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申请/专利权人：大连理工大学
摘要：本发明涉及一种由干细胞快速诱导分化胆碱能神经元或多巴胺能神经元的方法，属于干细胞神经向诱导分化技术领域。所述培养基是在现有的神经元诱导培养基基础上进行了改良，添加了全反式维甲酸和Rock抑制因子；所述细胞培养基底，使用L‑多聚赖氨酸进行预处理，再使用Matrigel基质胶或层粘连蛋白进行包被，使得到的胆碱能神经元和多巴胺能神经元成熟速度更快，轴突更长。本发明提供了一种由人源干细胞高通量诱导分化胆碱能神经元和多巴胺能神经元的方法，避免了传统神经体外模型所使用的动物来源神经元具有的种属差异性，并且得到的神经元具有良好功能性，可用于神经相关模型的研究。
主权项：1.一种由干细胞快速诱导分化胆碱能神经元或多巴胺能神经元的方法，其特征在于，所述的方法是使用改良神经元诱导培养基，或者在使用改良神经元诱导培养基的基础上配合改良基底包被条件，使得干细胞快速诱导分化胆碱能神经元细胞或多巴胺能神经元细胞；所述的改良神经元诱导培养基是Neurobasal神经基础培养基和AdvancedDMEMF12培养基混合得到混合神经元诱导培养基，当干细胞诱导分化胆碱能神经元时，再向混合神经元诱导培养基中添加：培养基添加剂B27、N2，神经营养因子BDNF、GDNF、EGF、FGF，神经生长因子β-NGF，神经诱导因子NT-3，并添加全反式维甲酸、Rock抑制因子，得到改良胆碱能神经元ATRA诱导培养基；当干细胞诱导分化多巴胺能神经元时，再向混合神经元诱导培养基中添加：培养基添加剂B27、N2，神经营养因子BDNF、GDNF、EGF、FGF，神经诱导因子CAMP，并添加全反式维甲酸、Rock抑制因子，得到改良多巴胺能神经元ATRA诱导培养基；所述的改良基底包被条件是指向细胞培养孔板瓶中加入L-多聚赖氨酸工作液，孵育后再加入Matrigel基质胶工作液或层粘连蛋白工作液，再次孵育后备用。
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百度查询： 大连理工大学 一种由干细胞快速诱导分化胆碱能神经元或多巴胺能神经元的方法
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