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一种通过特异引物探针鉴定miRNA的方法及miRNA提取试剂盒 

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申请/专利权人:青岛万物新生生物医疗科技有限公司

摘要:本发明涉及生物学检测领域,具体公开了一种通过特异引物探针鉴定miRNA的方法及miRNA提取试剂盒;本发明经过系统研究、并反复使用不同样本验证得出最有效的生物标志物组合miRNAs,提出miR‑17、miR‑24、miR‑25、miR‑155作为变异组织的诊断生物标志物,为早期生物变异体分子诊断与处理提供了理论支撑,建立了一种Taqman探针多重实时荧光定量PCR体系来克服miRNAs序列短、血清含量低和高度同源性等难以检测的特性,达到便捷快速、高度特异性地检测血清样本中多种靶标miRNA的目的,提供的方法和试剂盒能够用于早期生物变异组织的筛查与鉴别,具有检出谱系广、灵敏度高、特异性好、检测成本低、取材方便、样本易存放等优点。

主权项:1.一种通过特异引物探针鉴定miRNA的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:S1、筛选血清miRNA标志物,根据标志物设置多对特异引物探针,将多对不同的特异引物探针混合在一起组成完整的特异引物探针混合液,使用U6作为内参,将目标miRNA与U6在统一体系中进行反应;S2、选取逆转录酶反应液和PCR酶反应液,与特异引物探针混合液组成检测系统;S3、设置100例阳性样本和100例阴性样本,提取样本中miRNA;S4、将miRNA上机检测,得到每个靶基因的监测Ct值,以U6为内参归一化,统计计算靶基因的定量Cut-off值,搭建判断模型,对样本进行阴阳性判断。

全文数据:

权利要求:

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