluValVal151015510PRT智人155GlyLeuLeuAspAsnProGluLeuArgVal151015613PRT智人156AlaLeuIleAsnAspIleLeuGlyGluLeuValLysLeu151015710PRT智人157GluLeuAlaGlyIleGlyIleLeuThrVal15101589PRT智人158TyrLeuLeuProAlaIleValHisIle15

权利要求：1.一种肽及其药用盐，所述肽包括选自SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的氨基酸序列、以及与SEQIDNo.1至SEQIDNo.91具有至少88％同源性的其变体序列，其中变体肽与主要组织兼容性复合体MHC结合和或诱导T细胞与该变体肽发生交叉反应，其中所述肽不是全长多肽。2.根据权利要求1所述的肽或其变体，其中所述肽或其变体的总长度为8至100个氨基酸、优选为8至30个氨基酸、更优选为8至16个氨基酸、最优选为该肽由或基本由SEQIDNo.1至SEQIDNo.91中任一项的氨基酸序列组成。3.根据权利要求1或2所述的肽或其变体，其中所述肽被修饰，和或包含非肽键，或者其中所述肽为融合蛋白的一部分，尤其是包含HLA-DR抗原相关不变链Ii的N-端氨基酸的融合蛋白的一部分。4.一种抗体，特别是可溶性或膜结合性抗体，其特异性地识别权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体，优选为与MHC分子结合时的权利要求1或2所述的肽或变体。5.一种T细胞受体，优选为可溶性或膜结合的T细胞受体，其与HLA配体反应，其中所述配体与选自SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的氨基酸序列具有至少75％、优选至少88％一致性，或其中其氨基酸序列由SEQIDNo.1至SEQIDNo.91中任一项组成。6.根据权利要求5所述的T细胞受体，其中所述T细胞受体作为可溶性分子提供，且任选地携带其他效应子功能，例如免疫刺激结构域或毒素。7.一种适体，其特异性地识别权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体，优选为权利要求1至2中任一项所述的与MHC分子结合的肽或其变体。8.一种核酸，或一种表达该核酸的表达受体，其中所述核酸编码权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体、权利要求4所述的抗体、权利要求5或6所述的T细胞受体、或权利要求7所述的适体，其中所述核酸任选地与异源启动子序列连接。9.一种重组宿主细胞，其包含权利要求1至3中任一项所述的肽、权利要求8所述的表达载体，其中所述宿主细胞优选地选自抗原提呈细胞，例如树突状细胞、T细胞或NK细胞。10.权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体、权利要求4所述的抗体、权利要求5或6所述的T细胞受体、权利要求7所述的适体、权利要求8所述的核酸或表达载体、或权利要求9所述的宿主细胞在药物中的用途。11.一种制备权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体、权利要求4所述的抗体、或权利要求5或6所述的T细胞受体的方法，该方法包括培养权利要求9所述的宿主细胞，所述宿主细胞表达权利要求8所述的核酸或表达载体，以及从所述宿主细胞或其培养基中分离出所述肽或其变体、抗体或T细胞受体。12.一种体外制备激活的T淋巴细胞的方法，该方法包括将T细胞与载有抗原的人I或II类MHC分子体外接触一段时间，该时间足以以抗原特异性的方式激活T细胞，人I或II类MHC分子在合适的抗原提呈细胞表面或模拟抗原提呈细胞的人工构建体的表面上表达，其中所述抗原为权利要求1至2中任一项所述的肽。13.一种激活的T淋巴细胞，由权利要求12所述的方法制成，其有选择性地识别一种细胞，该细胞提呈含权利要求1至2任一项中给定氨基酸序列的多肽。14.