买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：华东师范大学

摘要：本发明公开了一种基于框架核酸的去甲肾上腺素荧光探针的制备及其应用。本发明制备方法中，首先合成对邻苯二酚类物质有荧光响应的以苯硼酸为母体的信号分子，然后将其偶联到有羟甲基、醛基、花青素荧光染料Cy3修饰的DNA单链上，四条单链DNA通过加热退火后形成DNA四面体，再修饰上靶向细胞膜的基团谷胱甘肽，由此构建一种新型的去甲肾上腺素探针。当溶液中存在NE时，所述探针可以与NE发生环化反应，导致探针荧光信号的猝灭，而参比分子Cy3的荧光不变，因此可实现对NE的定量检测。本发明可用于体外和或细胞内检测NE、细胞成像与生物传感、双光子检测、荧光寿命检测、比率型NE双光子荧光成像，和或细胞层面的FLIM成像中的应用，具有广泛应用前景。

主权项：1.一种基于框架核酸的去甲肾上腺素荧光探针，其特征在于，所述去甲肾上腺素荧光探针包括DNA四面体框架、荧光信号分子BA、荧光参比分子花青素荧光染料分子Cy3和靶向分子GSH；所述DNA四面体框架是由序列分别为SEQIDNO.1-4所示的四条单链所构成；荧光信号分子BA的结构为：所述基于框架核酸的去甲肾上腺素荧光探针的制备方法如下：1信号分子BA的制备1-1在1，4-二氧六环中，式14-溴-1，8-萘酸酐、式2双戊酰二硼和乙酸钾、1,1′-双二苯基膦二茂铁]二氯化钯在氮气保护下过夜回流，即第一反应，得到式3；所述第一反应过程如下反应式a所示： 1-2在乙醇中，炔丙胺和式3进行过夜回流，即第二反应，得到式4；所述第二反应过程如下反应式b所示： 1-3在THF和H2O的混合溶液中，所述式4和高碘酸钠搅拌，即第三反应，提纯后得到荧光信号分子BA，所述的反应过程如下反应式c所示； 2单链DNA与信号分子的偶联2-1四条单链DNA的序列分别为：A:5’-CHOGAGCH2OHCGTTAGCCACACACACAGTC-3'B:5‘-TTAGGCH2OHCGAGTGTGGCH2OHCAGAGGTGTN3-3'C:5‘-CGCCTAAACAAGTGGAGACH2OHCTGTGN3-3'D:5’-Cy3AACGCTCACCACH2OHCTTGAACACH2OHCCTC-3'；2-2BA分子与单链DNA的偶联：利用BA分子上的炔基和B、C两条DNA链上修饰的叠氮在碘化亚铜和抗坏血酸钠存在的条件下搅拌，通过点击化反应使BA分子与单链DNA进行偶联：所述反应过程如下反应式d所示； 3NE荧光探针的制备3-1步骤2中偶联上BA分子的B、C两条单链、A链和修饰参比分子Cy3的D链通过升温、退火形成DNA四面体；3-2在步骤3-1的基础上，在溶液中加入细胞膜靶向分子GSH进行反应，得到所述去甲肾上腺素荧光探针即基于DNA框架靶向细胞膜的比率型NE双光子荧光探针。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华东师范大学 一种基于框架核酸的去甲肾上腺素荧光探针的制备及其应用