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经改善的用于检测磷脂酶C的酶活力的方法及产品 

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申请/专利权人:丰益(上海)生物技术研发中心有限公司

摘要:本申请提供了经改善的用于检测磷脂酶C的酶活力的方法以及用于检测磷脂酶C的酶活力的产品。使用本申请的方法或产品可以更精确地定量酶活力,检测成本低,便于高通量地进行筛选或检测,能够满足规模化工业生产的检测需求。

主权项:1.用于检测磷脂酶C的酶活力的方法,其包括如下步骤:1在反应体系中使磷脂酶C酶促水解磷脂,其中所述反应体系包含磷脂酶C反应所需的活性金属离子和Tritonx-100,并且所述反应体系的pH为4.4-5.4,所述磷脂的浓度为0.8%~3%wv,所述Tritonx-100的浓度为20mM~80mM,磷脂酶C酶促水解磷脂的反应温度为30℃-55℃,以及所述活性金属离子为Ca2+和Zn2+;2向所述反应体系中添加Tris-HCl缓冲液,并随后添加与水不混溶的有机溶剂;3相分离后,使水相溶液与磷酸酶接触,然后在酸性条件下与钼酸或钼酸盐接触,并进一步与还原剂反应;4在600-810nm下测定吸光值,并利用磷钼蓝检测的标准曲线计算所述磷脂酶C的酶活力。

全文数据:

权利要求:

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