一种药物组合物，其包含至少一种选自以下的活性成分：a选自SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的肽；b与a中的肽和或肽-MHC复合体反应的T细胞受体；c包含a中的肽以及HLA-DR抗原相关不变链Ii的1至80N端氨基酸的融合蛋白；d编码a至c中任一项的核酸或包含该核酸的表达载体；e包括d的表达载体的宿主细胞；f激活的的T淋巴细胞，其通过以下方法获得，该方法包括将T细胞与在合适抗原提呈细胞表面表达的a的肽进行体外接触一段时间，该时间足以以抗原特异性方式激活所述T细胞，以及将这些激活的T细胞转入自体或其他患者；g与a的肽和或肽-MHC复合体、和或提呈a的肽的细胞反应的抗体或可溶性T细胞受体，其可能经与免疫激活结构域或毒素融合而修饰；h适体，其识别选自SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的肽和或选自SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的肽与MHC分子的复合体；ia至h的偶联体或标记肽或支架，以及药学上可接受的载体，或任选地，药学上可接受的赋形剂和或稳定剂。15.权利要求1至3任一项所述的肽或其变体、权利要求4所述的抗体、权利要求5或6所述的T细胞受体、权利要求13所述的激活的T淋巴细胞、权利要求8所述的核酸或表达载体、或权利要求9所述的宿主细胞在诊断和或治疗癌症中或制备抗癌药物中的用途，其中所述癌症优选为选自头颈鳞状细胞癌、急性骨髓性白血病、乳腺癌、胆管癌、脑癌、慢性淋巴细胞性白血病、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胃癌、肝细胞癌、黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、膀胱癌、子宫癌和其他肿瘤，这些肿瘤过表达能够衍生得到SEQIDNo.1至SEQIDNo.91的肽的蛋白。16.一种试剂盒，包含：a容器，包含药物组合物，该药物组合物含有权利要求1至3中任一项所述的肽或其变体、权利要求4所述的抗体、权利要求5或6所述的T细胞受体、权利要求13所述的激活的T淋巴细胞、权利要求8所述的核酸或表达载体、或权利要求9所述的宿主细胞，以溶液或冻干的形式；b任选地，第二个容器，其含有用于冻干制剂的稀释液或重构液；c任选地，至少一种选自SEQIDNo.1至SEQIDNo：156、优选为SEQIDNo.1至SEQIDNo：91的肽，以及d任选地，i使用溶液或ii重构和或使用冻干制剂的说明书。17.一种生产用于个体患者的个性化抗癌疫苗或化合物疗法和或细胞疗法的方法，所述方法包括：a识别个体患者的肿瘤样本所提呈的肿瘤相关肽TUMAP；b将a中识别的肽与已经针对免疫原性和或在肿瘤中相对正常组织过提呈进行预先筛选的肽库进行比较；c选择库中的与在该患者中识别的TUMAP匹配的至少一种肽；以及d基于步骤c生产和或制备个性化疫苗或化合物疗法或细胞疗法。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述TUMAP通过以下方法识别：a1将肿瘤样本的表达数据与肿瘤样本组织类型相应的正常组织样本的表达数据进行比较，以识别在肿瘤样本中过表达或异常表达的蛋白；和a2将表达数据与肿瘤样本中与MHCI类和或II类分子结合的MHC配体的序列相关联，以识别源自于肿瘤过表达或异常表达的蛋白的MHC配体。19.根据权利要求17或18所述的方法，其中包含在库中的肽基于以下步骤进行识别：aa.通过高度平行的方法，例如微阵列或基于测序的表达谱，进行全基因组信使核糖核酸mRNA表达分析，其包括识别相较于正常组织在恶性组织中过表达的基因；ab.选择步骤aa检测到的有选择地表达或过表达的基因所编码的肽，以及ac.通过选定的肽确定体内T细胞反应的诱导，包括使用来自健康供体或所述患者的人类T细胞而进行的体外免疫原性测定；或ba.用质谱法识别来自所述肿瘤样本的HLA配体；bb.通过高度平行的方法，例如微阵列或基于测序的表达谱，进行全基因组信使核糖核酸mRNA表达分析，其包括识别相较于正常组织在恶性组织中过表达的基因；bc.比较所识别的HLA配体与该基因表达数据；bd.选择步骤bc检测到的有选择地表达或过表达的基因所编码的肽；be.重新检测肿瘤组织上且在健康组织上缺乏或不经常检测到的由步骤bd选定的TUMAP，并确定在mRNA水平上过表达的相关性；以及bf.通过选定的肽确定体内T细胞反应的诱导，包括使用来自健康供体或所述患者的人类T细胞的体外免疫原性测定。20.根据权利要求17至19中任一项所述的方法，其还包括，识别该肿瘤样本与该个体患者的相应正常组织相比而独特具有的至少一种突变，以及选择与该突变相关的肽，使其包含于疫苗中或用于产生细胞疗法。

百度查询： 伊玛提克斯生物技术有限公司 用于头颈鳞状细胞癌和其他癌症免疫治疗的新型肽和支架