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检测犬瘟热病毒的方法及其检测传感器和制备方法 

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申请/专利权人:重庆理工大学;重庆市动物疫病预防控制中心

摘要:本发明公开了检测犬瘟热病毒的方法及其检测传感器和制备方法,检测传感器由布拉格光纤光栅纤芯表面依次进行羟基化、硅烷化修饰、涂覆金纳米壳、羧基化、活化羧基化后的羧基基团、修饰单克隆抗体和封闭得到;利用该传感器搭建生物传感器检测平台,对临床样本检测具有灵敏度高、重复性和特异性好的特点,能够用于抗原蛋白如犬瘟热病毒核衣壳蛋白,为抗原蛋白提供了新的检测方法。

主权项:1.基于布拉格光纤光栅的检测传感器,其特征在于:所述检测传感器由布拉格光纤光栅纤芯表面修饰金纳米壳后再固定单克隆抗体而得;所述单克隆抗体为特异识别犬瘟热病毒的单克隆抗体;所述布拉格光纤光栅纤芯由氢氟酸腐蚀至纤芯直径为6μm~8μm;所述氢氟酸腐蚀包括光纤包层腐蚀和光纤纤芯腐蚀,所述光纤包层腐蚀使用体积分数为20%-40%的氢氟酸;所述光纤纤芯腐蚀使用体积分数为5%-10%的氢氟酸;所述检测传感器的制备方法包括布拉格光纤光栅的光纤包层腐蚀和光纤纤芯部分腐蚀、羟基化、硅烷化修饰、涂覆金纳米壳、羧基化、活化羧基化后的羧基基团、修饰单克隆抗体和封闭;所述羟基化的方法是将腐蚀后的光栅浸泡于浓度为2M的NaOH中,干燥即可;所述硅烷化修饰将羟基化后的光栅APTES溶液中,浸泡后用水冲洗去除多余的APTES溶液,干燥即可;所述涂覆金纳米壳是将金纳米壳涂覆于硅烷化修饰的光栅表面并过夜,清洗即可;所述活化羧基化后的羧基基团是将涂覆金纳米壳的光栅用11-巯基十一烷酸乙醇溶液浸泡,使光栅表面充满羧基基团后用乙醇和PBS清洗去除11-巯基十一烷酸乙醇溶液;再用体积比3:1的EDCNHS溶液浸泡,使羧基基团活化,清洗出去多余EDCNHS溶液;所述修饰单克隆抗体为将活化羧基化后的光栅放入含有单克隆抗体的溶液中,使单克隆抗体能充分与金纳米壳修饰的光栅表面的羧基位点结合;所述封闭为将修饰单克隆抗体的光栅浸泡于质量分数为5%脱脂奶粉中,使单克隆抗体将光栅表面特异性位点封闭,清洗即可。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 重庆理工大学 重庆市动物疫病预防控制中心 检测犬瘟热病毒的方法及其检测传感器和制备方法

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