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申请/专利权人：中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种荧光标记周细胞斑马鱼模型的构建方法与应用。本发明利用CRISPRCas9基因编辑技术合成cd248a基因打靶位点gRNA；根据斑马鱼cd248a基因的起始密码子上下游序列设计同源臂，并构建包含EGFP‑P2A序列的重组载体；通过显微注射将cas9mRNA、gRNA和重组质粒注射到斑马鱼受精卵的动物极中；在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况，筛选得到纯合周细胞表达绿色荧光的斑马鱼敲入模型。该斑马鱼敲入模型可以在活体斑马鱼示踪cd248a基因的时空表达模式和表达水平，也可以直接观察分析斑马鱼血管周细胞的发育变化，对周细胞相关疾病研究具有重要意义。
主权项：1.用于构建荧光标记周细胞斑马鱼模型的重组载体，其特征在于，所述重组载体含有核苷酸序列如SEQIDNO.7所示的DNA分子。
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百度查询： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 荧光标记周细胞斑马鱼模型的构建方法与应用
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