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申请/专利权人：杭州环特生物科技股份有限公司
摘要：本发明属于类器官技术领域。本发明公开了一种基于肠道类器官评价肠道衰老改善效应的方法及应用，其包括S1：小肠类器官离心得到类器官沉淀，S2：基础培养基重悬类器官沉淀，经过滤得到小肠类器官滤液，S3：将小肠类器官滤液离心处理，加入基质胶溶液重悬小肠类器官沉淀得到小肠类器官基质胶混悬液，吹打均匀后铺板于微孔板中，S4：细胞固化，S5：加入培养基培养，S6：加入造模剂，继续培养，同时设置对照组，S7：进行细胞活力检测或衰老相关标志物β‑半乳糖苷酶活力检测。本发明可解决常规单一细胞系与机体肠道结构及细胞组成差异较大的问题，弥补了体外二维模型和体内模型之间的沟壑，同时兼具时间短、通量高及结果直观的优势，适用于改善肠道衰老的活性成分高通量体外筛选。
主权项：1.一种基于肠道类器官评价肠道衰老改善效应的方法，其特征在于，包括：S1：取生长良好的小肠类器官进行离心处理，离心之后弃上清及基质胶得到类器官沉淀；S2：使用基础培养基重悬类器官沉淀，经细胞筛网过滤，收集小肠类器官滤液并进行芽孢计数；S3：将小肠类器官滤液进行离心处理，弃去上清，加入基质胶溶液进行重悬，得到小肠类器官基质胶混悬液，吹打均匀后铺板于微孔板中；S4：铺板完成后将微孔板置于细胞培养箱中固化；S5：固化后向微孔板的每孔加入一定量的小肠类器官培养基，并置于培养箱内进行培养；S6：培养一段时间后向微孔板内加入一定量包含混合样品溶液的造模培养基，同时设置对照组，将微孔板置于培养箱内继续培养，培养完成后向微孔板的每孔加入细胞活力检测试剂或衰老相关标志物β-半乳糖苷酶的活力检测试剂，在细胞培养箱中孵育一定时间后对小肠类器官细胞进行细胞活力及β-半乳糖苷酶活力检测。
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