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一种无需扩增的AFB1适配传感器及其制备和检测方法 

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申请/专利权人:四川轻化工大学

摘要:本发明涉及一种无需扩增的AFB1适配传感器及其制备和使用方法,该传感器由热解法制备的Fe‑N‑C单原子纳米酶、Fe‑Co磁性纳米颗粒、AFB1适配体和CRISPR‑Cas12a系统组成,Fe‑N‑C单原子纳米酶和Fe‑Co磁性纳米颗粒通过ssDNA连接形成纳米复合物,作为催化TMB显色反应的纳米酶探针。AFB1适配体特异性识别AFB1,并激活CRISPR‑Cas12a切割ssDNA,释放游离Fe‑N‑C纳米酶,催化TMB显色,结合磁分离富集和CRISPR‑Cas12a信号放大,实现了对AFB1的超灵敏、特异性检测,无需样品预扩增处理。检出限达1.5×10‑7ngμL,线性范围为1×10‑6~1ngμL,灵敏度和特异性较好,本发明操作简便,灵敏度高,有望在食品安全和环境监测等领域实现AFB1的现场快速筛查。

主权项:1.一种无需扩增的AFB1适配传感器,其特征在于:包括Fe-N-C单原子纳米酶、Fe-Co磁性纳米颗粒、黄曲霉毒素(AFB1)适配体和CRISPR-Cas12a系统;所述Fe-N-C单原子纳米酶通过热解法制备,所述Fe-N-C单原子纳米酶具有过氧化物酶样活性;所述Fe-Co磁性纳米颗粒通过热解法制备,用于实现磁分离和信号放大;所述黄曲霉毒素(AFB1)适配体,用于特异性识别AFB1并激活CRISPR-Cas12a的反式切割活性;所述CRISPR-Cas12a系统,包括Cas12a蛋白和特异性crRNA,所述Cas12a蛋白和特异性crRNA与AFB1适配体共同构成AFB1识别和信号放大单元;所述Fe-N-C单原子纳米酶和Fe-Co磁性纳米颗粒的纳米复合物通过ssDNA连接作为比色反应的催化剂和信号放大单元;所述AFB1适配传感器的检出限优选为1.5×10-7ngμL,优选无需对待测样品进行预扩增处理。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 四川轻化工大学 一种无需扩增的AFB1适配传感器及其制备和检测方法

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