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申请/专利权人：皖西学院
摘要：本发明涉及一种提高热稳定性的糖基转移酶突变体及其在红景天苷合成中的应用，属于酶工程技术领域。本发明首先采用计算机辅助设计的方式获得一系列热稳定性显著提高的单点突变株，随后通过对单点突变进行有序组合，获得了热稳定性进一步提高的2点至6点组合突变株，热稳定性研究结果显示最优突变体在40℃的半衰期相比于原始酶提高了133.5倍。将本发明获得的热稳定性突变体用于红景天苷的多酶合成，产量均获得了显著提高，滴度最高达到13.8gL，是未突变前的4.2倍。本发明成功地解决了红景天苷酶法合成过程中糖基转移酶稳定性差的关键问题，表现出非常大的工业应用前景。
主权项：1.一种糖基转移酶突变体，其特征在于：将SEQIDNO.1所示氨基酸序列的第304位苏氨酸Thr、第307位的甘氨酸Gly、第309位的天冬酰胺Asn、第123位苯丙氨酸Phe、第344位的苏氨酸Thr、第271位的天冬氨酸Asp分别突变为缬氨酸Val、丙氨酸Ala、色氨酸Trp、色氨酸Trp、缬氨酸Val、甘氨酸Gly；或将SEQIDNO.1所示氨基酸序列的第304位苏氨酸Thr、第307位的甘氨酸Gly、第309位的天冬酰胺Asn、第123位苯丙氨酸Phe、第344位的苏氨酸Thr分别突变为缬氨酸Val、丙氨酸Ala、色氨酸Trp、色氨酸Trp、缬氨酸Val；或将SEQIDNO.1所示氨基酸序列的第304位苏氨酸Thr、第307位的甘氨酸Gly、第309位的天冬酰胺Asn、第123位苯丙氨酸Phe分别突变为缬氨酸Val、丙氨酸Ala、色氨酸Trp、色氨酸Trp；或将SEQIDNO.1所示氨基酸序列的第304位苏氨酸Thr、第307位的甘氨酸Gly、第309位的天冬酰胺Asn分别突变为缬氨酸Val、丙氨酸Ala、色氨酸Trp；或将SEQIDNO.1所示氨基酸序列的第304位苏氨酸Thr、第307位的甘氨酸Gly分别突变为缬氨酸Val和丙氨酸Ala。
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百度查询： 皖西学院 一种提高热稳定性的糖基转移酶突变体及其在红景天苷合成中的应用
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